韩红霞 作品数:5 被引量:5 H指数:2 供职机构: 四川大学华西医院 更多>> 发文基金: 国家重点基础研究发展计划 四川省应用基础研究计划项目 国家自然科学基金 更多>> 相关领域: 医药卫生 更多>>
肝细胞核因子3β调控小鼠体内HBV转录和复制的实验研究 2008年 目的应用复制型HBV小鼠模型观察肝细胞核因子3β(HNF3β)对小鼠体内HBV转录和复制的调控作用。方法通过尾静脉高压注射法将复制型HBV重组质粒pHBV4.1和大鼠HNF3β表达质粒pCMVHNF3β导入小鼠体内,用Northern吸印杂交检测小鼠肝组织中HBV3.5kb、2.4/2.1kb、0.7kb mRNA的转录情况,Southern吸印杂交检测HBV DNA复制中间体水平。结果经小鼠尾静脉高压注射法体内转染质粒pHBV4.1后,小鼠肝组织中检测到HBV3.5kb、2.4/2.1kb mRNA转录信号和HBV DNA复制中间体信号;与共转染pHBV4.1和空载质粒pCMVpA对照组相比,共转染pHBV4.1和pCMVHNF3β使HNF3β过量表达,明显降低了小鼠体内HBV RNA转录和DNA复制水平。结论肝富集转录因子HNF3β对小鼠体内HBV转录和复制具有抑制作用,有可能成为今后抗HBV生物治疗新的靶点。 韩红霞 刘凤君 侯全玲 王月宾 尹华 崔尧丽 唐红关键词:乙型肝炎病毒 转录 复制型HBV重组腺病毒的制备 被引量:2 2008年 目的 通过细菌体内同源重组方法,构建含1.3拷贝HBV DNA片段(HBV4.1)的HBV复制型重组腺病毒。方法从质粒pTh—HBV4.1上获取HBV4.1片段,插入腺病毒穿梭质粒载体pAdTrack—CMV中,构建含HBV4.1的重组穿梭质粒pAdTrack-CMV/HBV4.1。然后在大肠杆菌BJ5183内与pAdEasy—1进行同源重组。形成重组腺病毒质粒pAd—GFP/HBV4.1,经脂质体2000转染HEK293细胞进行包装和扩增,获得腺病毒Ad-GFP/HBV4.1。通过荧光显微镜下观察GFP绿色荧光蛋白的表达,检测腺病毒滴度和感染效率;采用PCR法检测腺病毒DNA上有无HBV基因组存在。结果经酶切鉴定确认含HBV穿梭质粒pAdTrack—CMV/HBV4.1扣重组腺病毒基因组质粒pad—GFP/HBV4.1构建成功;GFP荧光检测提示重组腺病毒Ad-GFP/HBV4.1已成功包装;PCR扩增表明重组腺病毒内携带有HBVDNA片段。在HEK293细胞中获得的病毒滴度可达(4.2—4.8)×10^7 efu/ml;当MOI为100时,感染HEK293细胞的效率〉90%。结论成功构建了携带1.3拷贝HBV基因组的重组腺病毒Ad-GFP/HBV4.1,为进一步建立高水平HBV复制型细胞和动物模型以用于HBV生物学特性的研究奠定了基础。 尹华 周陶友 李红 王月宾 韩红霞 唐红关键词:腺病毒 乙肝病毒 同源重组 腺病毒载体在乙型肝炎生物治疗中的应用 被引量:1 2008年 乙型肝炎病毒(hepatitis B virus,HBV)感染是一个严重的公共卫生问题,特别是在我国,约有1.2亿人为慢性HBV携带者.对已感染HBV者,目前治疗效果尚不理想,生物治疗为其提供了新的思路.理想的载体系统是决定生物治疗效率的重要因素.腺病毒载体由于自身的优势在乙型肝炎生物治疗研究中受到越来越多的重视.本文就腺病毒载体在乙型肝炎生物治疗研究中的应用作一综述. 韩红霞 唐红关键词:乙型肝炎病毒 腺病毒载体 生物治疗 基因治疗 乙肝病毒X蛋白增强小鼠体内HBV的转录及复制 被引量:2 2008年 目的观察小鼠体内乙型肝炎病毒(HBV)X蛋白(HBx)对HBV基因转录和复制水平的影响。方法应用高压注射体内转染法将野生型HBV重组质粒、HBx表达缺失的HBV重组质粒及HBx表达质粒DNA通过尾静脉快速注射入小鼠体内,应用Southern和Northern印迹分别检测小鼠肝组织中HBV DNA复制中间体及HBV mRNA水平。结果野生型及HBx表达缺失的HBV重组质粒注射组小鼠肝组织中均检测到HBV的复制与转录;HBx表达缺失的HBV重组质粒注射组HBV基因转录和复制水平较野生型HBV重组质粒注射组、HBx表达缺失HBV重组质粒与HBx表达质粒共注射组弱,生理盐水注射组未检测到HBV的转录与复制。结论HBx的表达缺失可导致体内HBV基因转录和复制水平的下降,而外源HBx的表达可逆转这种因HBx表达缺失引起的HBV复制及转录的减弱,提示HBx增强小鼠体内HBV基因转录和复制。 侯全玲 唐红 何芳 刘丽 刘凤君 程星 何小燕 韩红霞 黄飞骏关键词:乙型肝炎病毒 乙型肝炎病毒X蛋白 转录 肝细胞核因子3β调控小鼠体内HBV转录和复制的实验研究 目的:应用复制型HBV小鼠模型观察肝细胞核因子3β(HNF3β)对小鼠体内HBV转录和复制的调控作用。
方法:通过尾静脉高压注射法将复制型HBV重组质粒pHBV4.1和大鼠HNF3 β表达质粒pCMVHNF3 ... 韩红霞 刘凤君 唐红 侯全玲关键词:乙型肝炎病毒 基因转录 生物治疗 文献传递