冯悦
- 作品数:114 被引量:168H指数:6
- 供职机构:昆明理工大学更多>>
- 发文基金:国家科技支撑计划国家自然科学基金云南省应用基础研究基金更多>>
- 相关领域:医药卫生农业科学生物学轻工技术与工程更多>>
- 以主要流行EV71 VP1基因高度保守区为靶点的TaqMan荧光定量PCR检测方法的建立被引量:4
- 2016年
- 在我国,肠道病毒71型(enterovirus 71,EV71)C4型是引起手足口病的主要流行基因型。为建立EV71C4型TaqMan荧光定量PCR检测方法,在C4型EV71VP1基因的高保守区,设计合成引物和TaqMan探针,将包含此目的区段的基因片段克隆到pcDNA3.1载体中,通过体外转录获得标准品,并以梯度稀释的标准品为模板建立工作曲线,进而在优化反应条件的基础上建立TaqMan荧光实时定量PCR检测方法。实验中,所设计引物、探针的高度保守性保证了C4型EV71的高效扩增。经反应条件优化,引物和探针的最佳工作浓度分别为300 nmol/L和200 nmol/L,在1×10~301×10~3拷贝数检测范围内具有良好的线性关系(R^2=1),灵敏度可达到10~2 copies/μL。通过对该方法进行检验发现,批间和组间重复实验的变异系数均小于0.5%,且该方法对柯萨奇A16(coxsackievirus A16,CA16)柯萨奇B1(coxsackievirus B1,CB1)人轮状病毒(human rotavirus,HRV)单纯疱疹病毒2型(herpes Simplex virus type 2,HSV-2)均无交叉反应,对6份EV71阳性样本检出率为100%。以上数据表明,文中建立的TaqMan荧光定量PCR方法可为我国主要流行C4型EV71感染的快速诊断及疾病监控提供有效途径。
- 胡晓星彭杰冯悦刘丽张阿梅夏雪山
- 关键词:肠道病毒71型VP1基因TAQMAN探针荧光定量PCR
- 与庚型肝炎病毒E2蛋白相互作用的人类蛋白LT-α
- 本发明公开了一种与庚型肝炎病毒相互作用的人类蛋白LT‑α,其氨基酸序列如SEQ ID NO:1所示,编码人类蛋白LT‑α的基因的核苷酸序列SEQ ID NO:2所示;其是利用第四代酵母双杂交的方法通过庚型肝炎病毒E2蛋白...
- 冯悦杨晓钰夏雪山刘晓佳赵跃
- 文献传递
- 浅部真菌病病原体的多重qPCR检测引物组合
- 本发明公开了一种浅部真菌病病原体的多重qPCR检测引物组合,其包括检测红色毛癣菌、须癣毛癣菌、絮状表皮癣菌、犬小孢子菌、奥杜盎小孢子菌、石膏样小孢子菌、白色念珠菌、糠秕马拉色菌的特异性引物和探针;本发明利用实时荧光定量P...
- 刘丽徐宁泽冯悦
- 与庚型肝炎病毒E2蛋白相互作用的HIV P10蛋白
- 本发明公开了一种与庚型肝炎病毒相互作用的HIV P10蛋白,其氨基酸序列如SEQ ID NO:1所示,编码HIV P10蛋白的基因的核苷酸序列SEQ ID NO:2所示;其是利用第四代酵母双杂交的方法通过庚型肝炎病毒E2...
- 冯悦冉婕妤夏雪山
- 文献传递
- 三七总皂苷在制备直接抗丙型肝炎病毒药物中的应用
- 三七总皂苷在制备直接抗丙型肝炎病毒药物中的应用,属于医药领域。采用体外细胞水平的方法进行了三七总皂苷抗HCV活性和毒性测试,结果表明,三七总皂苷具有良好的抗HCV活性,并且毒性低,明显优于对照组,临床用药安全。本发明首次...
- 何严萍冯悦杨军锋夏雪山姚赟李聪王月平
- 文献传递
- 用于检测中枢神经系统感染性病原体的多重荧光定量PCR检测试剂
- 本发明公开了一种用于检测中枢神经系统感染性病原体的多重荧光定量PCR检测试剂,其特征在于:包括检测EB病毒、流感嗜血杆菌、巨细胞病毒、单纯疱疹病毒2型、水痘带状疱疹病毒、钩端螺旋体、B‑溶血性链球菌、诺卡菌的特异性引物和...
- 刘丽袁丽娜冯悦夏雪山
- 核苷类逆转录酶抑制剂(NRTIs)对大鼠卵母细胞功能的影响
- 2017年
- 目的:探讨核苷类逆转录酶抑制剂(NRTIs)对大鼠卵母细胞成熟度及受精能力的影响。方法:采用NRTIs药物(AZT和3TC)灌饲雌性大鼠12个月,在用药3、6、9及12个月分别处死大鼠,以酶联免疫吸附试验法检测大鼠卵母细胞成熟相关因子的表达变化。同时观察大鼠卵母细胞体外培养成熟度及胚胎发育潜能的变化。结果:NRTIs给药后大鼠卵母细胞的成熟度受到显著影响,卵裂率和囊胚形成率均下降(P<0.05)。卵母细胞成熟相关因子MPF等的表达水平也显著下降(P<0.05)。结论:NRTIs影响大鼠卵母细胞的成熟及胚胎发育潜能,降低其生育能力。
- 唐莉谷海陶鹏飞夏雪山冯悦王华伟杨泽星苏真芳
- 呼吸道感染性疾病病原体的多重qPCR检测引物组合
- 本发明公开了一种呼吸道感染性疾病病原体的多重qPCR检测引物组合,其包括检测甲型流感病毒、乙型流感病毒、副流感病毒1型、副流感病毒3型、呼吸道合胞病毒A型、鼻病毒、偏肺病毒、呼吸道合胞病毒B型的特异性引物和探针;本发明利...
- 冯悦张伊菲夏雪山刘丽
- 树鼩中HCV受体的初步研究
- 丙型肝炎全球流行,丙型肝炎病毒(HCV)感染人数约占总人口的3%。70~85%的HCV感染者发展成慢性感染,并有较大比例的病人发展成肝硬化和肝细胞肝癌,丙型肝炎已成为严重危害人类健康的传染病。由于缺乏高效的病毒体外培养体...
- 冯悦
- 关键词:丙型肝炎病毒受体树鼩荧光定量PCRTAQMAN探针
- 文献传递
- NS5B区核酸序列测定的丙型肝炎病毒基因分型研究被引量:6
- 2011年
- 目的了解昆明市丙型肝炎感染者HCV基因型分布特征。方法用RT-PCR法扩增40例HCVRNA阳性的患者血清样本丙型肝炎病毒NS5B区段,PCR产物纯化后进行测序分析,测序结果与参考序列共同构建系统进化树,得到丙型肝炎病毒基因型和基因亚型。结果丙型肝炎病毒NS5B区段基因序列的系统进化树分析能对丙型肝炎病毒感染者样本进行很好的分型;分型结果显示,昆明地区丙型肝炎病毒主要的基因型是3b型占45.0%,其次2a型占22.5%,1b型占20.0%,3a型占7.5%,6n型及6a型各占2.5%。结论构建丙型肝炎病毒NS5B区系统进化树分析能得到准确的HCV基因型和亚型;昆明地区的丙型肝炎病毒基因型以3型为主,其次2a、1b型,同时发现6型;昆明丙型肝炎感染者中HCV基因型分布更接近于中国香港和东南亚国家的丙型肝炎病毒基因分布。
- 李峥高玉红张桂前毕胜杨曦夏雪山冯悦何丽华
- 关键词:HCV基因型系统进化树