聂金峰
- 作品数:2 被引量:8H指数:2
- 供职机构:华侨大学化工学院工业生物技术福建省高等学校重点实验室更多>>
- 发文基金:国家自然科学基金国家高技术研究发展计划福建省自然科学基金更多>>
- 相关领域:生物学轻工技术与工程化学工程更多>>
- 克雷伯杆菌1,3-丙二醇氧化还原酶的分离纯化及其酶学性质被引量:5
- 2009年
- 在有氧条件下,利用DEAE Sepharose Fast Flow弱阴离子离子交换层析和Blue Sepharose CL-6B亲和层析,同时分离并提纯克雷伯杆菌胞内的1,3-丙二醇氧化还原酶和甘油脱氢酶.研究表明,1,3-丙二醇氧化还原酶的纯化倍数为35.86倍,回收率为5.17%,该酶最适表观反应温度为57℃,最适反应pH值为9.5.在30℃及pH-8.0~10.0时,该酶具有良好的稳定性.在45℃和pH-9.5条件下,该酶以1,3-丙二醇和NAD^+为底物,其米氏常数K。分别为15.8,0.2mmol·L_。.1,3一丙二醇氧化还原酶对生理反应底物3-羟基丙醛活性最大,对其他醇类也有氧化能力.Mn^2+对酶有显著激活作用,巯基保护剂能明显提高酶的活力.
- 陈宏文聂金峰方柏山陈国华(英文审校)
- 关键词:1,3-丙二醇氧化还原酶克雷伯杆菌甘油脱氢酶酶学性质纯化
- 克雷伯杆菌甘油脱氢酶和1,3-丙二醇氧化还原酶的动力学机制被引量:3
- 2010年
- 本研究主要对克雷伯杆菌甘油转化1,3-丙二醇代谢途径中的2个关键酶甘油脱氢酶(GDH)、1,3-丙二醇氧化还原酶(PDOR)反应机制和动力学进行了研究。首先,通过初速度和产物抑制动力学研究确定了GDH、PDOR双底物酶促反应机制为有序BiBi机制,明确了由反应物消耗到产物生成之间的历程。其次,建立了GDH、PDOR双底物酶促反应动力学模型,由动力学模型可知,在偶合反应中,如果GDH和PDOR酶量相同,GDH氧化反应成为限速反应,而辅酶I将主要以氧化型NAD+形式存在。动力学信息为酶法合成1,3-丙二醇和代谢工程研究提供理论指导。
- 陈宏文聂金峰陈国方柏山
- 关键词:甘油脱氢酶动力学模型