刘云迎
- 作品数：2 被引量：0H指数：0
- 供职机构：扬州大学兽医学院更多>>
- 发文基金：江苏省高校重点实验室开放研究课题更多>>
- 相关领域：农业科学医药卫生更多>>
- 罗丹明B单克隆抗体的制备及初步鉴定
- 2016年
- 采用N-羟基琥珀酰亚胺活性脂（NHS）法将罗丹明B（Rhodamine B,RB）与牛血清白蛋白（BSA）和卵清蛋白（OVA）分别偶联形成免疫原和检测原,经紫外分光光度计扫描鉴定初步判断偶联成功。以人工合成免疫原免疫BALB/c小鼠,利用杂交瘤技术获得了3株稳定分泌针对RB抗体的杂交瘤细胞株,分别命名为2D1、4C3和7F11,将7F11注入BALB/c小鼠腹腔产生腹水,用所得到的腹水建立了间接竞争ELISA（ic ELISA）标准曲线。对ic ELISA的工作条件进行了优化,方阵试验确定了包被抗原的工作浓度为1∶2 000,腹水抗体的工作浓度为1∶64 000。利用RB作药物抑制标准曲线,其线性方程为y=0.2848x-0.2847（R2=0.9924）,线性范围为1-1 000 ng/m L,最低检测浓度为1 ng/m L。交叉试验表明,该单抗与RB的抑制率为100%,与罗丹明6G、罗丹明123、苯酚红、副品红、中性红、曙红Y、橙黄Ⅱ、甲基橙、结晶紫均无交叉反应。
- 徐声乐李道云王兴刘金萍刘云迎张伟秦海艳刘若璇蔡云红王捍东
- 关键词：单克隆抗体罗丹明BELISA
- 糖化酶单抗的研制及其抗原识别位点的分析
- 2012年
- 为建立掺糖造假蜂蜜中残留糖化酶的检测方法,用从黑曲霉中提取的糖化酶作为免疫原,免疫BALB/c小鼠,利用杂交瘤技术获得了12株稳定分泌针对糖化酶抗体的杂交瘤细胞株。单克隆抗体亚型鉴定结果显示,10株为IgG1,2株为IgG2b,轻链均为κ轻链。Western blotting分析结果表明,12株抗体均可特异性结合糖化酶。其中6株单抗(McAb-2H4F9、6H9D8、8F2F11、8F2E9、1A8G6、1C4D5)细胞株采用体内诱生法制备的腹水效价均1∶1×104以上。采用抗体叠加试验对这6株抗糖化酶单抗的抗原识别位点进行检测,反应增殖结果表明,6株单抗分别针对4类不同抗原位点,McAb-6H9D8和McAb-8F2F11针对第Ⅰ种抗原决定簇;McAb-1A8G6和McAb-1C4D5针对第Ⅱ种抗原决定簇;McAb-8F2E9针对第Ⅲ种抗原决定簇;McAb-2H4F9针对第Ⅳ种抗原决定簇。制备的抗体针对不同的抗原表位,为双抗夹心ELISA方法的建立提供前提。
- 张丹姜威李双喜汪惠泽冯云飞刘云迎李东明何祥来王捍东
- 关键词：单克隆抗体
