刘志学
- 作品数：3 被引量：39H指数：3
- 供职机构：复旦大学生命科学学院遗传学研究所更多>>
- 发文基金：上海市科学技术委员会资助项目更多>>
- 相关领域：农业科学生物学更多>>
- 用LBA4404/pCAMBIA系列转化水稻的最佳条件被引量：23
- 1999年
- 用带有ｇｕｓ报告基因的农杆菌ＬＢＡ４４０４／ｐＣＡＭＢＩＡ１３０１ 转化水稻品种鄂宜１０５ 成熟胚诱导的愈伤组织，以ｇｕｓ基因瞬间表达活性为指标测定转化频率，对于利用ｐＣＡＭＢＩＡ 表达载体系列进行水稻遗传转化的最佳条件进行了初步的研究．结果表明：最适菌液浓度值为Ｄ（６００）＝ １．０；最适共培养温度为２２～２８ ℃；共培养培养基的ｐＨ 值在５．２～６．２ 这一较宽的范围内均可．共培养时间以不超过３ ｄ 为宜；在共培养培养基中加入乙酰丁香酮对提高转化效率非常重要，而在菌液中加入乙酰丁香酮处理对提高转化效率作用不大．但不同品种，甚至不同转化受体之间存在一定的差别，其最佳转化条件应视具体情况在此基础上加以摸索．
- 刘志学张旭徐亚南何艺园马向前沈大棱唐克轩
- 关键词：农杆菌水稻
- 农杆菌介导GNA基因对水稻的遗传转化被引量：14
- 2000年
- 在 pCAMBIA330 0质粒中插入带有RSs 1启动子的GNA基因 ,并利用农杆菌介导的遗传转化将其导入水稻的微不定芽受体 ,得到了再生植株 .PCR ,Southernblot和Westernblot的检测结果初步证明GNA基因已经整合到水稻的基因组中并得到了表达 .
- 刘志学何艺园曹清玉王卉徐亚南马向前唐克轩
- 关键词：农杆菌GNA基因水稻介导
- 水稻共生菌DX01的分子鉴定及电击转化条件的初步探索被引量：3
- 2000年
- 用PCR的方法扩增了水稻表面共生菌DX0 1的 16SrDNA片段 ,并进行了部分序列的测定和BLAST同源序列比较分析 ,结果表明 ,该序列 3′端 5 5 0bp与短小芽孢杆菌 (Bacilluspumilus) 16SrDNA的同源性达 99% ,5′端 6 80bp为 98% ,故DX0 1应为B .pumilus.对其电击法转化的部分条件进行了初步的探索 ,结果表明 :当细菌处于D(6 0 0 )为 0 9的生长期时 ,使用PEB作为电击缓冲液 ,对 2 0 0 μL体积的细胞悬液在电容 2 5 μF ,电阻2 0 0Ω ,电压 1 9kV的电击条件进行完整质粒转化可得到较高的转化率 .
- 曹清玉刘志学曲志才严建王海波沈大棱
- 关键词：电击法病害分子鉴定
