陈怀青
- 作品数：72 被引量：741H指数：21
- 供职机构：南京农业大学更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金国家教育部博士点基金“九五”国家科技攻关计划更多>>
- 相关领域：农业科学医药卫生生物学更多>>
- 鱼类细胞培养及其应用被引量：1
- 1991年
- 一、引言鱼类细胞培养,是指用类似鱼体内生理环境条件,在体外培养单一型细胞群,使之在体外生存、生长和繁殖的方法.细胞培养虽然很复杂,但概括起来,则不外乎'三个系统'和'四个原则'(图1),它们是以下各种方法和措施的基本依据.
- 陈怀青陆承平
- 关键词：鱼类细胞培养
- 从比较免疫学看鱼类的免疫特性被引量：26
- 1994年
- 从比较免疫学看鱼类的免疫特性陈怀青，陆承平（南京农业大学兽医系南京２１００９５）关键词比较免疫学，鱼，体液免疫，细胞免疫在过去几十年里，免疫学取得了惊人的成就，但这些都是以哺乳类和鸟类为对象进行研究所获得的，而鱼类的免疫学研究则不多。近年来，随着养鱼...
- 陈怀青陆承平
- 关键词：鱼纲免疫学
- 用大蒜素防治草鱼肠炎的试验被引量：5
- 1993年
- 从药敏、人工感染与防治和田间试验三方面研究了人工合成的大蒜素对草鱼肠炎的预防和治疗作用。药敏试验表明,1ppm 的大蒜素对草鱼肠炎的病原——豚鼠气单胞菌仍有显著的抑制作用。用豚鼠气单胞菌人工感染草鱼和鲫鱼,均可致病并使之死亡,用人工合成的大蒜素按每千克鱼体重33毫克和50毫克的剂量分别进行预防和治疗,可显著降低其死亡率。在三个渔场共计1063亩鱼塘的田间应用中,亦证明大蒜素能有效地预防和治疗草鱼肠炎。
- 陈怀青陆承平雍杰雍远
- 关键词：鱼病草鱼肠炎大蒜素
- 迟缓爱德华氏菌的粘附特性被引量：7
- 1997年
- 用绵羊红细胞对不同来源的１５株迟缓爱德华氏菌（ＥＴ）作血凝试验。结果表明，１５株ＥＴ均具有血凝性，且不能为甘露糖、蔗糖、葡萄糖所抑制。分别用甲醛、戊二醛、胰蛋白酶处理ＥＴ的模式菌株ＥＴ９９菌体，能抑制细菌血凝。提纯的ＥＴ９９菌株的鞭毛蛋白、外膜蛋白均无血凝性。同时用ＨＥｐ２细胞分析了１５株ＥＴ的细胞粘附特性。结果表明，有１０株ＥＴ能粘附ＨＥｐ２细胞，粘附菌数大于１０ＣＦＵ／细胞。分别用甲醛、戊二醛、胰蛋白酶、盐酸处理ＥＴ９９菌体，细菌粘附力有所下降；用甘露糖、蔗糖、葡萄糖处理ＥＴ９９菌体，细菌粘附力变化不大；用甲醛、戊二醛、胰蛋白酶处理ＨＥｐ２细胞，ＥＴ９９的粘附菌数有不同程度的下降。提纯的ＥＴ９９菌株外膜蛋白不能抑制细菌粘附，而提纯的ＥＴ９９菌株鞭毛蛋白对细菌的粘附有一定的抑制。提示ＥＴ的粘附素是包括血凝素及鞭毛在内的一类蛋白样物质。
- 欧阳志明陈怀青陆承平
- 关键词：兽医迟缓爱德华氏菌血凝性细胞粘附
- 鲍氏不动杆菌MF1株的粘附特性被引量：15
- 1999年
- 取从患病鳜鱼体内分离到的鲍氏不动杆菌 Ｍ Ｆ１株和３株 Ａ Ｔ Ｃ Ｃ不动杆菌参考株做血凝试验（ Ｈ Ａ），１３种不同动物的红细胞对４株不动杆菌的血凝特性分析结果表明，鲍氏不动杆菌（ Ａｃｉｎｅｔｏｂａｃｔｅｒ ｂａｕｍ ａｎｎｉｉ） Ｍ Ｆ１株能凝集人 Ｏ 型血以及鸡、鼠、绵羊、鲢、黄鳝等５种动物的红细胞， 不凝集鳜、罗非鱼、鲫、团头舫、鲤、欧洲鳗、鳙的红细胞， 且该种血凝不能被甘露糖抑制； 其它３株 Ａ Ｔ Ｃ Ｃ参考菌株对１３种红细胞均不能发生凝集。４株不动杆菌的粘附实验表明， Ｍ Ｆ１株可以粘附 Ｈ Ｅｐ２细胞， 每细胞粘附菌在２０个以上， 菌体粘附于细胞四周； ３株 Ａ Ｔ Ｃ Ｃ不动杆菌参考株对 Ｈ Ｅｐ２细胞不具粘附特性。以上４株不动杆菌对 Ｅ Ｐ Ｃ细胞 （鲤鱼乳头状上皮瘤细胞系） 均无粘附性。
- 顾天钊陆承平陈怀青
- 关键词：鲍氏不动杆菌血凝性细胞粘附鱼类
- 嗜水气单胞菌HEC毒素基因的克隆及酶谱分析被引量：21
- 1997年
- 嗜水气单胞菌ＨＥＣ毒素是该菌重要的致病因子和保护性抗原。为了解其分子生物学特性，用ＳＤＳ－蛋白酶Ｋ法提取了嗜水气单胞菌Ｊ－１株的染色体，经ＥｃｏＲＩ酶切、琼脂糖凝胶电泳后作Ｓｏｕｔｈｅｒｎｂｌｏｔｔｉｎｇ，用ＤＩＧ标记的ＨＥＣ毒素探针检测，其５．０ｋｂ的酶切片段呈阳性。回收该片段，与ｐＵＣ１９相连，转化大肠杆菌ＪＭ１０９。提取Ｘ－ｇａｌ平板上白色菌落的质粒，经大小比较、ＥｃｏＲＩ酶切分析及ＤＩＧ标记ＨＥＣ毒素核酸探针斑点杂交鉴定，获得ｐＨＥＣ１１等含５．０ｋｂ目的ＤＮＡ片段的重组质粒。ｐＨＥＣ１１质粒经酶切、电泳，证实目的ＤＮＡ片段中含有ＢａｍＨＩ、ＳｍａⅠ、ＰｓｔⅠ及ＰｖｕⅡ等酶切位点，并绘制了其物理图谱。同时还构建了若干亚克隆，为研制嗜水气单胞菌基因工程苗提供了目的基因片段。
- 陈怀青陆承平袁世山于康震卢景良
- 关键词：嗜水气单胞菌毒素基因分子克隆物理图谱
- 致病性嗜水气单胞菌保护性抗原的研究被引量：46
- 1997年
- 本试验采用SDS－PAGE对10株嗜水气单胞菌（Ah）的外膜蛋白（OMP）和脂多糖（LPS）进行分析，结果显示大多数菌株具有相似的OMP图谱，而LPS则有较大的差异，用鲫鱼抗AhJ-1株全菌血清进行免疫转印，发现S蛋白（S－layerProtein）是70％Ah菌株的共同抗原，而LPS则有明显的抗原多样性，AhJ－1株抗血清仅能与同源菌株起反应。用AhJ－1株HEC毒素（Hemolvticactivity，Enterotoxicity，Cytotoxicity，HEC）的单克隆抗体检测此10株Ah，8株细菌可产生抗原性相同的HEC毒素。用纯化的AhJ－1株的S蛋白、LPS及HEC毒素（预先天活）分别免疫小鼠，强化免疫后，对同源菌株的攻击均能完全保护；S蛋白免疫组和HEC毒素免疫组对异源菌株TPS－30的攻击均能保护，而LPS免疫组则不能完全保护。上述结果表明，S蛋白和HEC毒素是Ah的主要共同保护抗原。AhJ-1株有望成为预防嗜水气单胞菌败血症的疫苗生产菌株。
- 孙建和严亚贤陈怀青陆承平
- 关键词：嗜水气单胞菌S蛋白
- 嗜水气单胞菌苗预防白鲫暴发性传染病的田间试验被引量：3
- 1992年
- 本文对田间大规模使用嗜水气单胞菌苗预防淡水鱼暴发性传染病进行了初步研究。选取患病死亡最为严重的白鲫为对象,采用腹腔注射和浸泡两种免疫方法,对精养鱼池放养的1万3千余尾白鲫进行免疫接种,所用疫苗为自行研制的嗜水气单胞菌苗。结果表明:在暴发性传染病自然流行的情况下,免疫接种组的发病死亡率为10.8%,未免疫接种的平行对照组发病死亡率为16.4%,两者间的差异极显著(P<0.01);在免疫接种组中,浸泡免疫组的发病死亡率为10.4%,腹腔注射免疫组的发病死亡率为11%。两者间的差异不显著(P>0.05),由此可见,应用嗜水气单胞菌苗进行免疫接种,可有效地预防淡水鱼的暴发性传染病。浸泡免疫的成功为该苗的进一步推广展示了广阔的前景。
- 陈怀青丁志林陆承平
- 关键词：鲫鱼传染病单胞菌
- 嗜水气单胞菌S蛋白的提纯及特性分析被引量：41
- 1996年
- 电镜观察表明,嗜水气单胞菌J-1株具有S层结构,在菌体外层呈晶格样规则排列。菌体经酸性甘氨酸缓冲液处理,S层从菌体上脱落,离心上清液即为粗提S蛋白。进一步经Sephadex G200凝胶层析和DEAE-纤维素离子交换层析纯化,获得的S蛋白呈单一多肽,分子量为51500。氨基酸组分分析结果表明,S蛋白含有天门冬氨酸等15种氨基酸,其中丙氨酸等疏水性氨基酸占36.8％。生物学活性显示,S蛋白对Vero细胞有轻微的细胞毒性,但没有溶血性,对鲫鱼和小鼠也无致死作用。用自制的嗜水气单胞菌J-1株S蛋白抗血清PM及PR和国外提供的嗜水气单胞菌TF7株S蛋白抗血清PF1分别作免疫转印和间接ELISA,检测来源于不同地区和不同动物种类的20株嗜水气单胞菌的S蛋白。结果表明,S蛋白的抗原性存在着菌株间的差异。另外,某些菌株不具有S层。
- 严亚贤陈怀青陆承平
- 关键词：嗜水气单胞菌S蛋白生物学活性提纯
- 家养鲤科鱼暴发性传染病的病原研究被引量：147
- 1991年
- 从不同地区、不同鱼种的濒死病鱼的实质性脏器中分离到一种革兰氏阴性、有运动力的短杆菌,具有如下特点:氧化酶和V-P反应均呈阳性,发酵葡萄糖产酸、产气,发酵甘露醇、水杨素和阿拉伯糖,不发酵肌醇,鸟氨酸脱羧酶阴性,对新生霉素不敏感。用API-20E系统试剂盒检测,证实其为嗜水气单胞菌。用该菌人工感染健康鱼,可引致与自然发病鱼类似的病症,其半数致死量(LD_(50))为5×10~3个菌。在该菌的培养上清中存在着一种具有溶血活性的毒素。研究证明,家养鲤科鱼暴发性传染病的病原为产毒素的嗜水气单胞菌,该病的准确名称应为嗜水气单胞菌败血症。
- 陈怀青陆承平
- 关键词：传染病病原单胞菌
