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二酰基甘油转移酶对三角褐指藻油脂积累及相关环境因子响应的研究被引量：4: 2012年; 本文应用RT-PCR和RACE方法扩增出三角褐指藻二酰基甘油转移酶(Ptdgat)全长cDNA,其完整编码框(ORF)为1587 bp,编码528个氨基酸.基于克隆所得Ptdgat的ORF构建了反向互补RNA干扰载体,并用基因枪PDS-1000/He转化野生型三角褐指藻,筛选到了所需的阳性转基因藻.实时荧光定量PCR(qPCR)结果揭示:含Ptdgat RNA干扰结构的转基因藻的二酰基甘油转移酶的表达水平比野生型三角褐指藻该酶的表达水平有显著降低;野生型藻和转基因藻的油脂含量定量分析结果揭示:含RNAi干扰结构的转基因三角褐指藻油脂含量也明显低于野生型三角褐指藻.另外本文也揭示了适当浓度的外源培养因子铁、硅和脱落酸(ABA)提高了三角褐指藻Ptdgat基因的表达水平及其油脂含量.; 凃丽于广欣陈波曲芳兵冷鹂兰利琼卿人韦; 关键词：三角褐指藻 RNAI 生物柴油

雨生红球藻质体球滴结构蛋白基因的克隆与原核表达被引量：5: 2012年; 叶绿体或者有色体中的质体球滴结构(Plastoglobules)是多数植物的类胡萝卜素等次生代谢产物积累的场所,但在能大量积累虾青素的雨生红球藻中,这个结构一直没有得到确认。通过透射电子显微镜观察发现雨生红球藻的质体内确切存在plastoglobules结构;并通过RT-PCR结合RACE技术,从雨生红球藻cDNA文库中克隆到了与编码plastoglobules的结构蛋白(Plastoglobulin)具有高度同源性的基因序列全长,称做Hpgp基因;该基因的表达产物称之为雨生红球藻质体球滴蛋白(HPGP;Haematococcus plastoglobules pro-tein);并进一步利用原核表达系统将该编码基因进行原核诱导表达,用His-Tag蛋白分离纯化系统纯化到了目标蛋白,并用该His-Tag融合蛋白为抗原免疫实验兔,制备到了相应的一抗抗体,为下一步对该蛋白的功能阐明以及雨生红球藻的虾青素积累机制研究提供重要的基础。; 范勇于广欣汪乐霓曲芳兵冷鹂兰利琼卿人韦; 关键词：雨生红球藻虾青素原核表达

响应面法优化芦荟中抗氧化活性成分的提取工艺被引量：4: 2011年; 对芦荟中抗氧化活性物质提取工艺及其成分进行研究,通过单因素实验和响应面优化,以提取物对DPPH自由基的清除率为抗氧化的考察指标,得到芦荟中抗氧化活性成分的提取工艺条件:提取温度29℃、料液比(g/mL)1∶33、提取时间107 s、微波功率500 W,微波辅助水提,此条件下得到的提取物对DPPH自由基的清除率达91.414%。提取物活性成分分析表明:提取物中芦荟甙含量为1.5 mg/g、黄酮为1.13 mg/g、多酚为4.33 mg/g、多糖为126.36 mg/g。; 唐远谋焦士蓉冷鹂唐鹏程刘佳冯慧; 关键词：芦荟抗氧化物质 DPPH自由基响应曲面法

二酰基甘油转移酶对三角褐指藻油脂积累及相关环境因子的响应研究: 本文应用RT-PCR和RACE方法克隆了三角褐指藻（Phaeodactylum tricornutum）二酰基甘油转移酶（PTDGAT）全长cDNA,其完整编码框（ORF）为1587bp,编码528个氨基酸;基于克隆所得...; 凃丽陈波冷鹂曲芳兵兰利琼傅华龙卿人韦; 关键词：三角褐指藻 RNAI 生物柴油; 文献传递

RNA干扰PEPC对三角褐指藻油脂含量的影响: 2014年; 本文应用生物信息学和RT-PCR方法分别获得了三角褐指藻两个PEPC全长cDNA,分别称为：PtPEPC1和PtPEPC2,前者完整开放阅读框3030bp,编码1009个氨基酸,后者完整开放阅读框2634bp,编码877个氨基酸;基于克隆所得PtPEPC的ORF构建了反向互补RNA干扰载体pPha-PtPEPC1RNAi和pPha-PtPEPC2RNAi,并用轰击法（PDS-1000/He）转化野生型三角褐指藻,筛选鉴定到了所需的阳性转基因藻;实时定量RT-PCR结果揭示：含PtPEPC RNA干扰结构的转基因藻的PEPCase基因的表达水平比野生型三角褐指藻该酶的表达水平有显著降低;野生型藻和转基因藻的油脂含量定量分析结果揭示：含RNAi干扰结构的转基因三角褐指藻油脂含量也明显高于野生型三角褐指藻,油脂增幅达2%～12%.; 冷鹂凃丽代易颖郭婷孙星汉卿人韦兰利琼; 关键词：三角褐指藻磷酸烯醇式丙酮酸羧化酶 RNAI 油脂生物能源

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冷鹂