刘佩兰
- 作品数：54 被引量：436H指数：8
- 供职机构：中国动物卫生与流行病学中心更多>>
- 发文基金：国家科技重大专项国家科技部农业科技成果转化资金更多>>
- 相关领域：农业科学生物学哲学宗教更多>>
- 鸡传染性喉气管炎免疫扩散试验研究被引量：4
- 1997年
- 鸡传染性喉气管炎免疫扩散试验的最佳条件是：用ＳＰＦ鸡胚成纤维细胞（ＣＥＦ）或鸡胚肾细胞（ＣＥＫ）制备抗原，用８％ＮａＣｌ的ＰＢＳ（ｐＨ７．２）配制１％的琼脂糖，孔径、孔距均为３ｍｍ。
- 范根成王志亮杜元钊朱万光刘佩兰牛建强赵彦彬
- 关键词：鸡传染性喉气管炎病毒琼扩试验
- 鸡传染性支气管炎肾型毒株的分离与鉴定被引量：4
- 1995年
- 山东某些大型鸡场近年连续暴发一种传染快、发病急、死亡率高的呼吸道疾病，主要是肾脏病变，从死亡率较高的几批雏鸡分离到两株病毒19401，H9402．接种鸡雏可使其发病、死亡。通过鸡胚接种、血凝试验、电镜形态观察，分离物为传染性支气管炎病毒。经血清中和试验鉴定这两株病毒为肾型IBV株。
- 杜元钊朱万光刘佩兰范根成
- 关键词：鸡病传染性支气管炎肾型毒株
- 单抗捕捉ELISA检测猪附红细胞体血清抗体方法的建立被引量：7
- 2009年
- 在制备针对猪附红细胞体病的特异性单克隆抗体的基础上,建立了单抗捕捉快速检测猪附红细胞体病抗体的ELISA方法,并对影响ELISA结果的各项反应条件进行了优化。结果表明,猪附红细胞体腹水单抗的最佳稀释度为1∶20 000,猪附红细胞体病抗原工作质量浓度为4.088 mg/L,血清稀释度为1∶40,HRP标记的兔抗猪IgG的工作浓度为1∶5 000。待检血清和酶标二抗的反应时间均为37℃1 h;底物在室温显色时间为10 min。已建立的ELISA方法与PCR平行检测50份样本,总符合率为92%,表明该方法特异性强、快速、敏感性高。用该法检测了各地采集的171份血清,阳性率为40.4%,与镜检的符合率为59.2%;阴性率为47.4%,与镜检的符合率为66.7%,总符合率为67.3%。
- 张浩单虎吴延功张守富吴晓东王志亮刘佩兰朱绍辉
- 关键词：猪附红细胞体病单克隆抗体抗体检测
- 重组N蛋白抗原检测PRRSV抗体ELISA的研究Ⅲ.ELISA试剂盒的制造及保存期试验
- 对抗原包被板、酶标二抗、阳性血清、阴性血清和试剂盒的保存条件进行摸索,并组装成试剂盒,试剂盒保存12个月结果稳定.本研究还对影响试剂盒生产和操作的几个问题进行了探索,为该试剂盒的进一步开发和商品化奠定了较好的基础。
- 吴延功徐天刚王志亮张喜悦王君玮宋翠平刘佩兰徐培莲宋芳
- 关键词：猪繁殖呼吸综合征ELISA试剂盒重组N蛋白抗原检测保存期试验
- 文献传递
- 鸡病毒性关节炎琼脂凝胶免疫扩散试验方法
- 本标准规定了检测鸡血清中鸡病毒性关节炎群特异性抗体的琼脂凝胶免疫扩散方法。 本标准适用于未免疫鸡群鸡病毒性关节炎的血清学诊断及用鸡病毒性关节炎疫苗免疫后的抗体检测。
- 吴晓东吴延功朱万光杜元钊范根成刘佩兰
- 关键词：病毒关节炎病毒检测琼脂
- 文献传递
- 抗猪附红细胞体单克隆抗体的制备被引量：4
- 2007年
- 以纯化的猪附红细胞体免疫BALB/c小鼠,运用淋巴细胞杂交瘤技术进行细胞融合,并用间接ELISA方法进行筛选,经过间接ELISA方法、免疫印迹和间接免疫荧光试验进行鉴定,共获得5株分泌抗猪附红细胞体单克隆抗体的杂交瘤细胞,分别命名为1H1、1H2、3A5、5B1和7E11,其单抗亚类鉴定分别属于IgG2b、IgG1、IgG2b、IgG2b和IgG2b。这5株McAb均能与猪附红细胞体全菌蛋白发生特异性反应,而不与猪肺炎支原体、猪链球菌、大肠杆菌和猪繁殖与呼吸综合征病毒发生反应,并且1H1、3A5和5B1能识别同一抗原位点,1H2和7E11识别另一抗原位点。
- 张浩吴晓东张守富单虎吴延功王志亮刘佩兰朱绍辉
- 关键词：杂交瘤猪附红细胞体单克隆抗体间接ELISA
- 鸡传染性喉气管炎病毒的分离与鉴定被引量：1
- 1997年
- 鸡传染性喉气管炎病毒的分离与鉴定范根成杜元钊朱万光王志亮刘佩兰赵维祥１）（农业部动物检疫所青岛２６６０３２）鸡传染性喉气管炎（ＩＬＴ）是由疱疹病毒引起的一种急性、高度接触性传染病，以呼吸困难、气喘、咳出血样渗出物为特征。此病最早发生于美国、欧洲、澳大...
- 范根成杜元钊朱万光王志亮刘佩兰赵维祥
- 关键词：鸡病传染性喉气管炎病毒
- 蓝舌病单克隆抗体的研制
- 1991年
- 作者应用淋巴细胞杂交瘤技术,将小鼠骨髓瘤细胞SP_2(?)0—Ag14与提纯篮舌病10型病毒免疫的小鼠脾细胞进行杂交,制备能分泌抗蓝舌病病毒的单克隆细胞株225个,经三次克隆化,选择了35株杂交瘤细胞制备腹水,用间接ELISA和间接免疫荧光与蓝舌病病毒排谱反应表明,获得单抗中有12株具有群特异性。用蓝舌病病毒1、2、3、4、5、6、8、10、15和17型高免血清作阻断ELISA试验,单克隆抗体7D_8和2D_12有很明显阻断作用,可望用于检测临床样品。
- 郑志刚刘佩兰杨承瑜郑增忍王永玲杜元钊
- 关键词：蓝舌病单克隆抗体
- 重组N蛋白抗原检测PRRSV抗体ELISA的研究 Ⅱ.试剂盒阴阳性临界值的测定及其与IDEXX公司试剂盒的比较被引量：7
- 2006年
- 对临床上采集的899份猪血清样本,用以纯化的重组N蛋白为包被抗原建立的检测猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)抗体的间接EL ISA进行检测,运用统计学方法摸清了检测结果的分布规律,并和国外IDEXX公司PRRSV抗体检测试剂盒同时对460份血清样本进行检测,结果表明,2种方法的符合率为91.73%。利用TG-ROC软件确定了自制的EL ISA酶标板(NP-EL ISA)的临界值,并标定试剂盒的特异性和敏感性均为92.6%。EL ISA的结果判定标准是:当以血清样本L为标准参考阳性血清时,样品与阳性血清的比值(S/P)小于或等于0.4为阴性;S/P在0.4与0.5之间为可疑;S/P大于或等于0.5为阳性。与IDEXX公司PRRSV抗体检测试剂盒对临床样品的检测结果进行比较后,初步判定所建立的EL ISA之所以出现较多的假阴性,可能是目前临床上出现了PRRSV欧洲型所致。
- 吴延功徐天刚王志亮张喜悦王君玮宋翠平刘佩兰徐培莲宋芳许立华陈溥言
- 关键词：猪繁殖与呼吸综合征病毒试剂盒重组N蛋白
- 单抗捕捉ELISA检测猪附红细胞体血清抗体方法的建立
- 2008年
- 张浩单虎吴延功张守富吴晓东王志亮刘佩兰朱绍辉
- 关键词：ELISA检测血清抗体抗体方法家畜附红细胞体病ELISA方法
