耿海峰
- 作品数：6 被引量：34H指数：3
- 供职机构：上海交通大学生命科学技术学院更多>>
- 发文基金：国家科技重大专项上海市科技兴农重点攻关项目更多>>
- 相关领域：生物学轻工技术与工程化学工程更多>>
- 荧光假单胞菌M18 rpoD克隆及其对抗生素合成的影响被引量：29
- 2003年
- 荧光假单胞菌M1 8对多种植物病原真菌具有显著的抑制作用。荧光假单胞菌(Pseuclomonesfluo rescens)M1 8能同时合成吩嗪 1 羧酸 (PCA)和藤黄绿菌素 (Plt)两种抗生素。从M1 8的基因组中克隆了rpoD基因 ,其相应的氨基酸序列与荧光假单胞菌CHAO中RpoD蛋白的氨基酸序列完全相同。利用基因重组技术和大肠杆菌 荧光假单胞菌穿梭质粒pME60 32 ,将rpoD置于强启动子Ptac的控制下 ,导入M1 8菌株。发现经重组质粒转化的M1 8,与对照相比 ,培养基中PCA和Plt开始累积的时间分别提前 4h和 8h ,积累量提高 1倍和 6倍。
- 朱栋华徐汪节耿海峰张雪洪许煜泉
- 关键词：荧光假单胞菌克隆吩嗪-1-羧酸藤黄绿菌素
- 随机诱变M18菌株和染色体上rsmA基因失活及其对抗生素生物合成的影响
- 通过有机提取,硅胶柱层析及HPLC制备柱层析等方法,从荧光假单胞菌M18的发酵液中分离纯化到一种黄色物质,经过紫外色谱、质谱、和核磁共振图谱分析发现它为抗生素藤黄绿菌素.并进一步得到Plt的浓度与峰面积的线性回归方程y=...
- 耿海峰
- 关键词：荧光假单胞菌M18RSMA突变
- 文献传递
- 诱变筛选荧光假单胞菌M18高产吩嗪-1-羧酸(PCA)菌株及发酵条件研究被引量：3
- 2003年
- 研究了亚硝基胍 (NTG)的诱变剂量、处理时间以及氯化钠浓度对野生型荧光假单胞菌M 18存活率的影响 ,NTG的诱变剂量 2 5～ 2 0 0mg/L ,处理时间 10～ 30min范围内 ,随着诱变剂剂量增加和时间的延长 ,M 18的存活率不断下降。NTG的作用剂量 2 5mg/L ,处理时间 10min时 ,细菌存活率为 5 5 %左右。利用细菌存活率为 5 5 %时的诱变条件 ,经生物测定 ,初筛获得 2 0株抑菌效果明显的诱变株。经摇瓶发酵复筛 ,从这 2 0株诱变株中 ,获得PCA高产诱变株M 18N0 7。并对此菌株发酵条件进行调整 ,较理想的培养条件为 :蛋白胨 18g/L ,葡萄糖 16 g/L ,氯化钠 1g/L ,硝酸钾10 g/L。小瓶培养时间 17h ,大瓶 5 %接种量 ,2 8℃培养 5 4h。
- 耿海峰陈峰许煜泉
- 关键词：荧光假单胞菌吩嗪-1-羧酸发酵条件诱变
- 假单胞菌M18rsmA^-突变株的构建及其对Plt和PCA合成的区别性调控作用被引量：10
- 2004年
- 假单胞菌 (Pseudomonassp .)M18是促进植物生长的根际细菌 ,能产生吩嗪 1 羧酸 (PCA)和藤黄绿菌素 (Plt)两种不同的抗生素抑制植物病原菌 ,保护植物免受病害。运用PCR方法 ,从M18基因组中 ,扩增出rsmA基因部分片段 ,并以该片段为探针 ,从M18的基因组柯斯文库中筛出阳性克隆 ,切取带有rsmA基因及两侧序列的 1 5kb片段 ,中间插入编码Kmr 的DNA片段 ,获得rsmA- 体外突变体。运用同源重组剔除技术 ,构建了M18菌株的rsmA突变株M18R- 。突变株M18R- 生物合成Plt的能力比野生型M18提高 4倍 ,但是 ,PCA产量仅为野生型的 2 0 %。研究结果表明 ,全局性调控基因rsmA可能通过不同的机制区别性地影响Plt和PCA的生物合成。
- 王素莲耿海峰孙雷张雪洪许煜泉
- 关键词：假单胞菌M18RSMA吩嗪-1-羧酸藤黄绿菌素突变株PLT
- 构建荧光假单胞菌诱变株M181的突变菌株M18ΔR的方法
- 一种构建荧光假单胞菌诱变株M181的突变菌株M18ΔR的方法，属于农业基因技术领域。具体步骤：(1)引物及聚合酶链PCR反应：根据E.coli，P.aeruginosa和E.carotovora中csrA基因的保守序列，...
- 许煜泉王素莲耿海峰
- 文献传递
- 诱变筛选荧光假单胞菌M18的高产PCA菌株
- 研究了NTG的诱变剂量、处理时间以及氯化钠浓度对野生型荧光假单胞菌M18致死率的影响,NTG的诱变剂量25-200μg/ml,处理时间10至30分钟范围内,随着诱变剂剂量增加和时间的延长,微生物的存活率不断下降.NTG的...
- 耿海峰许煜泉刘建涛
- 关键词：荧光假单胞菌M18NTG致死率
- 文献传递
