聂盼
- 作品数:5 被引量:10H指数:2
- 供职机构:西南大学生命科学学院更多>>
- 发文基金:国家自然科学基金重庆市自然科学基金更多>>
- 相关领域:医药卫生生物学更多>>
- 小胶质细胞体外吞噬模型的建立及相关炎症因子的研究被引量:4
- 2011年
- 目的:建立以细胞凋亡信号-磷脂酰丝氨酸(PS)介导的小胶质细胞体外吞噬模型,研究小胶质细胞发挥吞噬功能时炎症因子的表达变化。方法:用N-乙基马来酰胺(NEM)预处理红细胞,随后整合氧化PS,制备含氧化PS信号的红细胞凋亡模型,并测定小胶质细胞对整合氧化PS信号红细胞吞噬率的变化。同时,real-time PCR检测小胶质细胞中炎症因子白细胞介素1β(IL-1β)和肿瘤坏死因子(TNF-α)的表达情况,研究小胶质细胞吞噬功能与炎症功能之间的关系。结果:小胶质细胞对整合氧化PS红细胞的吞噬率显著高于对照组(P<0.01),同时炎症因子IL-1β和TNF-α的mRNA表达水平明显减少。结论:成功制备小胶质细胞体外吞噬凋亡细胞模型,小胶质细胞的吞噬作用可能是自身炎症因子IL-1β和TNF-α在转录水平上降低的诱因。
- 聂盼刘勇杨学森肖明春刘堰
- 关键词:小神经胶质细胞细胞因子类
- 人白细胞介素-2突变体在大肠杆菌中的克隆表达与鉴定被引量:4
- 2009年
- 根据GenBank报道的人白细胞介素-2(hIL-2)基因分析设计并合成引物,以本室构建的pPIC9K/IL-2突变体(编码125位半胱氨酸→丙氨酸、18位亮氨酸→蛋氨酸、19位亮氨酸→丝氨酸)为模板,PCR扩增出突变型人白细胞介素-2基因.用EcoRI和BamHⅠ对目的基因进行双酶切后,插入大肠杆菌表达载体pBV220,转化宿主菌JM109,经菌落PCR筛选阳性重组子、酶切鉴定,DNA序列分析证实,重组质粒pBV220/IL-2含有突变型人IL-2编码序列及正确的开放阅读框.经42℃热诱导表达,SDS-PAGE电泳显示,诱导表达碎菌后的沉淀中有分子质量大小约为15kD的外源蛋白产生,经Western印迹证明为rhIL-2.成功建立了突变型人白细胞介素-2(rhIL-2)基因的大肠杆菌表达系统,为rhIL-2的生产及临床应用奠定基础.
- 宋小双聂盼马永鹏刘堰
- 关键词:大肠杆菌表达系统克隆
- 食血蝙蝠唾液纤溶酶原激活剂在毕赤酵母中的表达方法
- 一种食血蝙蝠唾液纤溶酶原激活剂在毕赤酵母中的表达方法,通过在体外人工合成吸血蝙蝠唾液纤溶酶原激活剂(Bat-PA)的全长基因,再将其克隆到表达载体pPIC9K上,然后通过电穿孔的方法将线性化的重组质粒转化进入酵母细胞,进...
- 刘堰苏畅石小花宋小双聂盼肖明春
- 文献传递
- MFG-E8在小胶质细胞生理功能中的作用研究
- 小胶质细胞作为脑内常驻的免疫细胞,在中枢神经系统免疫防御病原体感染过程中扮演着至关重要的作用。当接触到内源性信号(如神经元功能紊乱/死亡、异常蛋白的聚集或免疫细胞的相互作用)或是外源性刺激信号(如感染)时,小胶质细胞可迅...
- 聂盼
- 关键词:小胶质细胞炎症反应磷脂酰丝氨酸
- 乳脂球上皮生长因子-8在大鼠神经层视网膜小胶质细胞中的表达
- 2011年
- 背景神经层视网膜小胶质细胞在视网膜胚胎后期发育过程中起“清道夫”的作用,可清除凋亡细胞。乳脂球上皮生长因子18(MFG—E8)能特异性地与凋亡细胞表面的磷酯酰丝氨酸相结合,增强巨噬细胞对凋亡细胞的吞噬作用。目的观察MFG—E8及相关细胞因子在正常大鼠神经层视网膜胚胎后期发育过程中的表达。方法取清洁级鼠龄为0、3、7、14、30、45d的正常皇家外科学院(RCS)大鼠各5只。免疫荧光双标染色标记MFG—E8和小胶质细胞标志物CD11b,荧光实时定量聚合酶链反应(real—time PCR)检测正常大鼠各组视网膜中MFG—E8、整合素135、CD11b、白细胞介素-6(IL-6)mRNA的表达变化。结果MFG—E8免疫阳性细胞分布于视网膜内层,主要为视网膜节细胞层和外丛状层,与CD11b染色部位相同。Real—time PCR检测发现,在出生后即可检测到MFG-E8、整合素β5、CD11b及IL-6 mRNA的表达,其表达量在出生后早期较低,然后逐渐增加,鼠龄14d组的mRNA表达最强烈,然后逐渐下降。鼠龄14d组的各因子mRNA表达水平明显高于其他鼠龄组,差异均有统计学意义(P〈0.01)。结论MFG—E8特异地表达于正常RCS大鼠神经层的视网膜小胶质细胞,表达量出生后呈先升高后降低,14d为高峰的规律。
- 肖明春刘勇聂盼刘堰
- 关键词:视网膜小胶质细胞CD11B免疫荧光染色实时定量聚合酶链反应