马利宏
- 作品数：5 被引量：4H指数：1
- 供职机构：山东农业大学动物科技学院更多>>
- 发文基金：山东省自主创新成果转化重大专项项目国家自然科学基金山东省博士后创新项目更多>>
- 相关领域：农业科学更多>>
- PRRSV Nsp2高变区基因的表达及免疫学特性鉴定被引量：3
- 2011年
- 本研究分别扩增从"高热病"猪体内分离株(TA-12)及美洲经典株ATTC-VR2332 PRRSV Nsp2基因的高变区,亚克隆至表达载体pET-28a中,转化至E.coliBL21中,在IPTG的诱导下进行表达。用SDS-PAGE、Western-blot对表达产物进行鉴定。表达产物纯化后免疫BALB/c小鼠,对其免疫原性进行研究。建立了以纯化的重组蛋白作为包被抗原的间接ELISA,确定了临界值,用建立的ELISA方法并对400份猪血清进行了检测和应用。结果表明,成功的表达了分离株TA-12及ATTC-VR2332 Nsp2基因的高变区。表达蛋白纯化分别免疫小鼠后,获得多克隆抗体,其抗体效价均为1∶100000。优化的ELISA条件为:包被缓冲液为磷酸盐缓冲液,800 ng/孔,血清样品稀释浓度为1∶100。临界值为0.4。血清检测结果表明以两种蛋白为包被抗原均为阳性的血清最多,占到总数的58.5%,前者阳性后者阴性的血清阳性率28%,前者阴性后者阳性的血清阳性率8.75%,二者均为阴性的占到4.75%。为建立区别两种毒株的鉴别诊断间接ELISA试剂盒奠定基础。
- 马利宏肖一红吕军华王伟伟董施伟周恩民
- 关键词：PRRSVNSP2免疫学ELISA
- 山东省高致病性猪繁殖与呼吸综合征病毒的分离与鉴定
- 2006年夏季,在我国猪群中爆发的以高致病性猪繁殖与呼吸综合征病毒(porcine reproducfive andrespiratory syndrome virus,PRRSV)为主要病原的“无名高热”征给我国的养猪...
- 肖一红马利宏李晓静邱洪凯刘岳于颖刘宁宁周恩民
- 关键词：猪繁殖与呼吸综合征病毒分离无名高热
- 文献传递
- PRRSV高变异株与美洲标准株VR-2332NSP2蛋白的表达与免疫原性鉴定
- PRRS是在20世纪80年代发现的一种动物传染病，此病每年给世界养猪业造成的损失达几十亿美元，间接损失难以计算。由于不同PRRSV分离株核苷酸序列存在广泛而明显的变异，给PRRS的准确检测和有效控制带来困难。本研究目的为...
- 马利宏
- 关键词：养猪业
- 文献传递
- 山东省高致病性猪繁殖与呼吸综合征病毒的分离与鉴定
- 2006年夏季,在我国猪群中爆发的以高致病性猪繁殖与呼吸综合征病毒(porcine reproductive andrespiratory syndrome virus,PRRSV)为主要病原的"无名高热"征给我国的养猪...
- 肖一红马利宏李晓静邱洪凯刘岳于颖刘宁宁周恩民
- 关键词：PRRSV高致病性PRRSV
- 文献传递
- 一株猪繁殖与呼吸综合征病毒的分离及ORF5基因序列与国内外毒株的分析和比较被引量：1
- 2009年
- 分析一株猪繁殖与呼吸综合征病毒(porcine reproductive and respiratory syndrome virus,PRRSV)ORF5基因遗传变异情况及与国内外其他毒株比较为指导当地生产提供一定依据,通过常规病毒检测和分离方法,从2008年山东无名高热病猪送检样品肺部组织中检测并分离PRRSV。根据PRRSV美洲经典株VR-2332的ORF5基因设计特异引物,利用RT-PCR和基因克隆ORF5基因,分析其与国内外PRRSV毒株差异。经过细胞病变和间接免疫荧光检测证明所分离到的PRRSV是一山东地方流行毒株,命名为SD-4。通过分析ORF5基因序列及与其它毒株的比较,将北美洲株分为Ⅰ亚群和Ⅱ亚群。SD-4的核苷酸与Ⅰ亚群和Ⅱ亚群及欧洲毒株相比同源性分别为87.4%～89.9%,92.7%～99.2%和63.7%～63.8%。其氨基酸序列的同源性相比分别为85.1%～91.0%,90.5%～99.5%和56.7%～57.7%。进化树分析结果表明SD-4与高致病性毒株JXA1,HUB1,HEB1和SY0608的亲缘关系很近。PRRSV山东分离株SD-4属于美洲经典毒株,可能为高致病性PRRSV毒株。
- 李晓静周恩民赵钦肖一红马利宏
- 关键词：猪繁殖与呼吸综合征病毒PRRSVORF5同源性
