冯丽
- 作品数：3 被引量：12H指数：3
- 供职机构：东北农业大学食品学院乳品科学教育部重点实验室更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金更多>>
- 相关领域：生物学农业科学更多>>
- let-7g对小鼠乳腺发育和泌乳相关功能基因Tgfbr1的作用及其机理被引量：7
- 2012年
- 运用生物信息学方法对let-7g进行靶基因预测,构建含有与其结合位点互补序列的荧光素酶报告质粒将其与phRL-TK及let-7g mimics或negative control共转染小鼠乳腺上皮细胞,双荧光素酶报告系统检测试剂盒测定荧光素酶的表达;用let-7ginhibitor和let-7g mimics或negative control分别转染小鼠乳腺上皮细胞,并应用细胞活力分析技术、qRT-PCR技术、Western blotting、HPLC分析let-7g的表达变化及其对小鼠乳腺上皮细胞的影响。结果显示:经酶切及测序证实荧光素酶报告质粒构建成功;将荧光素酶报告基因、phRL-TK与let-7g mimics共转染小鼠乳腺上皮细胞,荧光素酶活性与对照组(即共转染荧光素酶报告基因、phRL-TK与Negative Control的小鼠乳腺上皮细胞组)相比显著降低(P<0.05);与阴性对照组和空白对照组相比较,let-7g inhibitor转染后,TGFβRⅠ蛋白表达量显著增加(P<0.01),细胞活性显著增强(P<0.05),β-酪蛋白表达量增加(P>0.05),而let-7g mimics转染后,TGFβRⅠ蛋白表达量显著减少(P<0.01),细胞活性显著降低(P<0.05),β-酪蛋白表达量显著减少(P<0.05)。结果表明,在小鼠乳腺上皮细胞中,let-7g能够靶向结合Tgfbr1,且负调控其表达;let-7g可通过抑制靶蛋白TGFβRⅠ的表达,进而调控小鼠乳腺上皮细胞的增殖及β-酪蛋白的分泌。
- 冯丽李庆章崔巍丁巍
- miR-126对小鼠乳腺上皮细胞增殖及泌乳功能的影响被引量：8
- 2011年
- 应用脂质体转染技术,改变miR-126在小鼠乳腺上皮细胞中的表达量,采用qRT-PCR、HPLC、Western印迹等技术检测miR-126对小鼠乳腺上皮细胞的影响。结果显示,miR-126沉寂后,细胞增殖能力提高,β-酪蛋白表达增加,乳糖质量浓度增加,孕酮受体(PGR)表达增强。研究表明,miR-126可能通过抑制靶蛋白PGR表达,进而抑制乳腺上皮细胞增殖和泌乳量变化。
- 崔巍王春梅李庆章冯丽丁巍
- 关键词：微小RNAMIR-126
- miR-129-5p调节小鼠乳腺上皮细胞内Igf-1的表达被引量：4
- 2011年
- MicroRNAs(miRNAs)是一类大约22个核苷酸的非编码RNA.它能通过调控生长因子表达,引发肿瘤形成、细胞增殖和组织器官发育.本文通过构建miR-129-5p靶基因序列的双荧光素酶报告载体分析了miR-129-5p与靶基因之间的关系,应用脂质体转染技术和实时荧光定量技术观察了miR-129-5p在小鼠乳腺上皮细胞中的表达量及其变化,通过CASY细胞活力仪检测转染后的细胞增殖与活力变化,采用Western印迹方法检Igf-1的变化.结果表明:miR-129-5p在小鼠乳腺青春期表达最高,成功构建了Igf-1基因3'UTR荧光素酶报告载体,miR-129-5p抑制其荧光素酶活性(P<0.01),转染抑制子后miR-129-5p表达降低(P<0.01),胰岛素样生长因子(Igf-1)表达增强(P<0.05),细胞增殖和活力增强(P<0.01),结果提示:miR-129-5p可能通过抑制靶基因蛋白Igf-1的表达,进而抑制小鼠乳腺上皮细胞增殖和活力.
- 丁巍李庆章王春梅李晔崔巍冯丽
- 关键词：乳腺上皮细胞
