张伟
- 作品数：13 被引量：39H指数：4
- 供职机构：扬州大学兽医学院更多>>
- 发文基金：江苏省高校重点实验室开放研究课题江苏高校优势学科建设工程资助项目国家自然科学基金更多>>
- 相关领域：农业科学轻工技术与工程生物学医药卫生更多>>
- 马波沙星人工抗原的合成及其免疫原性的鉴定被引量：7
- 2018年
- 合成、鉴定了马波沙星（MBF）人工抗原,为马波沙星单克隆抗体的制备及其免疫学检测方法的建立奠定基础。以牛血清白蛋白（BSA）、鸡卵清蛋白（OVA）为载体蛋白,采用碳二亚胺法分别合成马波沙星免疫抗原（MBF-BSA）和包被抗原（MBF-OVA）,并使用紫外分光光度法、SDS-PAGE、ELISA方法鉴定人工抗原合成效果。初步鉴定结果显示,MBF-BSA与MBF-OVA均偶联成功;用免疫抗原MBF-BSA免疫小鼠,经ELISA方法检测,五免后血清中抗体效价可达1∶5.12×105,半数抑制率为90.20 ng/m L。研究表明,马波沙星人工抗原合成成功,其免疫抗原具有良好的免疫原性,免疫小鼠可获得高效价、高特异性多克隆抗体。
- 汝晓飞张伟王兴秦海艳周小钰侯珂刘若璇蔡云虹王捍东
- 关键词：人工抗原免疫原性兽药残留
- 抗头孢氨苄单克隆抗体的制备与初步应用被引量：2
- 2017年
- 为制备抗头孢氨苄(cephalexin,CEX)的单克隆抗体并建立鲜奶中CEX残留检测的ELISA方法,本试验采用戊二醛两步法分别将CEX与牛血清白蛋白(BSA)、卵清白蛋白(OVA)偶联,用合成的CEX-BSA作为免疫原免疫BALB/c雌鼠;5次免疫后,应用杂交瘤细胞融合技术建立并筛选出两株(2G4、5B3)分泌抗CEX单克隆抗体(monoclonal antibodies,McAb)的杂交瘤细胞株,将2G4细胞株注入BALB/c小鼠腹腔制备腹水,并对腹水进行纯化及鉴定。结果显示,2G4腹水效价大于1∶1.28×10~5,其抗体亚型为IgG2b(κ),亲和力常数K=1.51×10~9 L/mol;交叉试验结果显示,该单克隆抗体除了与头孢拉定有52.55%的交叉反应率外,与头孢噻呋、头孢曲松、头孢噻肟、头孢噻吩、青霉素、链霉素、四环素均无明显交叉反应;建立了测定鲜奶样品中CEX的ELISA方法,线性范围为20~1 000ng/mL,线性方程y=0.4674x-0.5359(R^2=0.9909),检测下限为19.68ng/mL,平均回收率为91.31%,平均变异系数低于15%,低于中国及欧盟规定的头孢氨苄最高残留限量,具有一定的应用前景。
- 张伟王兴刘金萍徐声乐秦海艳刘若璇蔡云虹汝晓飞侯珂王捍东
- 关键词：单克隆抗体头孢氨苄ELISA人工抗原
- 罗丹明B及其在食品中检测方法研究进展被引量：10
- 2015年
- 罗丹明B(Rhodamine B,RB)是一种具有鲜桃红色的人工合成的三苯甲烷类碱性染料,曾经用作食品添加剂,但后来实验证明RB具有潜在的毒性、致癌和致突变性,现我国和欧盟等都不允许在食品中添加。本文对RB的性质、危害及其国内外对RB样品前处理和检测方法的研究进展做了介绍。
- 徐声乐王兴刘金萍张伟秦海艳刘若璇蔡云红王捍东
- 关键词：罗丹明B食品添加剂样品前处理
- 仿生瘤胃系统发酵玉米淀粉制备异麦芽低聚糖菌质的研究
- 异麦芽低聚糖能有效的促进肠道有益细菌一双歧杆菌的生长繁殖,故又称为"双歧杆菌生长促进因子",简称"双歧因子"。本研究通过对4头装有永久性瘤胃瘘管的地方品种成年山羊饲喂高水平玉米配合料进行菌株的驯化培育。测得活体山羊瘤胃 ...
- 林琳王怀蓬黄凯柏冬星赵学敏刘艳玲孙镇平张云春顾长银张伟孙殿平陈年泉王春定
- 文献传递
- 禽致病性大肠杆菌CE129 Ⅵ型分泌系统主要亚单位基因hcp1、hcp2缺失株的构建与验证被引量：5
- 2018年
- 为获得禽致病性大肠杆菌(APEC)CE129 Ⅵ型的hcp1、hcp2基因缺失株,本研究利用Red同源重组系统对APEC野生株CE129的Ⅵ型分泌系统(T6SS)hcp1和hcp2基因进行敲除,获得hcp1、hcp2基因单缺失株CE129△hcp1、CE129△hcp2和双缺失株CE129△hcp1△hcp2。将hcp1、hcp2基因分别克隆到表达载体pBR322和pACYC184中,构建相应的基因回补株CE129△hcp1/phcp1、CE129△hcp2/phcp2和CE129△hcp1△hcp22/phcp1phcp2。通过PCR特异性检测和基因测序显示,上述突变株与回补株均成功构建,且均能够稳定遗传。上述基因缺失株和回补株的成功构建,有助于深入了解APEC CE129菌株T6SS的作用机制,为进一步研究APEC的致病机理及其防控奠定了基础。
- 丁雪燕张琪田延王亨王亨石宝兰张伟朱国强
- 体内A型精原细胞介导转MxA基因小鼠的制备
- 2010年
- 本研究旨在探讨内源性A型精原干细胞介导法制备转抗黏液病毒基因A(Myxovirus resistance gene,MxA)基因小鼠的可行性。将pcDNA-MxA质粒和新型转染试剂ExGen500混悬后分5点注射至7日龄的ICR公鼠两侧睾丸组织内,睾丸内基因注射(testis gene transfer,TGT)鼠在性成熟后的不同阶段(6、12及24周龄)与正常母鼠交配,检测后代外源基因整合及表达情况,选取表达MxA基因的小鼠进行H5N1亚型禽流感病毒攻毒试验,观察小鼠的健康状况并观察肺及气管的组织病变情况。结果表明,TGT鼠和正常母鼠交配后能稳定产生转基因后代小鼠,2只TGT鼠在6、12及24周龄交配后代整合率分别为11.11%(2/18)、11.76%(2/17)、11.54%(3/26)及13.64%(3/22)、13.33%(2/15)、11.76%(2/17)。2只TGT鼠后代外源基因平均整合率分别为11.47%及12.91%,之间差异不显著(P>0.05)。RT-PCR检测表明,MxA基因整合小鼠中有21.43%(3/22)测到MxA的表达;所制备的MxA表达鼠H5N1亚型禽流感病毒攻毒后全身症状、肺及气管病变程度明显比正常鼠轻。试验结果表明体内精原干细胞介导的转基因方法是一种可行的、具有很大应用前景的转基因方法,制备的转MxA基因小鼠对H5N1亚型禽流感病毒具有一定的抵抗力。
- 鞠辉明白立景王怡彭大新张伟胡艳欣刘宗平李奎
- 关键词：转基因MXA
- 食品中偶氮类合成色素的检测方法研究进展被引量：3
- 2015年
- 食品在加工的过程中容易丢失原本的颜色,食品加工者为了使食物看起来更美味,向其中添加廉价的合成色素。而在许多国家因该色素可能存在对人体的危害,禁止在食品中添加偶氮类合成色素,并严格监管该类食品在国内的流通及进出口,监管部门采用高灵敏度和高选择性的分析方法进行监测,以确保食品的质量安全。本文将介绍食品行业中对于添加偶氮类合成色素的各种分析技术,并对不同的提取方法做了简要的描述。
- 王兴刘金萍张伟刘若璇秦海艳蔡云虹汝晓飞王捍东
- 关键词：偶氮色素固相萃取
- 细胞自噬与猪流行性腹泻病毒相互作用的研究进展被引量：1
- 2023年
- 猪流行性腹泻病毒(PEDV)是冠状病毒科甲型冠状病毒属的一种有囊膜的单股正链RNA病毒,对全世界养猪业造成了巨大的损失。PEDV与宿主之间的致病机制和免疫调节相互作用仍不清楚。有研究表明冠状病毒可以诱导细胞发生自噬,并且与病毒的复制有着密切的联系,病毒与细胞自噬之间的关系十分复杂,虽然病毒感染与细胞自噬之间的关系研究比较广泛,但细胞自噬在PEDV感染中的作用报道较少。研究PEDV与细胞自噬的相互作用可以加速对PEDV感染入侵机制的理解,为未来研究病毒治疗和抗病毒药物提供新的思路。
- 蓝小媛徐瑶张伟高崧郇长超
- 关键词：猪流行性腹泻病毒细胞自噬相互作用
- 猪源大肠杆菌Nissle 1917菌株的分离鉴定被引量：2
- 2017年
- 【目的】证实大肠杆菌Nissle 1917作为自然菌株存在于动物猪体内,并能从猪粪便中分离。建立大肠杆菌Nissle 1917的原位杂交鉴定方法。【方法】采集135份健康断奶仔猪的新鲜粪便制备DNA模板,以人源大肠杆菌Nissle 1917为阳性对照菌株,分别针对Nissle 1917的I型菌毛亚单位Fim A、F1C菌毛亚单位Foc A及两个质粒pMUT1和pMUT2的相关基因序列设计5对特异性引物进行PCR扩增;并将其中427 bp大小的质粒片段pMUT2(a)作为目的片段回收纯化,用地高辛随机引物标记法制成DNA探针。【结果】从其中的2份DNA模板中扩增出上述5对特异性引物PCR预期大小相符的片段,初步认为大肠杆菌Nissle 1917可能存在于猪体内。应用制备的探针通过菌落原位杂交的方法从2份阳性粪便样品中筛选出2株阳性菌落,通过血清学检验、PCR扩增和测序进一步鉴定为阳性Nissle 1917菌株。【结论】动物源益生菌Nissle 1917的分离鉴定,为优良动物源益生菌研究和应用奠定了基础。
- 杨颖张伟区炳明夏芃芃夏芃芃张建军张建军
- 关键词：地高辛标记探针
- 动物性食品中头孢氨苄残留检测研究进展被引量：9
- 2016年
- 头孢氨苄属于人兽共用β-内酰胺类抗生素,在兽医临床上应用广泛。介绍了头孢氨苄的性质、危害及国内外主要的检测方法和技术,包括紫外分光光度法、高效液相色谱法、液质联用、毛细管电泳法、酶联免疫吸附法、荧光偏振免疫法、免疫层析法,并对头孢氨苄残留分析前景进行了展望。
- 张伟王兴刘金萍秦海艳刘若璇蔡云虹汝晓飞王捍东
- 关键词：头孢氨苄抗生素残留
