孙建和
- 作品数：188 被引量：575H指数：13
- 供职机构：上海交通大学农业与生物学院上海市兽医生物技术重点实验室更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金公益性行业(农业)科研专项上海市科学技术发展基金更多>>
- 相关领域：农业科学生物学医药卫生轻工技术与工程更多>>
- 大肠杆菌O157噬菌体中vt2基因A、B亚单位的克隆与序列分析
- 本文根据GenBank中vt1、vt2毒素基因序列设计合成4对引物,以大肠杆菌0157菌株DNA为模板,扩增vt1、vt2,从只具有vt2的菌株中诱导释放噬菌体,以噬菌体DNA为模板进行PCR扩增,获得vt2、vt2-A...
- 张慧英孙建和严亚贤
- 关键词：噬菌体基因序列分析
- 文献传递
- 8株动物源编码Stx2短尾噬菌体的生物学特性
- 2008年
- 【目的】对8株源自大肠杆菌O157编码Stx2毒素的噬菌体生物学特性进行研究。【方法】丝裂霉素C诱导8株大肠杆菌O157菌株释放噬菌体,采用PCR作初步鉴定,分离、纯化噬菌体基因组,随机引物法地高辛(DIG)标记stx2基因片段作为探针,对纯化的噬菌体采用Southern blot进行Stx2噬菌体再次鉴定,透射电子显微镜观察纯化的8株Stx2噬菌体的形态特征,通过限制性内切酶图谱分析,确定噬菌体的核酸类型和基因组大小、以及限制性内切酶酶切片段多态性,并分析噬菌体的蛋白质组成特征。【结果】Southern blot证实分离的8株噬菌体为Stx2噬菌体,电镜下观察的各株Stx2噬菌体形态一致,头部均为正六边形,尾部很短,属于短尾噬菌体科,各株噬菌体之间存在相同的蛋白结构模式,基因组为双链DNA,限制性内切酶片段长度表现出一定的多态性,噬菌体的基因组大小从48.0～65.3kb不等。【结论】来源不同菌株的8株编码Stx2噬菌体均为短尾噬菌体,其蛋白结构模式一致,但基因组具有不同组成。
- 夏炉明苏良科孙建和严亚贤
- 关键词：SDS-PAGE
- 蛋白真核表达启动子与蛋白表达载体及其构建方法与应用
- 本发明涉及蛋白真核表达启动子与蛋白表达载体及其构建方法与应用。蛋白表达载体是一种环状载体，包含原核复制起点、一个真核复制起点、筛选标记基因和外源基因表达盒，所述外源基因表达盒自上游至下游依次由蛋白真核表达启动子、连接片段...
- 马婧姣谢立香严亚贤孙建和
- 文献传递
- 大肠杆菌O157:H7中编码vt2基因的噬菌体的分离与鉴定被引量：6
- 2005年
- 根据GenBank中VT1、VT2毒素的基因序列设计合成2对引物,以大肠杆菌O157:H7菌株DNA为模板,扩 增vt1、vt2。诱导只扩增出vt2的菌株释放噬菌体,利用多种指示菌经双层琼脂平板法来分离纯化VT2噬菌体,观 察噬菌斑的特征,提纯病毒粒子进行电镜观察,并对噬菌体中vt2基因检测、克隆和序列分析。结果显示VT2噬菌 体感染MC1061在双层琼脂平板上形成的噬菌斑小而混浊,多呈磨玻璃样;而首次感染大肠杆菌CC118(λpir),此 后用MC1061分离的噬菌体,再以MC1061为指示菌,在双层琼脂平板上形成小而清晰透明的噬菌斑。电镜下噬 菌体头部呈六边形外廓,尾部细长无尾鞘结构。以噬菌体DNA为模板进行PCR扩增,检测到vt2特异性DNA 带,克隆的vt2基因序列与GenBank中编码VT2毒素的核苷酸序列(X07865,NC_002655,BA000007,AF291819) 的同源性分别达到99％,确定编码VT2毒素的基因位于噬菌体上,并获得VT2噬菌体(?)HY。
- 张慧英孙建和严亚贤
- 关键词：大肠杆菌O157:H7
- 利用双荧光素酶报告基因检测鸭IFN-β启动子活性的方法
- 本发明提供一种利用双荧光素酶报告基因检测鸭IFN‑β启动子活性的方法，包括以下步骤：A、构建含鸭IFN‑β启动子靶序列的萤火虫荧光素酶重组质粒；B、将含鸭IFN‑β启动子靶序列的萤火虫荧光素酶重组质粒与刺激物、内参质粒及...
- 孙建和刘云霞程玉强严亚贤
- 特异性抗IBDV单链抗体基因的构建及序列分析
- 2002年
- 从抗 IBDV杂交瘤细胞系 SJS中分离总 RNA,经 RT-PCR体外扩增重、轻链可变区基因 ,通过一连接肽 (Giy4 Ser) 3基因拚接形成 Sc Fv基因 ,经 IBDV抗原亲和筛选出特异性阳性克隆进行核苷酸序列测定及氨基酸序列推导。所获得的特异性抗 IBDV单链抗体基因为 VH-Linker-VL 结构 ,其含有编码 (Giy4 Ser) 3的连接肽基因及维持抗体结构所必须的半胱氨酸残基 ,编码产物具有与亲本抗体相同的抗原结合活性和特异性 ,从而为研制具有应用潜力的高表达工程化抗体奠定了基础。
- 胡昕陆苹李晖孙建和王国丰
- 关键词：传染性法氏囊病病毒可变区单链抗体噬菌体展示
- 抗IBDV单抗中试扩大生产的工艺研究
- 陆苹王欣孙建和赵冰李晖
- 该项目确定了影响细胞繁殖与单抗表达水平的能源和碳源物质——葡萄糖和谷氨酰胺，及其代谢产物——乳酸和氨对分泌抗IBDV单抗的杂交瘤细胞生长代谢的影响；完成了细胞生长和单抗生产的动力学和提高单抗比生成速率的研究；在生物反应器...
- 关键词：
- 关键词：IBDV代谢调控
- 丝裂霉素C对溶原性大肠杆菌O157 Stx毒素表达的影响
- 【目的】确定丝裂霉素C对溶原性大肠杆菌O157中Stx前噬菌体和Stx毒素的诱导作用。
【方法】利用丝裂霉素C作诱导剂对8株溶原性大肠杆菌O157进行噬菌体诱导，以MC1061作指示菌采用双层琼脂平板法观察诱导...
- 夏炉明孙建和严亚贤
- 关键词：大肠杆菌丝裂霉素CVERO细胞
- 源自大肠杆菌O157编码Stx2毒素的噬菌体特性研究
- 丝裂霉素C诱导8株大肠杆菌O157释放编码Stx2毒素的噬菌体。以地高辛(DIG)标记的stx2基因片段作为探针，应用Southern blot对纯化的噬菌体进行鉴定。通过限制性内切酶图谱分析。确定噬菌体的核酸类型、基因...
- 夏炉明苏良科孙建和严亚贤
- 关键词：丝裂霉素C
- 鸡IRF1与IRF7协调参与STING介导的IFN-β激活调控
- 干扰素-β（interferon-β,IFN-β）为Ⅰ型干扰素,具有广谱抗病毒、抗肿瘤活性,且有强大的免疫调节作用,对于禽类的先天性免疫及触发适应性免疫十分重要。干扰素调节因子（Interferonregulatoryf...
- 刘云霞程玉强严亚贤孙建和
- 关键词：IFN-Β
- 文献传递
