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小鼠TRAF6特异性shRNA慢病毒质粒的构建及活性: 2011年; 目的:构建小鼠TRAF6基因特异性shRNA慢病毒质粒。方法:设计、合成小鼠TRAF6基因特异性shRNA核苷酸,将其链接入pENTR/U6载体,基因测序;通过LR克隆酶将pENTR/U6中的TRAF6特异性shRNA核苷酸插入CS-RfA-EG慢病毒载体,KpnⅠ限制酶切分析;通过慢病毒将TRAF6基因特异性shRNA慢病毒质粒导入MEF13细胞中,FACS分析质粒导入率,同时利用Western blot技术检测MEF13细胞中TRAF6的表达以及磷酸化IκBα的表达。以LacZ基因特异性shRNA慢病毒质粒为对照。结果:构建的小鼠TRAF6基因特异性shRNA慢病毒质粒与设计相符;MEF13细胞中慢病毒质粒的导入率为95%以上;与对照组比较,TRAF6基因特异性shRNA可长期、完全抑制MEF13细胞中TRAF6的表达及TRAF6介导的IκBα的磷酸化。结论:成功构建小鼠TRAF6基因特异性shRNA慢病毒质粒。; 谢琪璇罗峰秋山泰身井上纯一郎秦俊文; 关键词：TRAF6 SHRNA RNAI

小鼠早期胚胎的全胚原位杂交技术被引量：2: 2011年; 目的:探索一种适合于早期胚胎基因表达型检测的全胚原位杂交技术。方法:收集小鼠囊胚、固定;制备VASP、IL1R2基因特异性地高辛标记的cRNA探针;对囊胚进行杂交前处理、全胚原位杂交、抗体处理、显色以及显色后处理与镜检。结果:VASP、IL1R2特异性表达在囊胚的内细胞团细胞和滋养层细胞中。结论:小鼠早期胚胎全胚原位杂交技术适用于早期胚胎基因时空表达型的检测。; 肖銮娟谢琪璇高桥祐司秋山泰身董少男黄卉卉罗峰叶绍恩张春雪秦俊文; 关键词：早期胚胎

骨髓间充质干细胞对免疫损伤卵巢的修复作用被引量：9: 2011年; 目的探讨骨髓间充质干细胞移植对免疫损伤卵巢的修复作用。方法 6～8周龄的野生型健康ICR雌性小鼠随机分为3组,每组各12只。A组不作任何处理,B、C组利用猪卵巢蛋白主动免疫建立免疫损伤卵巢模型。而后C组腹腔移植来自GFP转基因小鼠的骨髓MSCs细胞,A、B组各注射等体积的PBS。MSCs移植后按既定时间处死小鼠,利用PCR检测卵巢中GFP基因以判断MSCs是否到达卵巢;通过对卵巢组织切片HE染色以及细胞凋亡分析来检测MSCs是否对免疫损伤卵巢有修复作用及其机制。结果 PCR结果表明MSCs经腹腔移植可直接到达免疫损伤卵巢;MSCs移植可促进免疫损伤卵巢组织的修复;相应地,移植组颗粒细胞的凋亡比非移植组明显减少。结论腹腔移植MSCs可促进免疫损伤卵巢的修复,其机制可能与减少颗粒细胞凋亡有关。; 李威娜谢琪璇秦俊文黄伟叶绍恩罗峰张春雪肖銮娟; 关键词：骨髓间充质干细胞卵巢免疫损伤

调节卵子发育成熟的信号转导通路被引量：6: 2011年; 卵子是哺乳动物体内最大的一种细胞,承载着繁衍后代的使命,而卵子的发育成熟是其完成生殖过程的先决条件。对卵泡的生长、发育和卵子成熟调控机制的研究一直是发育生物学的研究热点之一。; 罗峰谢琪璇秋山泰身秦俊文; 关键词：信号通路卵子发生

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罗峰