蒋小辉
- 作品数：9 被引量：13H指数：2
- 供职机构：成都中医药大学第二临床医学院更多>>
- 发文基金：国家重点基础研究发展计划四川省教育厅重点项目四川省卫生厅研究基金更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学农业科学更多>>
- 人未受精及受精未分裂卵母细胞超微结构研究被引量：1
- 2010年
- 目的应用透射电子显微镜观察人未受精及受精未分裂卵母细胞的超微结构,分析卵母细胞受精失败、受精后不分裂的原因。方法分别将收集的体外受精(in vitrofertilization,IVF)及卵胞浆内精子注射(intracytoplasmic sperm injection,ICSI)时受精失败、受精未分裂的卵母细胞进行固定、脱水、包埋、超薄切片,透射电子显微镜下观察超微结构。结果常规IVF受精失败成熟卵母细胞主要呈现的超微结构:①透明带正常,但卵膜下未见皮质颗粒,精核呈浓缩状态,周围未见线粒体、滑面内质网(SER)泡等细胞器围绕;②透明带为异常紧密状结构,卵膜下有一层线形排列皮质颗粒,线粒体为其主要的细胞器,缺少SER集合管、SER泡等细胞器,有时可见透明带内存在顶体完整的精子。ICSI时未受精的第二次减数分裂中期(metaphaseⅡ,MⅡ)卵母细胞呈现的超微结构:①可见卵膜下一层线形排列皮质颗粒,SER集合管、SER泡常与线粒体相连;注射的精子已褪去核膜,部分染色质已去浓缩;②皮质颗粒极少或分散存在,未在卵黄膜下排列;缺乏线粒体、SER集合管等细胞器或者线粒体孤立存在。受精未分裂卵母细胞呈现的超微结构:卵周隙内可见皮质颗粒排放的皮质内容物,线粒体数量少,胞质内有许多小脂滴填满的脂褐体;环纹片层(annulate lamellae,AL)异常聚集且成丛分布于胞浆中。结论常规IVF卵胞质中细胞器异常分布导致卵母细胞胞质不成熟影响其受精能力;透明带结构异常及诱导顶体反应缺陷可导致精子穿透障碍;卵母细胞激活失败与ICSI受精失败有关;脂褐体的出现及AL异常聚集与受精卵不分裂有关。
- 张伦蒋小辉
- 关键词：超微结构
- RNAi敲低小鼠睾丸雄激素结合蛋白SHBG对生精功能影响的研究被引量：2
- 2013年
- 目的通过干扰小鼠睾丸雄激素结合蛋白(Sex hormone-binding globulin,SHBG)的表达,研究Shbg基因对雄性小鼠生精功能的影响。方法构建有效的Shbg基因干扰质粒,以Western Blot检测干扰效果,通过RNAi干扰小鼠睾丸Shbg基因的表达,研究干扰Shbg基因的表达对小鼠体内胎仔数和精子数量、精子活力、睾丸重量和体外受精率的影响。结果 RNAi干扰Shbg-mRNA的表达能使小鼠睾丸SHBG蛋白表达明显下调,SHBG蛋白表达下调使雄性小鼠自然交配后胎仔数降低,附睾精子的数量和体外受精率也明显下降。结论SHBG蛋白与雄性小鼠的生育力密切相关。
- 张路张伦蒋小辉
- 关键词：生精功能
- 节律基因Clock对雄性小鼠顶体酶活性的影响被引量：3
- 2007年
- 目的通过干扰小鼠睾丸节律基因Clock的表达,研究C ock对雄性小鼠顶体酶活性的影响。方法通过RNAi干扰技术干扰雄性小鼠睾丸节律基因Clock的表达。以Western Blot检测干扰效果。研究干扰Clock表达后对小鼠顶体的形态发育和顶体酶活性的影响。结果CLOCK干扰质粒使小鼠睾丸CLOCK蛋白的表达明显下调,顶体酶活性明显下降。结论节律基因Clock可能通过调节顶体酶活性来影响雄性小鼠的生殖功能。
- 蒋小辉刘延友叶珊汪宇辉江舟张路王正荣
- 关键词：CLOCK顶体酶活性
- 节律基因Clock干扰对小鼠精子受精能力的影响被引量：1
- 2008年
- 目的通过干扰小鼠睾丸圆形精子期节律基因Clock的表达,研究Clock对雄性小鼠精子受精能力的影响。方法小鼠睾丸注射Clock干扰质粒,Western Blotting检测注射后睾丸组织Clock表达的变化,体内实验观察注射干扰质粒前后引起雌鼠胎仔数变化,体外实验观察精子数量、精子活力、体外受精率以及对顶体发育的影响。结果Clock干扰质粒使小鼠睾丸CLOCK蛋白的表达明显下调。体内实验结果显示注射Clock干扰质粒影响了雄性鼠致雌鼠的胎仔数,体外实验结果显示,虽然注射Clock干扰质粒后精子计数、精子活力无明显变化,但体外受精能力明显下降。顶体酶活性明显下降。结论节律基因Clock与雄性小鼠的生殖功能有密切的关系。节律基因Clock可能通过调节顶体酶活性来影响雄性小鼠精子的受精能力。
- 蒋小辉张路汪宇辉刘延友江舟王正荣
- 关键词：CLOCK基因顶体顶体酶活性
- 左/右归丸对小鼠精子功能影响的研究被引量：1
- 2012年
- 目的:探讨左/右归丸对小鼠精子功能的作用机制。方法:正常ICR雄性小鼠随机分为服用左/右归丸的实验组和服用生理盐水的对照组,实验组灌服含左/右归丸溶液,每次含左、右归丸各0.25 g,qd×14 d,每次1 ml,对照组以等量生理盐水代替。于末次灌胃后第7日与超促排卵的雌鼠合笼,检测到雌鼠阴栓后处死雌鼠,取1-细胞胚胎(受精卵),体外培养,观察卵裂率和囊胚形成率。另将上述确认让雌鼠受孕的雄鼠,于前次交配后3 d处死,取附睾精子,并行IVF,观察体外受精率和囊胚形成率,进一步观察与精子受精能力相关的完整顶体(acrosome-in-tact spermatozoa,AIS)率和顶体酶活性。结果:体内受精实验组的卵裂率(88.3±1.3%)高于对照组的(62.1±3.5%),差异有统计学意义(P=0.005)。实验组IVF受精率为82.4±2.9%,高于对照组的62.5±3.6%,差异有统计学意义(P=0.015)。不管体内受精还是体外受精,实验组与对照组的囊胚形成率均无统计学差异(P>0.05)。实验组顶体酶活性为44.29±5.49 IU,高于对照组的27.12±4.87 IU,差异有统计学意义(P=0.048),AIS率组间无统计学差异。结论:左/右归丸能提高小鼠精子功能,其作用机制有可能是通过调节顶体酶活性来影响小鼠精子功能。
- 蒋小辉张路张伦梁鑫陆华
- 关键词：精子功能顶体酶活性小鼠
- 补肾中药复方对小鼠精子受精能力影响的研究
- 2011年
- 目的观察补肾中药复方对小鼠精子受精能力的影响,并探讨其作用机制。方法正常雄性小鼠随机分为服用补肾中药复方的实验组和服用生理盐水的对照组,实验组灌服补肾中药复方溶液,1次/d,每次1mL,共14d,对照组同时间灌服等量的生理盐水。于末次灌胃后第7d与超排的雌鼠合笼,合笼成功后处死雌鼠取出受精卵(1cell胚),体内实验观察卵裂率和囊胚生成百分率;体外实验观察体外受精百分率(IVF%)和囊胚率,并观察与精子受精能力相关的完整顶体百分率(AIS%)和顶体酶活性。结果体内实验发现实验组卵裂率(88.3%±1.29%)高于对照组(62.1%±3.48%),P=0.005;体外实验发现实验组IVF%为82.4%±2.89%,高于对照组(62.5%±3.58%),P=0.015;而体内、外实验均发现两组的囊胚生成百分率差异无统计学意义。实验组顶体酶活性为(44.29±5.49)IU,与对照组〔(27.12±4.87)IU〕的差异有统计学意义(P=0.048),两组AIS%差异无统计学意义。结论补肾中药复方能提高小鼠精子的受精能力,其作用机制有可能通过调节顶体酶活性来影响小鼠精子的受精能力。
- 蒋小辉张伦梁鑫胡翔陆华
- 关键词：补肾中药复方顶体酶活性
- 激活素A、抑制素A对小鼠未成熟卵母细胞体外成熟培养的影响被引量：2
- 2012年
- 目的探讨激活素A(activin A,ACTA)、抑制素A(inhibin A,INHA)对小鼠未成熟卵母细胞体外成熟(in vitro maturation,IVM)及早期胚胎发育的影响。方法①分别将ACTA、INHA分3个浓度水平(50ng/mL、100ng/mL、200ng/mL)进行卵母细胞体外成熟培养,寻找ACTA、INHA最佳的卵母细胞体外成熟培养浓度;②比较ACTA、INHA、ACTA+INHA与对照组对卵母细胞体外成熟的影响;③比较对照组与ACTA组、INHA组和ACTA+INHA组对小鼠卵母细胞受精率及囊胚形成率的影响。结果不同浓度组之间相较,无论是ACTA还是INHA,100ng/mL和200ng/mL组的卵母细胞成熟率均比50ng/mL组高(P<0.05);100ng/mL、200ng/mL浓度间差异无统计学意义。ACTA组(100ng/mL)、INHA组(100ng/mL)和ACTA(100ng/mL)+INHA(100ng/mL)组的卵母细胞成熟率、成熟卵母细胞受精率、囊胚形成率均高于对照组(P<0.05),但各实验组间差异无统计学意义(P>0.05)。结论 ACTA和INHA均对卵母细胞体外成熟、受精及胚胎发育潜能具有明显的促进作用。卵母细胞体外成熟培养的添加浓度以100ng/mL为宜。
- 张伦梁鑫蒋小辉
- 关键词：激活素A抑制素A小鼠
- 近日节律基因Clock对雄性小鼠生殖功能的影响被引量：5
- 2007年
- 目的通过干扰小鼠睾丸节律基因Clock的表达,研究Clock对雄性小鼠生殖能力的影响。方法通过RNA干扰技术干扰雄性小鼠睾丸节律基因Clock的表达,以Western blot检测干扰效果,研究干扰Clock表达后对小鼠体内胎仔数和精子数量、精子活力、体外受精率的影响。结果Clock干扰质粒使小鼠睾丸Clock蛋白的表达明显下调。在体内实验不但影响了雄性小鼠的胎仔数,而且其相对应的精子体外受精能力也明显下降。结论节律基因Clock与雄性小鼠的生殖功能有密切的关系。
- 蒋小辉叶珊汪宇辉刘延友江舟张路王正荣
- 关键词：时间生物学顶体受精能力
- 完整顶体精子注入卵细胞后对胚胎发育的影响
- 2011年
- 分别注射1、3、5个顶体完整的人精子于金黄地鼠卵中,对照组同时注射数量相等的无顶体精子,观察卵活化、受精及后期发育情况。结果发现随着注入精子数量的增加,卵发育的异常率显著增加,而注射无顶体精子组,无论注射精子数量为多少,均无异常发生。此外,注射多个精子于金黄地鼠卵中时,多原核(PN)形成率顶体完整组明显低于无顶体组(P<0.01)。实验表明完整顶体的精子所含顶体酶等对卵及后期胚胎发育可能存在一定的影响,行卵胞浆内精子显微注射(ICSI)时,推测注射无顶体精子更合理,应能增加该技术的有效性。
- 梁鑫单旭东蒋小辉漆著孟衍建
- 关键词：精子顶体酶卵胞浆内单精子注射术
