陶功华
- 作品数：55 被引量：79H指数：5
- 供职机构：上海市疾病预防控制中心更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金深圳市科技计划项目上海市卫生局资助项目更多>>
- 相关领域：医药卫生化学工程农业科学生物学更多>>
- Nrf-2基因沉默对纳米Si02致人永生化表皮细胞氧化损伤的影响
- :探讨核因子E2相关因子2(Nuclear factor E2-related factor 2,Nrf-2)基因沉默对纳米二氧化硅(nano-SiO2)致人永生化表皮细胞氧化应激损伤的影响. 方法:采用RNA干扰...
- 陶功华帅怡洪新宇肖萍郑卫东娄丹孙静秋王彦琴仲伟鉴
- 关键词：氧化应激损伤纳米二氧化硅核因子E2相关因子2基因沉默
- Ames试验菌株传代次数对菌株活性和自发回复突变的影响被引量：2
- 2020年
- 【目的】对Ames试验用菌株生物学特性的稳定性进行研究,为确定菌株生物学特性不发生改变的传代次数提供依据。【方法】选择Ames试验所需使用的鼠伤寒沙门菌TA97a、TA98、TA100、TA102菌株作为实验菌株。分别使用原代和不同传代次数的冻存菌株进行生物学特性和自发回复突变菌落数的检测。【结果】4种菌株F1~F6代的组氨酸缺陷、脂多糖屏障缺损、氨苄青霉素抗性、紫外线敏感性和四环素抗性的生物学特性与F0代相比均无改变。但TA97a菌株的自发回变数在F3代开始与F0的差异有统计学意义(P<0.05),而TA100、TA102菌株的自发回变数在F4代开始与F0代的差异有统计学意义(P<0.05)。【结论】Ames试验菌株的传代次数会影响菌株的自发回复突变,TA98、TA100、TA102菌株的传代次数不应超过4代,TA97a菌株的传代次数不应超过3代。
- 张慧君陶功华肖萍
- 关键词：AMES试验回复突变生物学特性
- 甲醛对人Ⅱ型肺泡上皮细胞DNA氧化和甲基化水平的影响被引量：4
- 2014年
- 目的：分析甲醛染毒对体外培养的人Ⅱ型肺泡上皮细胞（A549）内8-羟基鸟嘌呤脱氧核苷（8-oxo-dG）水平、DNA 5-甲基胞嘧啶（5-mC）含量的影响及其时间-效应和剂量-效应关系，探讨甲醛所致的细胞DNA氧化与DNA甲基化的关联性。方法：用5～20μmol/L甲醛作用于A549细胞，用高压液相色谱串联电化学检测技术分析细胞DNA 8-oxo-dG水平，用免疫荧光和高效毛细管电泳法检测细胞全基因组DNA 5-mC含量改变。结果：甲醛染毒提高了细胞8-oxo-dG水平，但是降低了细胞的DNA 5-mC含量。甲醛致细胞DNA氧化与DNA甲基化呈现不同特点，A549细胞暴露于20μmol/L甲醛后，DNA氧化水平在1周甚至更早时间就已显著增高，而相同条件下DNA甲基化水平的改变需要6周以上的时间，DNA甲基化的改变滞后于DNA氧化。A549细胞经5～20μmol/L甲醛染毒8周后，DNA氧化水平与甲醛剂量呈正相关关系，而同样条件下DNA甲基化水平与甲醛剂量呈负相关关系。结论：甲醛染毒可提高DNA氧化水平，降低细胞DNA甲基化水平。在甲醛的毒作用效应中，细胞DNA氧化损伤可能是早于其DNA甲基化的一个重要分子事件。
- 柯跃斌黄娟朱舟吴双陶功华
- 关键词：甲醛DNA甲基化
- 代表性环境化学污染物致DNA损伤修复机制及相关基因多态性研究
- 庄志雄程锦泉柯跃斌纪卫东刘起展杨淋清任泽舫张文娟陶功华刘建军周丽蒋友胜方道奎李习艺唐焕文
- 主要技术的简要说明：1、表观遗传学技术手段主要包括应用于整体基因组DNA甲基化模式检测的5mC免疫荧光法、高效毛细管电泳法、液闪计数法，应用于特定基因启动子区CpG岛甲基化模式检测的甲基化特异性PCR、甲基化特异性定量P...
- 关键词：
- 关键词：分子生物学方法
- 纳米二氧化硅对HaCaT细胞中PAPR-1基因表达及其启动子甲基化的影响
- 2015年
- 目的研究纳米二氧化硅（nm—SiO2）对人皮肤表皮细胞系（HaCaT）细胞中聚腺苷二磷酸核糖聚合酶-1（poly[ADP-ribose]polymerase 1，PARP-1）基因的表达及其基因启动子区甲基化的影响。方法分别以2．5、5．0、10．0μg／ml的nm-SiO2溶液和10μg／ml的微米级SiO2（micro-SiO2）溶液处理HaCaT细胞24h；以3μmol／LDNA甲基化转移酶抑制剂5-氮杂-2-脱氧胞苷（5-aza—CdR，DAC）处理48h10μg／ml的HaCaT细胞为阳性对照（DAC组），并设立溶剂对照组（CTRL组）。应用荧光定量聚合酶链式反应（polymerase chain reaction，PCR）和蛋白质印迹法（Western-blot法）检测PARP-1在mRNA水平和蛋白水平的表达变化，应用亚硫酸氢盐测序（bisulfite pyrosequence，BSP）法检测PARP-1基因启动子区CpG岛的甲基化状态。结果HaCaT细胞暴露nm-SiO224h后，经nm-SiO2处理后，micro-SiO2染毒组和2．5μg／ml染毒组PARP-1表达与CTRL组的差异无统计学意义（P〉0．05），与CTRL组比较，5、10μg／ml染毒组及DAC处理组细胞的PARP-1表达下调，差异有统计学意义（P〈0．05），且其下调水平随着浓度的增大而增高。BSP结果显示PARP-1启动子区-229点甲基化状态升高。结论nm-SiO2可以降低HaCaT细胞中PARP-1基因的表达，可能与其对PARP-1基因启动子区CpG岛的甲基化影响有关。
- 龚春梅杨淋清周继昌陶功华刘小立庄志雄
- 关键词：基因表达
- 5-氨基乙酰丙酸改善高糖所致内皮细胞氧化损伤的作用研究
- 【目的】探讨5-氨基乙酰丙酸（5-ALA）在稳定性高糖致人脐静脉内皮细胞氧化损伤中的作用。【方法】分别以终浓度为1.0、10.0、20.0、50.0、100.0、200.0、500.0、1000.0、2000.0和500...
- 洪新宇陶功华娄丹孙静秋帅怡肖萍
- 关键词：5-氨基乙酰丙酸人脐静脉内皮细胞
- 文献传递
- 上海市主城区生活饮用水中非挥发性有机物的潜在致突变性分析被引量：5
- 2021年
- [背景]上海是一个国际化的特大城市,大量人口对饮用水的需求与日俱增,生活饮用水的安全性是备受关注的焦点。[目的]通过上海市主城区生活饮用水中有机物的致突变性分析,了解上海市生活饮用水的安全性现况。[方法]于枯水期(2015年12月—2016年2月)、平水期(2016年3—5月)、丰水期(2016年6—9月)分别采集供应上海市主城区青草沙水库辐射范围内3个水厂的水源水和出厂水,同时采集主城区中监测点的管网水和末梢水(包括浦西7个区的10个监测点),一年中按3个时期采样,每个时期采样1次,每次采集5 L水样。采用XAD-2树脂对水中非挥发性有机物进行富集,设0.25、0.50、1.00 L·皿^(-1) 3个剂量组,通过细菌回复突变试验(鼠伤寒沙门氏菌TA98菌株和TA100菌株)检测其潜在致突变性,运用TA98菌株检测移码型突变,TA100菌株检测碱基置换型突变,通过加用活化代谢系统(S9)来确定水样中是否含有间接致突变物质。[结果]所采集的水样中有4组水样为细菌回复突变试验阳性,均为TA98菌株阳性,对TA100菌株没有作用,仅在不加用活化代谢系统的组别(-S9)中出现阳性结果。不同水期中,枯水期的样本中阳性率较高(50%),丰水期和平水期次之(25%);不同类型中,水源水的阳性率较高(100%),出厂水次之(33.3%),管网水和末梢水均为阴性。同一份水样中TA98菌株的-S9和+S9回复突变率(MR)差异具有统计学意义(P <0.05)。不同水期的TA98菌株MR值的差异有统计学意义(P <0.05);不同水期TA100菌株MR值的差异也有统计学意义(P <0.05)。不同类型水样的TA98菌株MR值的差异有统计学意义(P <0.05)。TA100菌株MR值未达到阳性标准,但是变化趋势与TA98菌株一致。[结论]上海市生活饮用水中的非挥发性有机物是一类可致移码突变的直接致突变物质。不同水期的饮用水中,枯水期的潜在致突变性较高,平水期次之,丰水期最弱。不同类型�
- 张慧君陶功华洪新宇马武仁肖萍
- 关键词：生活饮用水致突变性
- 短期暴露于纳米SiO2对HaCaT细胞基因组DNA甲基化的影响被引量：2
- 2013年
- 目的探讨纳米SiO2对体外培养细胞基因组总体DNA甲基化水平的影响。方法分别以2.5、5、10μg/ml纳米SiO2溶液和10μg/ml微米级SiO2处理人皮肤表皮细胞系(HaCaT)24h;以3μmol/L DNA甲基化转移酶抑制剂5-脱氧杂氮胞苷(DAC)处理48 h的10μg/ml组为阳性对照,并设立溶剂对照组。应用高效毛细管电泳(HPCE)定量分析纳米SiO2处理细胞24h后,基因组DNA总体甲基化的变化,用Q-PCR和Western Blot方法检测甲基化相关蛋白mRNA和蛋白的表达变化,并用DNA甲基化转移酶活性试剂盒检测DNA甲基化转移酶的活性。结果 HPCE定量分析结果显示纳米SiO2可引起HaCaT细胞总体甲基化程度降低,呈剂量依赖性关系;与正常细胞相比,微米SiO2以及2.5、5和10μg/ml纳米SiO2组分别降低37.8%、43.9%、54.9%和52.8%,差异有显著性(P<0.05);对照组5-aza-dC处理后使HaCaT细胞甲基化程度减少27.3%。各组酶的蛋白表达与mRNA表达水平及DNMTs活性变化具有相同的变化趋势,经纳米SiO2处理的HaCaT细胞,DNMT1、DNMT3a及MBD2表达随着纳米SiO2剂量的上升而下降,DAC组表达水平最低。结论纳米SiO2能引起HaCaT细胞整体基因组DNA甲基化水平降低,可能与DNA甲基化转移酶的酶活性降低有关。
- 龚春梅杨淋清陶功华刘庆成刘建军庄志雄
- 关键词：DNA甲基化纳米SIO2
- 高糖暴露对脑微血管内皮细胞通透性的影响
- ＜正＞目的:探讨高浓度葡萄糖暴露对脑微血管内皮细胞通透性的影响。方法:选取bEnd.3细胞系作为研究模型,检测跨内皮细胞电阻值（TEER）、碱性磷酸酶（ALP）及γ-谷氨酰转肽酶（γ-GT）的活性,对细胞模型的血脑屏障特...
- 娄丹沙毅杰帅怡霍倩李晨肖萍陶功华
- 文献传递
- 5-氨基乙酰丙酸对持续性高糖致内皮细胞氧化损伤的干预作用研究被引量：1
- 2020年
- [背景]5-氨基乙酰丙酸(5-ALA)是一种天然存在的氨基酸,广泛存在于植物和动物中。目前研究发现,5-ALA具有增强胰岛素敏感性和改善糖耐量水平的作用,而其在高糖诱导的内皮细胞损伤中的作用及其机制尚不清楚。[目的]探讨5-ALA在持续性高糖致人脐静脉内皮细胞(HUVECs)氧化损伤中的作用。[方法]设置阴性对照组、持续性高糖组、5-ALA干预组(1.0、10.0、50.0、100.0、200.0 mmol·L^-1)。用5-ALA预处理HUVECs 24 h,而后在细胞培养液中加入葡萄糖至终浓度为30 mmol·L^-1,持续性高糖组细胞在含30 mmol·L^-1葡萄糖的培养基中培养,阴性对照组细胞在正常培养基中培养,各培养48 h。处理结束后,用CCK-8检测细胞活性,用相应试剂盒检测活性氧(ROS)水平、抗氧化酶[总超氧化物歧化酶(T-SOD)、过氧化氢酶(CAT)和谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)]活性和丙二醛(MDA)含量。[结果]与阴性对照组相比,持续性高糖组HUVECs活性降低(t=6.620,P<0.01),HUVECs内ROS的水平增加(t=^-10.671,P<0.01),HUVECs内抗氧化酶T-SOD、CAT和GSH-Px的活性降低,MDA的含量增加(t=11.348、14.302、14.951、^-12.562,均P<0.01)。经5-ALA预处理后,与持续性高糖组相比,干预组HUVECs活性在不同程度上增加,其中50.0 mmol·L^-15-ALA组增加最明显(t=-5.032,P<0.01);HUVECs内ROS的水平降低,其中200 mmol·L^-15-ALA组降低最明显(t=11.232,P<0.01)。5-ALA可增加抗氧化酶的活性,并降低MDA的含量。对于T-SOD、GSH-Px和MDA而言,50.0 mmol·L^-15-ALA干预效果最佳(t=-8.562、^-14.273、12.526,均P<0.01);对于CAT而言,100.0 mmol·L^-15-ALA干预组升高最明显(t=-21.467,P<0.01)。[结论]持续性高糖可增加内皮细胞内ROS的水平,降低T-SOD、CAT和GSH-Px的活性和增加MDA的含量,而5-ALA在一定程度上减轻持续性高糖引起的氧化损伤。
- 杨正丽陶功华肖萍洪新宇
- 关键词：糖尿病内皮细胞5-氨基乙酰丙酸氧化应激
