何秋璟
- 作品数：7 被引量：13H指数：2
- 供职机构：广东医科大学基础医学院更多>>
- 发文基金：广西壮族自治区自然科学基金广东省重大科技攻关项目更多>>
- 相关领域：医药卫生文化科学生物学更多>>
- 螺旋藻激酶的分离纯化、质谱分析及其粗提液影响MEF细胞衰老探讨
- 第一部分螺旋藻激酶的分离纯化及质谱分析 目的从螺旋藻发酵物中分离纯化出螺旋藻激酶，通过质谱分析获得螺旋藻激酶的蛋白相关信息，为日后基因工程生产螺旋藻激酶和进-步研究其结构和功能提供理论依据。 方法(1)制备螺旋藻激酶...
- 何秋璟
- 关键词：细胞衰老CCK-8细胞生长曲线分离纯化质谱分析
- 文献传递
- 浅谈学生主体性在医学检验专业开放式实验教学中的积极发展被引量：6
- 2008年
- 实验室是医学院校开展教学、科研的重要基地，通过开放实验室来实施医学检验专业的开放式实验教学，对创新教育的实施和培养实用型、复合型人才具有重要作用。现以主体性实验教学理论为指导，结合医学检验专业的学科特点，分别在理论和实践方面浅谈学生主体性在医学检验专业开放式实验教学中的积极发展。
- 张春龙何秋璟刘新光侯敢张志珍
- 关键词：学生主体性开放式实验教学医学检验专业
- siRNA干扰HSV-1 UL30 DNA聚合酶基因的研究
- 2008年
- 目的:筛选高效沉默HSV-1UL30基因的siRNA,研究siRNA沉默UL30基因后对HSV-1繁殖的影响。方法:设计并化学合成12对靶向UL30基因的siRNA,与pEGFP-N1-Fi融合表达质粒共转染VERO细胞,流式细胞术筛选高效抑制Fi-EGFP融合蛋白的siRNA,实时荧光定量PCR检测siRNA对感染细胞内UL30mRNA表达的抑制效果,CPE法和空斑减数实验评价siRNA对HSV-1繁殖的抑制效果。结果:共转染实验筛选出高效抑制Fi-EGFP融合蛋白的siRNA4、siRNA10及siRNA8,这3对siRNA均能显著降低感染细胞内UL30mRNA的表达水平及病变细胞释放到培养上清的子代病毒滴度,siRNA4和siRNA10在感染后36h对HSV-1的繁殖有明显的抑制效果,其病斑分别比对照组减少61.17%、51.46%(P<0.05),siRNA4、siRNA10及siRNA8组最终形成的空斑直径分别比对照组减小29.94%、23.49%、21.69%(P<0.01)。结论:筛选到高效抑制UL30的3对siRNAs,siRNA4及siRNA10在病斑形成早期对HSV-1的繁殖有明显的抑制效果,说明siRNA4、siRNA10及siRNA8均能延缓病斑的扩大和病斑数目的增长,对病毒的繁殖有一定的抑制效果。
- 张春龙何秋璟仁哲朱钦昌张美英刘秋英张佩琢王一飞
- 关键词：SIRNARNA干扰
- 医学检验专业开设Western Blotting综合性实验初探被引量：3
- 2007年
- 分子生物学是当前生命科学发展的主流，其理论与技术已广泛应用于各个领域。Western Blottlng作为分子生物学的常规技术，在医学领域具有不可忽视的地位。因此，在医学检验专业开设Western Blotting实验课程，已成为一项非常必要的实验教学内容。其一，Western Blotting实验是分子生物学与免疫学的有效结合体，有助于学生对前沿的、跨学科知识加深了解；
- 何秋璟张春龙侯敢
- 关键词：WESTERNBLOTTING
- HSV-1 UL30基因cDNA的克隆及筛选有效siRNA的融合载体构建被引量：1
- 2008年
- 目的:克隆HSV-1 UL30 cDNA并测序,构建pEGFP-N1-Fi融合表达载体,为靶向UL30基因的siRNA的设计和筛选奠定基础。方法:从感染HSV-1F株的病变VERO细胞提取总RNA,二次PCR扩增出UL30 cDNA并克隆至pEGFP-N1质粒,测序鉴定序列;将UL30 cDNA4个小片段亚克隆至pEGFP-N1形成pEGFP-N1-Fi融合表达质粒,转染VERO细胞,荧光显微镜观察融合蛋白表达情况。结果:成功克隆出UL30 cDNA,序列对比显示与基因库中的HSV-1F株UL30序列同源性为99.4%;成功构建pEGFP-N1-Fi融合表达载体并实现Fi-EGFP融合蛋白的表达。结论:成功克隆出UL30 cDNA,成功构建pEGFP-N1-Fi融合表达载体,为靶向UL30基因的siRNA的设计和筛选奠定基础。
- 何秋璟张春龙仁哲张美英朱钦昌刘秋英张佩琢王一飞
- 关键词：分子克隆EGFP融合表达载体
- 螺旋藻激酶的分离纯化及质谱分析
- 2014年
- 目的:从螺旋藻发酵物中纯化出螺旋藻激酶,并通过质谱分析其蛋白相关信息,为研究其结构和功能提供理论依据。方法:通过切向超滤法、Sephadex G-75凝胶色谱层析、超滤离心管离心法、SDS-PAGE电泳法从螺旋藻发酵物中纯化出螺旋藻激酶,通过基质辅助激光解析电离飞行时间质谱技术分析其蛋白相关信息。结果:获得纯化的单一螺旋藻激酶,其相对分子质量约为45 000,能直接溶解纤维蛋白。基质辅助激光解析电离飞行时间质谱分析表明螺旋藻激酶的氨基酸序列与极大节螺旋藻犬尿氨酸甲酰胺酶有较高相似度,蛋白覆盖率为35%。结论:从螺旋藻发酵物中成功纯化出螺旋藻激酶,并通过质谱获得其蛋白相关信息。
- 何秋璟张春龙庞辉陈萌王慧杰
- 关键词：分离纯化质谱分析纤溶活性
- 螺旋藻激酶对动脉粥样硬化模型大鼠血管内皮功能的影响被引量：2
- 2017年
- 目的:研究螺旋藻激酶(SPK)对动脉粥样硬化模型大鼠血管内皮功能的影响。方法:将60只大鼠随机分为正常对照组(蒸馏水)、模型组(蒸馏水)、阳性对照组(辛伐他汀,0.005 g/kg)和SPK低、中、高剂量组(80、160、320 U/kg)。除正常对照组外,其余各组大鼠均复制动脉粥样硬化模型;同时,各组大鼠ig相应药物,每天1次,连续给药12周。测定大鼠血清中总胆固醇(TC)、三酰甘油(TG)、低密度脂蛋白胆固醇(LDL-C)、高密度脂蛋白胆固醇(HDL-C)、白细胞介素6(IL-6)和肿瘤坏死因子α(TNF-α)的含量;苏木精-伊红染色观察大鼠胸主动脉血管内膜的形态改变。结果:与正常对照组比较,模型组大鼠血清中TC、TG、LDL-C、IL-6和TNF-α含量增加(P<0.01),HDL-C含量降低(P<0.01);血管内皮细胞脱落,内膜增生、向管腔内突起,平滑肌细胞增殖且排列紊乱,中膜弹力纤维崩解断裂。与模型组比较,各给药组大鼠血清中TC、TG、LDL-C、IL-6和TNF-α含量下降(P<0.05或P<0.01),阳性对照组和SPK中、高剂量组大鼠血清中HDL-C含量增加(P<0.05);给药组大鼠血管内皮细胞形态较模型组明显改善,其中SPK中、高剂量组大鼠血管内皮细胞各层结构完整、内膜基本光滑,SPK中剂量组大鼠血管中膜平滑肌细胞排列稍紊乱,与正常对照组比较无明显变化。结论:SPK有明显的降脂和抗炎作用,可保护血管内皮功能;其作用机制可能与降低血清中TC、TG、LDL-C、IL-6、TNF-α含量和升高血清中HDL-C含量有关。
- 何秋璟王慧杰庞辉杨莹黄媛恒黄泽裕江梦凤华媛媛农秀红张康玲
- 关键词：动脉粥样硬化白细胞介素6肿瘤坏死因子Α血管内皮
