郭亮
- 作品数：6 被引量：16H指数：3
- 供职机构：第三军医大学新桥医院更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- 活化转录因子3与急性肺损伤被引量：3
- 2017年
- 急性肺损伤（acute 1ung injury，ALI）／急性呼吸窘迫综合征（acute respiratory distress syndrome，ARDS）是由各种直接和间接损伤导致的肺泡上皮细胞及毛细血管内皮细胞损伤，造成弥漫性肺间质及肺泡水肿，进而发生急性低氧性呼吸功能不全。其由多种炎症细胞（巨噬细胞、嗜中性粒细胞和淋巴细胞等）介导。
- 吴秀琳陈复辉钱斓兰郭亮吴学玲唐敏
- 关键词：急性肺损伤TLRSNF-ΚB
- 筛选小鼠Cltb启动子顺式元件结合蛋白的酵母单杂交文库的构建被引量：1
- 2015年
- 目的利用酵母单杂交系统筛选与Cltb基因启动子结合的顺式元件,获得调控Cltb基因表达的转录因子,阐明Cltb基因的转录调控机理。方法首先,构建表达Cltb调控序列的诱饵质粒p Bait-Ab Ai,并将诱饵质粒转入Y1HGold菌株,构建可稳定表达"诱饵-报告子"的酵母菌株;然后,运用SMARTTM技术构建小鼠肺组织酵母单杂交c DNA AD融合表达文库,并进行c DNA文库的筛选。结果成功构建了筛选Cltb启动子顺式元件结合蛋白的酵母单杂交文库,该文库的转化效率为:9.35×105CFU/μg。通过对文库的筛选最后获得了5个阳性克隆并测序,得到5个可编码结合蛋白的基因,分别是Srrt、hnRNPs A/B、Irf1、NKx2.5和Zfp953。结论所构建的酵母单杂交文库符合实验要求,筛选的5个转录因子为研究Cltb基因表达调控奠定了基础。
- 吕学军陆卫忠张永娟郭亮李少莹李玉英钱桂生
- 关键词：转录调控
- 酵母双杂交筛选Clathrin相互作用蛋白被引量：2
- 2014年
- 目的应用酵母双杂交技术从小鼠肺cDNA文库中筛选与Clathrin相互作用蛋白,进一步阐明Clathrin在急性肺损伤和急性呼吸窘迫症(ALI/ARDS)发生时肺泡上皮极性损伤中的具体作用机制。方法首先构建酵母双杂交pSos-Clathrin诱饵载体,酶切鉴定,然后确定Clathrin诱饵蛋白无自激活特性并检测了Clathrin诱饵蛋白的表达;最后筛选小鼠肺cDNA文库并对筛选得到的阳性克隆进行回转验证,对回转验证结果为阳性的文库克隆质粒送检测序,分析克隆序列。结果酵母双杂交筛选小鼠肺cDNA文库得到4个与Clathrin相互作用蛋白,分别是:腺苷酸环化酶关联蛋白1,细丝蛋白α,DAP凋亡诱导蛋白激酶2和G蛋白耦联受体激酶6。结论 Clathrin参与细胞极性调节、炎症损伤和细胞凋亡等过程。
- 吕学军陆卫忠张永娟郭亮李少莹李玉英钱桂生
- 关键词：急性肺损伤细胞极性酵母双杂交
- 基因芯片筛选急性肺损伤小鼠模型肺组织中活化转录因子3相关差异基因被引量：1
- 2016年
- 目的利用基因芯片技术筛选LPS诱导的急性肺损伤小鼠肺组织中与活化转录因子3(acting transcription factor 3,ATF3)相关的差异基因表达,以发现与ATF3可能相互作用的基因。方法采用基因芯片技术筛选野生型C57小鼠和ATF3敲基因小鼠经LPS处理后肺组织中的差异表达基因。进一步采用RT-PCR技术对重点基因的表达进行验证。结果与野生型C57小鼠比较,ATF3敲基因小鼠共筛选出1 692个差异基因,有21个与炎症调控相关的基因表达差异明显,其中,Myo18a、Mest、Gpr124、Rcan2、Tnfsf15、Ltbp3、Cdh2、Ppm1f、Spns2、Rarres2、Cgn、Mmrn2、Crb3、Adamts2、Mrc2、Sh3tc2、Cdk5rap1、Cenpf共18个基因在ATF3敲基因小鼠肺组织中表达明显上调;Padi4、Wfdc82个基因表达明显下调。对重点基因Tnfsf15(又称为TL1A)进一步验证,RT-PCR检测结果显示,表达趋势与基因芯片一致。结论 TL1A可能参与了ATF3对LPS诱导的急性肺损伤的炎症保护作用。
- 钱斓兰郭亮吴学玲
- 关键词：急性肺损伤基因芯片差异基因表达
- 转录激活因子3对绿脓杆菌致急性肺损伤小鼠肺泡灌洗液炎症因子的影响被引量：4
- 2016年
- 目的探讨转录激活因子3(ATF3)对绿脓杆菌致急性肺损伤(ALI)小鼠肺泡灌洗液炎症因子的影响。方法以荧光标记的绿脓杆菌(PA)(1.5×108CFU/ml,50μl)经鼻滴入C57BL/6野生型和ATF3敲基因小鼠气管构建急性肺损伤模型;ELISA检测WT小鼠和ATF3-KO小鼠肺泡灌洗液中前炎症因子白介素-1β(IL-1β)、白介素-6(IL-6)和肿瘤坏死因子-α(TNF-α)浓度。结果经鼻滴入绿脓杆菌6 h后小鼠肺组织病理检测表现为:中性粒细胞大量浸润、肺泡结构破坏、肺泡出血以及肺间质水肿,证实成功构建了经鼻滴入绿脓杆菌(PA)诱导的急性肺损伤模型。野生型小鼠在绿脓杆菌滴入后肺泡灌洗液中IL-1β的浓度于3、6、12和24 h时分别为(198.36±20.85)pg/ml,(131.93±8.23)pg/ml,(130.10±15.65)pg/ml,(67.04±2.77)pg/ml;肺泡灌洗液中IL-6的浓度于3、6、12和24 h时分别为(1 657.59±77.13)pg/ml,(1 232.78±31.85)pg/ml,(103.33±1.75)pg/ml,(24.44±5.79)pg/ml;肺泡灌洗液中TNF-α的浓度于3 h,6 h,12 h和24 h时分别为(542.12±49.12)pg/ml,(347.89±34.38)pg/ml,(42.23±9.63)pg/ml,(19.45±3.23)pg/ml。野生型小鼠急性肺损伤小鼠肺泡灌洗液中IL-1β、IL-6、TNF-α浓度均于3 h表达最高,故选择3 h时相点对敲基因小鼠进行检测,ATF3敲基因小鼠在绿脓杆菌滴入后3 h时肺泡灌洗液中炎症因子IL-1β、IL-6、TNF-α的浓度分别为(321.25±7.81)pg/ml、(2 479.69±127.4)pg/ml、(840.75±22.97)pg/ml,表达明显高于野生型小鼠急性肺损伤组及对照组,均存在显著差异(P<0.05)。结论 ATF3对绿脓杆菌致急性肺损伤小鼠的炎症反应有抑制作用。
- 吴秀琳李明霞蔡俊钱斓兰郭亮吴学玲陈复辉
- 关键词：转录激活因子3绿脓杆菌急性肺损伤促炎因子
- 标准化病人在呼吸科住院医生规范化培训中的应用被引量：8
- 2016年
- 目的研究标准化病人带教对呼吸科住院医生规范化培训的意义。方法将呼吸科规范化培训学员随机分为对照组和实验组,对照组采用传统方式带教,实验组除采用传统方式外,还利用标准化病人每天进行两小时问诊、查体及诊断思路的培训,为期两个月。培训结束后,对两组进行理论知识、病史采集、体格检查和病例分析测试。结果实验组学员体格检查、病史采集及病例分析成绩均明显高于对照组(P<0.05)。结论在住院医生规范化培训带教中应用标准化病人,可以显著提高学员问诊、体检和临床诊疗技能水平,值得推广应用。
- 吕学军刘俊彦赵维魏征华郭亮李玉英
- 关键词：标准化病人住院医生呼吸科
