伍丽琼
- 作品数：6 被引量：1H指数：1
- 供职机构：南方医科大学更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金国家重点基础研究发展计划长江学者和创新团队发展计划更多>>
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- 髓样相关蛋白14真核表达载体的构建及其细胞内定位研究
- 2008年
- 目的:构建小鼠髓样相关蛋白14(MRP14)的真核表达载体,观察其在NIH3T3细胞中的表达定位情况。方法:提取BALB/c小鼠肝脏组织的总RNA,通过逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)扩增得到MRP14编码序列。然后将该编码序列克隆到带有血凝素(HA)标记的载体pcDNA3-HA上,随后转染NIH3T3细胞,在荧光显微镜下观察结果。结果:重组质粒经聚合酶链反应(PCR)、酶切和测序鉴定证明构建正确。转染实验发现,该质粒能够在NIH3T3细胞中表达,表达产物主要定位在细胞质中。结论:成功构建带HA标签的MRP14真核表达载体。该载体能在哺乳动物细胞中有效表达并正确定位,为下一步深入研究MRP14作用细胞的信号通路提供了一个重要工具。
- 刘铮徐佳伍丽琼王娟邓鹏姜勇
- 关键词：血凝素细胞内定位
- 脂多糖对S100A8和S100A9在Hepa 1-6细胞内定位的影响
- 2010年
- 目的观察S100钙结合蛋白A8(S100A8)和S100钙结合蛋白A9(S100A9)在细胞内定位及脂多糖(lipopolysaccharide,LPS)刺激对其细胞内定位的影响。方法将带有血凝素(HA)标签的S100A8或S100A9真核表达载体瞬时转染至小鼠Hepa1-6肝癌细胞,通过细胞免疫荧光方法观察S100A8、S100A9的胞内表达、定位及LPS对其定位的影响。结果静息状态下,S100A8、S100A9在细胞浆和细胞核都有分布;LPS刺激细胞2h后,S100A8移位入核,而S100A9在细胞内分布无明显变化。结论LPS刺激后S100A8、S100A9在细胞内的差异分布,提示两者在炎症反应中的作用不同,S100A8可能参与LPS诱导的基因表达调控。
- 张秀娟王娟伍丽琼邓鹏姜勇
- 关键词：脂多糖蛋白定位
- 人髓样相关蛋白14细胞内化的分子机制研究
- 目的:初步探讨人髓样相关蛋白14(Myeloid-related protein-14:MRP14)在Hela细胞内化的分子机制。方法:将MRP14与增强型绿色荧光蛋白(enhanced green fluorescen...
- 刘铮徐佳伍丽琼王娟邓鹏姜勇
- 关键词：内化硫酸乙酰肝素蛋白多糖
- 文献传递
- 髓样相关蛋白8真核表达载体的构建及其细胞内定位
- 2010年
- 目的:构建小鼠髓样相关蛋白8(MRP8)的真核表达载体,观察其在NIH3T3细胞中的表达定位情况。方法:提取BALB/c小鼠肝脏组织的总RNA,通过逆转录-聚合酶链反应扩增得到MRP8编码序列,并将其克隆到带有血凝素(HA)标记的载体pcDNA3-HA上,随后将重组质粒瞬时转染NIH3T3细胞,利用荧光显微镜观察结果。结果:重组质粒经聚合酶链反应、酶切和测序鉴定证明构建正确,并且该质粒能够在NIH3T3细胞的胞浆、胞核中广泛表达,表达产物主要定位在细胞核中。结论:成功构建带有HA标签的MRP8真核表达载体。该载体能在哺乳动物细胞中有效表达并正确定位,为进一步研究MRP8作用细胞的信号通路提供了一个重要的工具。
- 伍丽琼吴翠玲王娟徐佳邓鹏姜勇
- 关键词：血凝素类转染细胞内定位
- 高迁移率族蛋白HMGB2的细胞内定位及移位研究
- 2009年
- 目的观察鼠高迁移率族蛋白B2(HMGB2)在真核细胞中的定位和移位情况。方法提取BALB/c小鼠肝脏组织总RNA,通过RT-PCR扩增得到HMGB2编码序列。然后将该编码序列克隆到带有血凝素(HA)标记的载体pcDNA3-HA上,构建质粒命名为pcDNA3-HA-HMGB2,随后将其转染NIH3T3细胞。荧光显微镜观察仅转染质粒的细胞和质粒转染与亚砷酸钠刺激30min和1h后细胞内HA-HMGB2融合蛋白的定位及移位情况。结果重组质粒经酶切、聚合酶链反应(PCR)和测序鉴定证明构建正确,并在NIH3T3细胞中得到大量表达。荧光显微镜观察发现,HA-HMGB2蛋白主要分布于细胞核中,经亚砷酸钠刺激后30min,部分细胞中的蛋白从胞核移位到胞质,刺激1h后蛋白则主要分布于胞质中。结论成功构建带HA标签的HMGB2真核表达载体。该载体能在哺乳动物细胞中有效表达并正确定位、移位,为下一步深入研究HMGB2作用细胞的信号通路提供了一个重要工具。
- 王娟刘铮徐佳张秀娟伍丽琼邓鹏姜勇
- 关键词：高迁移率族蛋白质类血凝素类
- MRP8内化的分子机制及其生物学功能研究
- 人髓样相关蛋白8 （myeloid-related protein-8,MRP8）是钙结合蛋白S100家族成员之一,具有EF手型结构。MRP8相对分子质量比较小,其单体由2个EF手Ca2+结合区和与之相连的中央铰链区组成...
- 伍丽琼
- 关键词：内吞硫酸乙酰肝素蛋白多糖
- 文献传递
