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王铭
作品数:
1
被引量:6
H指数:1
供职机构:
中南大学湘雅二医院
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发文基金:
国家自然科学基金
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相关领域:
医药卫生
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合作作者
李军
中南大学湘雅二医院
彭翔
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刘伏友
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中南大学湘雅二医院
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2014
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PI3K/Akt信号调节腹膜间皮细胞上皮-间充质转分化
被引量:6
2014年
目的通过体内外实验探讨P13K/Akt信号对腹膜透析腹膜间皮细胞上皮-间充质转分化(EMT)的调节作用。方法40只12周龄ICR小鼠腹腔置管行腹膜透析,制备腹膜间皮细胞的上皮.间充质EMT小鼠模型,成膜后分为PD模型组和对照组。采用实时定量PCR、Western印迹和组织免疫荧光等方法检测腹膜组织磷酸化丝氨酸/苏氨酸激酶(pAkt)的表达及EMT相关蛋白和mRNA的表达[包括紧密连接蛋白(ZO-1)、波形蛋白(Vimentin)、纤连蛋白(FN)]。体外实验观察转化生长因子(TGF)B1对人腹膜间皮细胞(HPMCs)Akt磷酸化和核转位及ZO-1、Vimentin表达的影响。采用P13K/Akt抑制剂LY294002预处理和负显性Akt(DN-Akt)质粒转染HPMCs,抑制P13K/Akt信号,观察其对TGF-β1诱导的HPMCs细胞ZO-1、Vimentin表达的影响。结果与对照组相比,模型组小鼠第28天壁层腹膜组织明显增厚,上皮细胞标志物ZO-1mRNA和蛋白表达降低,间充质细胞标志物Vimentin和FN的mRNA和蛋白表达升高,Akt磷酸化水平(pAkt)也明显升高(均P〈0.01)。体外实验发现:TGF.B1抑制HPMCs细胞ZO-1表达,增加Vimentin和pAkt表达(均P〈0.01),且呈浓度依赖性;LY294002、DN-Akt处理可抑制pAkt表达,对TGF-β1诱导的HPMCsZO-1mRNA和蛋白下调表达有明显回复作用,并抑制TGF-β1引起的VimentinmRNA和蛋白的高表达(均P〈0.01)。结论P13K/Akt信号参与调节PD腹膜间皮细胞EMT,以P13K/Akt信号为靶点可望为腹膜纤维化的防治提供一种新途径。
彭翔
刘伏友
孙林
肖力
王铭
李军
关键词:
磷脂酰肌醇3-激酶
腹膜间皮细胞
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