章如安
- 作品数：5 被引量：166H指数：4
- 供职机构：中国科学院上海生命科学研究院生物化学研究所更多>>
- 相关领域：生物学化学工程轻工技术与工程理学更多>>
- 甲醇酵母Pichia pastoris高水平表达有活性的辣根过氧化物酶被引量：5
- 1999年
- 表达有活性的辣根过氧化物酶（ＨＲＰ） 不仅可以深入揭示ＨＲＰ 结构与功能及其生理作用规律， 而且为ＨＲＰ的广泛需要提供新的来源． 为了在甲醇酵母Ｐ． ｐａｓｔｏｒｉｓ 中成功表达， 将编码ＨＲＰＣ成熟肽的ｃＤＮＡ 构建到ｐＰＩＣ９ 上， 再转化到Ｐ． ｐａｓｔｏｒｉｓ 中， 筛选到了分泌表达非糖基化ＨＲＰ 和高糖基化ＨＲＰ（ 分子质量超过１００ ｋｕ） 两种主要产物的重组细胞株． 优化表达条件， 目标产物在摇瓶发酵液中高效表达， 可达４～６ ｇ／Ｌ． 并且直接从发酵液中可获得具有活性的高糖基化ＨＲＰ， 每毫升发酵液中酶活力约有２ Ｕ， 经初步的纯化ＨＲＰ具有最大吸收峰４０３ ｎｍ ．
- 蒋太交吉鑫松章如安黄艳红吴祥甫袁中一
- 关键词：甲醇酵母基因表达HRT
- 重组人血清白蛋白在Pichia pastoris中分泌表达影响因素的研究被引量：43
- 2000年
- 为获得高产稳产重组人血清白蛋白的Pichiapastoris细胞株用于高密度发酵 ,构建了多种分泌表达载体 ,在Pichiapastoris中作表达 ,研究表达载体构建等因素对表达量的影响。发现采用酿酒酵母α性成熟因子前导肽比人血清白蛋白天然前导肽作为分泌信号肽的表达量要高 10 %左右。而载体整合方式、整合拷贝数、5’非翻译区的改造和甲醇利用表型等对表达量无规律性影响。筛选到的高表达株经高密度发酵 ,细胞湿重达 46 0 g/L ,发酵液上清的人血清白蛋白含量为 1 0 g/L。
- 杨晟黄鹤章如安钱美琴余有浩钱雪明袁中一
- 关键词：重组人血清白蛋白高密度发酵分泌表达
- 停流光谱分析PEG甲苯体系中辣根过氧化物酶与过氧化氢复合物的形成被引量：2
- 2000年
- 比较研究了在 PEG水相和 PEG甲苯有机相中辣根过氧化物酶 (HRP)的 U V- Vis光谱 .研究表明 ,PEG甲苯体系破坏了酶的结构并导致血红素辅基脱落 .利用停流光谱仪对 HRP与过氧化氢复合物的形成进行研究 .结果发现 ,PEG甲苯体系中复合物 的形成比 PEG水溶液中复合物 的形成慢 4倍左右 ,并且在 PEG甲苯体系中 ,复合物 很不稳定 ,导致了酶失活 .
- 蒋太交夏春谷章如安吉鑫松袁中一
- 关键词：HRPPEG光谱分析过氧化氢催化剂
- 在甲醇酵母Pichia pastoris胞内表达有活性的辣根过氧化物酶被引量：10
- 2000年
- 为了开辟在甲醇酵母 Pichia pastoris中表达 HRP的新途径 ,将编码成熟 HRP同功酶 C基因克隆到表达载体 p PIK3.5K中 .p PIK3.5KHRP转化 GS1 1 5后 ,用 PCR筛选阳性 P.pastoris重组株 ,并用甲醇进行诱导 . Western印迹杂交分析表明目标蛋白 (约为 38k D)能被天然 HRP的多克隆抗体所识别 ,因此活性辣根过氧化物酶已在 P.pastoris胞内表达 .筛选菌株中显示了明显的过氧化物酶活性 ,同时诱导过程中血红素和 Ca Cl2
- 蒋太交吉鑫松章如安袁中一
- 关键词：辣根过氧化物酶毕赤酵母基因表达
- 巴斯德毕赤酵母表达体系研究及进展被引量：109
- 2000年
- 章如安杨晟邱荣德袁中一
