陈红英
- 作品数：21 被引量：20H指数：3
- 供职机构：西北农林科技大学生命科学学院更多>>
- 发文基金：教育部“新世纪优秀人才支持计划”甘肃省科技重大专项计划国际科技合作与交流专项项目更多>>
- 相关领域：农业科学生物学医药卫生更多>>
- 一种新型杆状病毒表达载体
- 本发明公开了一种新型杆状病毒表达载体，涉及生物技术领域。本发明将杆状病毒表达载体上四个连续的非必需基因Ac84、Ac85、Ac86和Ac87同时敲除后即获得所述新型杆状病毒表达载体。本发明的新型杆状病毒表达载体使外源蛋白...
- 陈红英张潇月赵凯霞
- 文献传递
- 蒜和大血藤等四种中药合剂对2株多重耐药鲍曼不动杆菌的体外抑菌研究被引量：4
- 2016年
- 目的:探讨大蒜和大血藤、五味子、五倍子、石榴皮四种中药合剂对2株多重耐药鲍曼不动杆菌体外抑菌效果。方法:制备大血藤、五味子、五倍子、石榴皮、蒜药液,采用牛津杯法和微量稀释法,分别测定它们对2株多重耐药鲍曼不动杆菌体外抑菌圈、最小抑菌浓度(MIC)、最小杀菌浓度(MBC)。结果:大蒜、五味子、五倍子、石榴皮四种中药合剂对2株多重耐药鲍曼不动杆菌体外有不同程度的抑菌效果,大血藤和蒜>蒜和石榴皮、蒜和五味子>蒜和大血藤+石榴皮+五味子+五倍子,蒜和五倍子效果最差。结论:蒜和这几种中药联合效果不如纯蒜汁在体外的抑菌效果。
- 张怡敏陈红英
- 关键词：大蒜大血藤抗菌药鲍氏不动杆菌
- 单链抗体2F5和4E10的原核表达、纯化和鉴定被引量：1
- 2013年
- 为深入研究2F5和4E10抗体,构建了特异性识别HIV-1病毒MPER区域的2F5和4E10单链抗体的重组质粒,进行了融合蛋白的表达、纯化及鉴定。利用重叠PCR扩增及基因重组技术,获得2F5-scFv和4E10-scFv基因,将其插入原核表达载体pET-28a(+)上,获得表达质粒。转入大肠杆菌BL21(DE3)及Rosetta-gami2(DE3)pLysS中,IPTG诱导表达,SDS-PAGE检测发现,2F5-scFv和4E10-scFv在两种表达菌中均以包涵体形式存在,重组蛋白分子量分别约为27 kD、29 kD。变性条件下,利用镍离子螯合层析方法对包涵体蛋白进行纯化,经复性后获得可溶性单链抗体。ELISA检测表明,制备的单链抗体与原核和真核表达的MPER抗原都有特异性结合活性。
- 刘秀侠杨雄陈红英
- 关键词：HIV-1GP41单链抗体
- 猪瘟病毒诱导细胞自噬有利于病毒复制被引量：3
- 2015年
- 首先采用蛋白印迹以及激光共聚焦显微观察的方法,研究猪瘟病毒感染对细胞内自噬相关蛋白LC3表达及定位的影响;然后用自噬诱导剂雷帕霉素或自噬抑制剂3-甲基腺嘌呤处理猪肾细胞,通过病毒滴度测定研究细胞自噬对病毒复制的影响。发现在病毒感染24h后自噬相关蛋白LC3由LC3-Ⅰ酯化为LC3-Ⅱ,并观察到病毒感染的细胞中出现了LC3蛋白聚点;细胞自噬体的诱导能显著增加病毒滴度。本研究表明猪瘟病毒在感染细胞后能诱导细胞自噬,该细胞自噬过程有利于病毒的增殖。
- 张立冬郭慧琛陈红英孙世琪
- 关键词：细胞自噬猪瘟病毒病毒增殖雷帕霉素
- 定量蛋白质组学技术分析猪繁殖与呼吸综合征病毒感染肺泡巨噬细胞的差异表达蛋白质被引量：1
- 2016年
- 作者采用定量蛋白质组学方法,对猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)感染猪肺泡巨噬细胞(PAMs)和正常PAMs的蛋白质组进行差异分析。通过高效液相色谱和电喷雾串联质谱仪定量分析PRRSV感染细胞与未感染对照细胞间的差异表达蛋白质,并运用Max-Quant 1.0.7.4软件结合蛋白质数据库PaxDb进行鉴定。与对照组相比,感染组共鉴定出39个差异表达蛋白质,其中30个蛋白质表达上调,9个蛋白质表达下调。通过Western blot和ELISA验证了感染的PAMs中SPP1、IFIT3、STAT3及IL-8的表达情况与质谱鉴定结果一致。通过液相色谱—串联质谱联用(LC-MS/MS)技术,筛选得到多个与PRRSV感染相关的差异表达蛋白质,为PRRSV发病的分子机制分析提供了新依据。
- 刘龙陈红英
- 关键词：猪繁殖与呼吸综合征病毒猪肺泡巨噬细胞差异表达蛋白质
- H1N1亚型流感病毒感染A549细胞的环状RNA表达分析
- 2023年
- 通过对甲型H1N1流感病毒感染A549细胞前后表达的环状RNA进行鉴定,筛选病毒感染引起的差异表达环状RNA,为进一步研究环状RNA在流感病毒感染过程中的调控作用奠定基础。本研究从病毒感染和PBS处理的A549细胞中提取RNA,构建测序文库后进行全转录组测序。通过生信分析,鉴定了病毒感染前后宿主细胞表达的环状RNA。以未感染组为对照,使用EdgeR包,筛选条件:|log_(2)FC|≥1、P value<0.05,筛选获得感染前后的细胞中差异表达的环状RNA。使用ClusterProfiler包对差异表达环状RNA的来源基因进行GO和KEGG分析。最后通过荧光定量PCR、外切核糖核酸酶处理、Sanger测序等手段验证了病毒感染前后宿主细胞内部分环状RNA的差异表达。结果表明:流感病毒感染细胞后,环状RNA的表达数目增加。感染组和未感染组分别鉴定到1101和676个环状RNA表达,这些环状RNA广泛分布在所有染色体上,其中大部分(约60%)长度在300~1000 nt,约20%的环状RNA长度超过2000 nt。基于基因位置关系的分析发现,75%~82%的环状RNA源自外显子,12%~17%源自正链重叠转录本,少部分(1%~4%)来自内含子、基因间和反义链转录本。经差异表达分析,共筛选出54个表达上调,18个表达下调的环状RNA。这些差异表达的环状RNA主要分布在5号染色体和19号染色体上。基因本体论GO富集分析显示,差异表达环状RNA来源基因主要富集到RNA定位、细胞质膜和单链DNA结合等相关进程。KEGG通路分析显示,差异表达环状RNA主要与氨基酸降解、FoxO信号等通路相关。最后,通过RT-qPCR、RNase R消化、Sanger测序等方法,验证了环状RNA SNUPN(has_circ_0104558)、DCBLD1(hsa_circ_0077717)和EIF4G3(hsa_circ_0000025)在病毒感染前后细胞中的差异表达,证实其是由对应来源序列反向剪接而成并且具有环状RNA抗RNase R降解的特性。本研究通过转录组测序和生信分析手段鉴定了H1N1甲型流感病毒感�
- 蒋盛强胡靖陈红英
- 关键词：甲型流感病毒A549细胞
- 敲除Ac148-150对苜蓿银纹夜蛾核型多角体病毒复制和外源蛋白表达的影响
- 2020年
- 【目的】同时敲除苜蓿银纹夜蛾核型多角体病毒(AcMNPV)基因组的Ac148、Ac149、Ac150(Ac148-150)基因,检测敲除Ac148-150基因片段对AcMNPV复制和外源蛋白表达能力的影响,为基因功能鉴定和缩小杆状病毒基因组提供参考。【方法】利用Red/ET同源重组系统和rpsL-AMP反向筛选系统对Ac148-150基因进行敲除,得到敲除型杆状病毒质粒(KOAc148-150杆状病毒质粒),提取AcMNPV KOAc148-150杆状病毒质粒和野生型杆状病毒质粒,将其分别与报告基因表达载体共转染Sf9细胞,成功构建重组杆状病毒(野生型病毒vAcMNPV/GFP和缺失突变病毒vAc△148-150/GFP),测定2种重组杆状病毒的一步生长曲线并比较其差异。将2种重组杆状病毒感染Sf9细胞后,采用荧光显微镜观察GFP荧光细胞分布,用流式细胞仪检测GFP荧光强度,再通过SDS-PAGE和Western blot检测Ac148-150缺失突变体表达的GFP产量。【结果】菌落PCR结果表明,AcMNPV中Ac148-150基因敲除成功。缺失突变病毒vAc△148-150/GFP与野生型病毒vAcMNPV/GFP的一步生长曲线基本一致,说明Ac148-150缺失不影响病毒的复制。荧光显微镜观察和流式细胞仪分析结果表明,敲除Ac148-150对外源蛋白GFP分布和荧光强度未产生影响。SDS-PAGE和Western blot检测结果显示,缺失突变病毒vAc△148-150/GFP和野生型病毒vAcMNPV/GFP表达GFP蛋白产量基本一致。【结论】从AcMNPV基因组中同时敲除Ac148、Ac149、Ac150基因后,对病毒的复制和外源蛋白的表达能力无影响。
- 赵凯霞陈红英
- 关键词：核型多角体病毒杆状病毒基因敲除
- 一种展示CyHV-2膜蛋白的重组杆状病毒及其制备方法和应用
- 本发明公开了一种展示CyHV‑2膜蛋白的重组杆状病毒及其制备方法和应用，ORF25C在杆状病毒表面的展示通过将ORF25C的胞外区与杆状病毒AcMNPV gp64的信号肽和跨膜区进行融合表达来实现，以重组杆状病毒为载体表...
- 陈红英曹志伟南昊许晓东
- 文献传递
- 一种展示CyHV-2膜蛋白的重组杆状病毒及其制备方法和应用
- 本发明公开了一种展示CyHV‑2膜蛋白的重组杆状病毒及其制备方法和应用，ORF25在杆状病毒表面的展示通过将ORF25的胞外区与杆状病毒AcMNPV gp64的信号肽和跨膜区进行融合表达来实现，重组杆状病毒为载体表达的O...
- 陈红英曹志伟南昊许晓东
- 文献传递
- 杆状病毒的超感染及其在抗体表达中的应用
- 杆状病毒表达系统作为一种广泛使用的真核表达系统，可以将表达的重组蛋白展示在细胞或病毒颗粒的表面.在基因文库的表达中，虽然杆状病毒能有效地将文库中的基因产物表达并展示在昆虫细胞表面，但是因为昆虫细胞往往被多个病毒同时感染，...
- 许晓东刘冰清吴芳赵钰陈红英
