赵晓燕
- 作品数：5 被引量：17H指数：3
- 供职机构：军事医学科学院微生物流行病研究所病原微生物生物安全国家重点实验室更多>>
- 发文基金：国家重点基础研究发展计划更多>>
- 相关领域：农业科学医药卫生更多>>
- EV71型vP1蛋白表达、纯化及免疫原性的初步评价被引量：11
- 2010年
- 目的运用Bac-to-Bac杆状病毒表达系统表达新肠道病毒EV71 vP1蛋白(EV71vP1),并对EV71 vP1蛋白的免疫原性进行初步评价。方法利用RT-PCR技术获得EV71 vP1基因,将基因序列克隆到载体pFastBac HTA,通过转座反应,与Bacmid DNA重组,重组后转染Sf9昆虫细胞。采用透射电镜观察法、SDS-PAGE、Western-blot方法对vP1蛋白进行验证,利用ELISA、微量中和抗体方法对蛋白的免疫原性进行初步评价。结果 EV71 vP1蛋白相对分子量约为33KD,表达量约10mg/L;ELISA抗体效价为1∶900;中和抗体效价1∶800。结论利用Bac-to-Bac杆状病毒表达系统成功的表达了EV71 vP1蛋白,并对其免疫原性做了初步评价,为今后EV71 vP1亚单位疫苗的研究提供参考。
- 李晓楠赵忠鹏段跃强赵晓燕王希良李培锋
- 关键词：EV71VP1蛋白免疫原性
- 布鲁菌BMEI1829基因的原核表达、蛋白纯化及动物免疫试验被引量：3
- 2010年
- 利用PSORTb及CELLO生物学软件对布鲁菌16M菌株基因组序列进行分析,预测其外膜蛋白基因序列;选取BMEI1829基因进行PCR扩增并与原核表达载体pET32a(+)连接,转入E.coliBL21(DE3)感受态细胞;IPTG诱导蛋白表达,SDS-PAGE分析及Western blot鉴定目的蛋白的表达;经His-TrapTMHP纯化,免疫Balb/c小鼠,间接ELISA法检测特异性抗体。结果表明,BMEI1829蛋白在原核表达系统中成功表达,纯化后蛋白免疫Balb/c小鼠可产生特异性抗体,抗体亚型分布以IgG1、IgG2b为主,为进一步研究其功能奠定了基础。
- 赵晓燕朱亮姜德玉高啸段越强王希良李培锋
- 关键词：布鲁菌原核表达
- Ⅱ型单纯疱疹病毒糖蛋白D在杆状病毒表达系统中的表达被引量：3
- 2010年
- 以Ⅱ亚单纯疱疹毒-2333株(HSV-2)的基因组DNA为模板扩增编码HSV-2糖蛋白D(glyco-protein D)基因,与载体pFastBacⅠ连接,转化E.coilDH5α感受态细胞,经PCR及测序鉴定正确。将pFastBacⅠ-gD重组质粒转座至DH10Bac获得重组穿梭质粒,转染Sf9昆虫细胞,获得重组杆状病毒。重组杆状病毒感染Sf9细胞表达重组蛋白,经对表达条件进行优化,SDS-PAGE和Western blot鉴定,成功表达HSV-2 gD蛋白,为下一步的工作奠定了基础。
- 姜德玉刘坤赵晓燕张伟李君丽王希良于三科
- 关键词：糖蛋白D
- 6个布鲁氏菌蛋白的克隆、表达及纯化
- 2010年
- 目的构建含6个布鲁氏菌蛋白的原核表达载体,并对其重组蛋白进行诱导表达及纯化。方法以羊种布鲁氏菌16M基因组DNA为模板扩增6个蛋白基因,与载体pET32a(+)连接,转化E.coliBL21(DE3)感受态细胞,IPTG诱导蛋白表达,SDS-PAGE及Westernblot鉴定,采用HisTrapTMHP纯化目的蛋白。结果成功克隆了6个布鲁氏菌蛋白,经对表达条件进行优化,目的蛋白获得大量表达,纯化后纯度达90%以上。结论获得了纯度较高的6个布鲁氏菌蛋白,为进一步研究其免疫原性及保护性奠定基础。
- 赵晓燕胡毅伟赵忠鹏李晓楠段越强李培锋王希良
- 关键词：布鲁氏菌重组蛋白原核表达
- 新型布鲁氏菌疫苗的构建及免疫效果的初步研究
- 寻找具有免疫原性的外膜蛋白是构建布鲁氏菌病亚单位疫苗、DNA疫苗和细菌活载体疫苗的关键。 本研究利用在线生物学软件PSORT和CELLO对布鲁氏菌16M菌株基因组序列进行分析,预测其外膜蛋白基因序列。选取17个外膜蛋白基...
- 赵晓燕
- 关键词：布鲁氏菌外膜蛋白DNA疫苗体液免疫
- 文献传递
