目的探讨p38丝裂原活化蛋白激酶(p38 MAPK)对髓样相关蛋白8(MRP8)/髓样相关蛋白14(MRP14)诱导小鼠胚胎成纤维细胞凋亡的影响。方法制备MRP8、MRP14、MRP8/14备用。分别取p38^(+/+)和p38-/-细胞,随机分为空白对照组、MRP8组、MRP14组、MRP8/14组。MRP8组、MRP14组、MRP8/14组分别加入50μg/m L MRP8、MRP14和MRP8/14。空白对照组加入等体积的DMEM培养液。各组干预24、48 h,采用MTT法检测p38^(+/+)和p38-/-细胞活力。采用流式细胞术检测空白对照组及MRP8/14干预24、48 h组p38^(+/+)和p38-/-细胞凋亡率。采用MTT法检测空白对照组、MRP8/14组以及TLR4受体抑制剂TAK242或RAGE中和抗体处理的MRP8/14(分别设为MRP8/14+TAK242组、MRP8/14+RAGE组)干预24 h p38^(+/+)细胞活力。采用MTT法和流式细胞术检测空白对照组、MRP8/14组以及p38激酶抑制剂SB203580处理的MRP8/14(设为MRP8/14+SB203580组)干预24 h p38^(+/+)细胞活力和凋亡率。采用Western blotting法检测MRP8/14干预0、1、2、4、6、8 h p38^(+/+)细胞p38 MAPK磷酸化。结果 MRP8组、MRP14组、MRP8/14组干预24、48 h p38^(+/+)、p38-/-细胞活力均低于空白对照组(P均<0.05),但无论MRP8/14组干预24 h还是48 h,p38-/-细胞活力明显高于p38^(+/+)细胞(P均<0.05)。MRP8/14干预24、48 h组p38^(+/+)细胞凋亡率均高于空白对照组,且MRP8/14干预48 h组细胞凋亡率更高(P均<0.05);而MRP8/14干预24、48 h组p38-/-细胞凋亡率均未见明显变化(P均>0.05)。MRP8/14组、MRP8/14+RAGE组干预24 h p38^(+/+)细胞活力低于空白对照组、MRP8/14+TAK242组干预24 h(P均<0.05)。MRP8/14+SB203580组干预24 h p38^(+/+)细胞活力较MRP8/14组干预24 h明显升高,细胞凋亡率较MRP8/14组干预24 h明显降低(P均<0.05)。MRP8/14干预2、4、6 h p38^(+/+)细胞p38 MAPK磷酸化水平明显高于干预0、1、8 h(P均<0.05)。结论 p38 MAPK能促进MRP8/14诱导的小鼠成纤维细胞凋亡,其机制可能与TLR4-p38 MAPK信号通路激活有关。
目的探讨CA125,CA19-9在子宫内膜癌组织学和血清学中表达水平的差异性及相关性。方法选择2008年4月至2012年4月于广东医学院附属廉江医院就诊并诊断为子宫内膜癌患者65例为研究对象,同时选取正常子宫内膜者30例纳入对照组及子宫内膜异位症(EMs)患者40例纳入EMs组。采用ELISA法检测3组患者血清CA125和CA19-9水平,并采用免疫组化和Western blot法检查3组患者组织CA125和CA19-9表达水平,分析CA125和CA19-9在子宫内膜癌血清学和组织学中表达水平的相关性(本研究遵循的程序符合广东医学院附属廉江医院人体试验委员会制定的伦理学标准,得到该委员会批准,分组征得受试对象的知情同意,并与之签署临床研究知情同意书)。结果 Western blot、免疫组化及ELISA法检测结果均显示,CA125,CA19-9水平在子宫内膜癌组中表达最高,显著高于对照组和EMs组,组间比较,差异有统计学意义(P<0.05),此外,CA125,CA19-9在EMs组水平亦高于正常组,两组比较,差异有统计学意义(P<0.05)。子宫内膜癌组患者血清CA125和CA19-9与其组织学表达水平具有相关性(r=1.12,P<0.05;r=2.04,P<0.05)。结论 CA125和CA19-9在子宫内膜癌中高表达,且血清学水平与组织学水平具有正相关性,具有重要的诊断价值。
