刘学琦
- 作品数:3 被引量:2H指数:1
- 供职机构:中国科学院生物物理研究所更多>>
- 发文基金:国家自然科学基金国家重点基础研究发展计划更多>>
- 相关领域:生物学医药卫生更多>>
- 人源CLP的表达、纯化及生化特性研究被引量:1
- 2008年
- 目的:为进一步研究CLP(coactosin-like protein)与5'-脂氧合酶、肌动蛋白的相互作用机制及功能,开展CLP克隆表达、分离纯化研究,以得到高纯度的CLP,并对其生物化学特性进行分析测定。方法:从人的胎肝cDNA文库中经PCR扩增得到CLP基因,克隆到原核表达载体pGEX-6p-1中并获得高效表达,经过Glutathione Sepharose 4B亲和层析和Superdex75分子筛纯化,得到高纯度的CLP;在此基础上进行SDS-PAGE、动态光散射和分析型超速离心等实验,并进一步分析实验结果。结果:CLP在溶液中主要以单体形式呈现;CLP的摩擦率为1.909,证实该蛋白质具有线性化趋势存在的可能性,且线性化程度较高。结论:实验结果揭示了CLP作为线性化蛋白质的可能性,为进一步搭建CLP和丝状肌动蛋白的作用模型奠定了一定的数据基础。
- 单萍许凌峰刘学琦郝宁周义发李雪梅
- 关键词:纯化生化特性
- 热休克转录因子结合蛋白的晶体学研究
- 热休克反应(heat shock response,HSR)是细胞在受到缺氧、病毒感染等应激因素刺激下,为适应微环境的改变而发生的一种自身保护性反应,以暂时性下调细胞正常代谢和选择性上调热休克蛋白(heat shock ...
- 刘学琦
- 关键词:热休克反应热休克蛋白启动子晶体结构
- 热休克因子结合蛋白(HSBP1)的表达、纯化、结晶与初步晶体学研究(英文)被引量:1
- 2010年
- 热休克反应(heat shock response,HSR)是细胞在缺氧、病毒感染等应激因素刺激下,为适应微环境的改变而发生的一种自身保护性反应,以暂时性下调细胞正常代谢和选择性上调热休克蛋白(heat shock protein,HSP)的表达为特点.HSR是通过热休克转录因子(heat shock transcription factor,HSF)与相应的启动子结合,启动转录过程,进而促使HSP的表达来实现,其中HSF1是最有代表性、研究最多的一种HSF.HSF1在无活性的单体及有活性的三聚体之间的转变和平衡是转录调控的关键.热休克因子结合蛋白(heat shock factor binding protein,HSBP1)是一个含有两个伸展的疏水重复区,与HSF1的三聚体区域相互作用,以其伴侣形式实现对HSF1的DNA结合活性有负调节作用,通过抑制HSF1与DNA结合活性,从而抑制HSF1的转录活性.为了深入研究HSBP1行使功能的结构基础,对HSBP1蛋白成功地进行了克隆表达和结晶,该晶体属于R3空间群,其晶胞参数为a=b=35.2,c=233.3.
- 张红彦刘学琦孙玉娜郝宁李雪梅娄智勇
- 关键词:纯化