罗哲
- 作品数：6 被引量：8H指数：2
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- 高渗应激早期伤寒沙门菌RpoE调节因子对基因表达的影响被引量：2
- 2011年
- 伤寒沙门菌是一种革兰阴性肠道致病菌,常通过污染的食物进入体内,可造成严重全身性感染[1-2].作为食源性致病菌,必须遭遇人体消化道的高渗环境,但目前对其克服高渗应激的具体机制尚不清楚.RpoE调节因子由rpoE基因编码,是肠杆菌科细菌中一个重要的σ因子,在大肠杆菌响应高渗应激时发挥着重要的作用[3],在伤寒沙门菌中也应当十分重要.
- 杜鸿倪斌王敏罗哲谢新民李安平黄新祥
- 关键词：伤寒沙门菌基因表达应激食源性致病菌
- Hfq对伤寒沙门菌高渗应激早期基因表达的调节被引量：2
- 2010年
- 目的:探查伤寒沙门菌hfq基因在高渗应激早期对其他基因表达的影响。方法:用自杀质粒介导的同源重组方法制备伤寒沙门菌hfq基因缺陷变异株;利用伤寒沙门菌全基因组芯片技术,比较伤寒沙门菌野生株和hfq基因缺陷变异株在高渗应激早期的基因表达谱差异,并选择部分表达差异基因进行实时定量PCR验证。结果:伤寒沙门菌hfq基因缺陷变异株制备成功;基因表达谱比较分析结果表明伤寒沙门菌hfq基因缺陷变异株在高渗应激早期有62个基因表达上调,有32个基因表达下调。实时定量PCR结果与芯片分析一致。结论:Hfq作为一个调节因子在伤寒沙门菌高渗应激早期对基因表达起重要调节作用。
- 谢新民李安平杜鸿茅凌翔罗哲王敏黄新祥
- 关键词：伤寒沙门菌HFQ基因芯片分析
- Fis对伤寒沙门菌基因表达的系统调节作用
- 2010年
- 目的:探讨伤寒沙门菌调节因子fis对基因表达的系统调节作用。方法:用自杀质粒介导的同源重组方法制备伤寒沙门菌fis基因缺陷变异株,用脉冲场凝胶电泳分析fis缺陷变异株的基因组结构。利用伤寒沙门菌全基因组DNA芯片分析技术,比较伤寒沙门菌野生株和fis基因缺陷变异株的基因表达谱差异。用重组载体pBADfis回补fis缺陷变异株,选择部分差异表达基因进行qRT-PCR验证,用半固体平板培养观察野生株、fis缺陷变异株和回补株的动力。结果:fis基因缺陷变异株含有二相鞭毛素编码基因的线性质粒缺失,且动力消失;基因表达谱比较分析结果表明,伤寒沙门菌fis基因缺陷变异株在对数生长期94个基因出现表达差异;qRT-PCR分析所选基因表达的结果与芯片分析结果相符;fis缺陷变异株在回补fis基因后,动力及差异表达基因都获得明显恢复。结论:Fis在伤寒沙门菌中对动力、侵袭及多种代谢相关基因的表达发挥重要调节作用。
- 李安平谢新民茅凌翔杜鸿王敏罗哲黄新祥
- 关键词：伤寒沙门菌FIS基因芯片脉冲场凝胶电泳基因表达调节
- SsrB对伤寒沙门菌氧应激早期基因表达的调节
- 2011年
- 目的:研究伤寒沙门菌ssrB基因在氧应激早期对其他基因表达的调节。方法:通过同源重组的方法利用自杀质粒制备伤寒沙门菌ssrB基因缺陷变异株;采用伤寒沙门菌全基因组芯片比较野生株和ssrB基因缺陷变异株在氧应激早期的基因表达差异,并对其中部分表达差异基因进行实时定量PCR验证;利用HeLa细胞进行细菌侵袭实验,研究ssrB基因对伤寒沙门菌侵袭能力的影响。结果:成功制备伤寒沙门菌ssrB基因缺陷变异株;基因芯片结果分析显示,在氧应激早期,与野生株相比,伤寒沙门菌ssrB基因缺陷变异株有68个基因表达下调,有20个基因表达上调,其中与侵袭相关的基因表达下调。实时定量PCR与芯片结果一致。ssrB基因缺陷变异株侵袭上皮细胞的能力仅为野生株的34.6%。结论:SsrB在伤寒沙门菌氧应激早期对基因表达起重要调节作用,并且能够增强伤寒沙门菌侵袭上皮细胞的能力。
- 王敏罗哲杜鸿孟彦辰王菲倪斌徐顺高黄新祥
- 关键词：伤寒沙门菌氧应激基因芯片
- LuxS/AI-2对伤寒沙门菌基因表达的调节被引量：3
- 2011年
- 目的:探讨伤寒沙门菌luxS基因在葡萄糖存在下对细菌对数生长中期基因表达调控的影响。方法:应用自杀质粒介导的同源重组方法制备伤寒沙门菌luxS基因缺陷变异株;比较野生株与缺陷株的生长情况及动力差异;用哈氏弧菌BB170作为报告菌株检测不同时期野生株与缺陷株的生物发光;利用伤寒沙门菌全基因组芯片技术,比较在葡萄糖存在下伤寒沙门菌野生株和luxS基因缺陷变异株的对数生长中期基因表达谱差异,并选择部分差异表达基因进行实时定量PCR验证。结果:经PCR及序列分析证实,伤寒沙门菌luxS基因缺陷变异株制备成功;在葡萄糖存在下野生株发光均比无葡萄糖时强,在对数生长中期时AI-2产生的荧光最强,而luxS缺陷株不发光;luxS不影响细菌生长但影响细菌的动力;基因表达谱比较分析结果表明,与野生株相比,luxS缺陷株有47个基因表达上调,27个基因表达下调;实时定量PCR结果与芯片分析一致。结论:伤寒沙门菌中luxS基因能参与信号分子AI-2的合成,且LuxS/AI-2在细菌对数生长中期的基因表达调控中发挥重要作用。
- 罗哲王敏杜鸿王菲孟彦辰倪斌徐顺高黄新祥
- 关键词：伤寒沙门菌LUXS生物发光基因芯片
- 伤寒沙门菌调节因子UhpA的功能研究被引量：1
- 2010年
- 目的:探讨伤寒沙门菌调节因子UhpA的功能。方法:用载体pBAD介导回补uhpA至伤寒沙门菌uhpA基因缺陷变异株,用qRT-PCR观察cysM和treB基因表达,用表达载体pET-22b原核表达UhpA蛋白,用凝胶阻滞试验观察UhpA蛋白与cysM和treB启动子区域DNA片段的结合。结果:成功构建pBADuhpA重组质粒,在uhpA缺陷变异株中回补uhpA基因后,cysM和treB的表达明显恢复,但UhpA-H is6蛋白与cysM和treB的启动子区域DNA片段无明显结合。结论:伤寒沙门菌UhpA在高渗应激条件下能促进硫代谢及海藻糖代谢相关基因表达,且可能为间接作用。
- 李君辉罗哲谢新民李安平杜鸿生秀梅黄新祥
- 关键词：伤寒沙门菌基因表达调节
