王金萍
- 作品数：4 被引量：3H指数：1
- 供职机构：安徽医科大学更多>>
- 发文基金：安徽省自然科学基金安徽省高校省级自然科学研究项目国家自然科学基金更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- 小鼠白介素17基因的的表达、纯化、活性鉴定及抗小鼠白介素17抗体的制备
- 目的：通过基因工程技术获得有活性的重组小鼠白介素17(recombinant mouse Interleukin-17,rmIL-17)蛋白，检测验证rmIL-17的活性及免疫原性。同时用纯化的重组蛋白rmIL-17免疫...
- 王金萍
- 关键词：白介素17活性鉴定单克隆抗体生物学活性酶联免疫吸附实验
- 文献传递
- 小鼠白介素17基因的克隆、表达及其活性鉴定被引量：3
- 2010年
- 目的通过基因工程技术获得有活性的重组小鼠白介素17(rmIL-17)蛋白,为研究IL-17的生物学作用及其作用机制提供基础。方法用RT-PCR技术得到小鼠IL-17编码基因,将其克隆入原核表达载体pET32a,转化至大肠埃希菌(E.coli)BL21株,经异丙基-β-D-硫代半乳糖苷(IPTG)诱导表达,通过亲和层析得到纯化的rmIL-17蛋白,免疫家兔,制备多抗,Westernblot和酶联免疫吸附实验鉴定该蛋白免疫原性;用该蛋白进行体外细胞刺激实验、体内中性粒细胞招募实验鉴定蛋白的生物学活性。结果成功构建了重组质粒pET32a-mIL17并在大肠杆菌中表达。过柱得到纯化的rmIL-17蛋白,Westernblot和酶联免疫吸附实验证实其具有良好的免疫原性;体外细胞刺激实验显示该蛋白可刺激小鼠3T3成纤维细胞产生白介素6(IL-6)且具有量效关系;体内细胞招募实验显示纯化的rmIL-17蛋白具有招募中性粒细胞的作用。结论小鼠IL-17基因在体外成功表达,且表达的重组蛋白具有明显的生物学活性。
- 王金萍王萍吴昊刘淼张玉侠陈伟沈际佳邓松华
- 关键词：白细胞介素17基因表达
- 体内外连续筛选建立人前列腺癌高转移细胞亚系及其生物学特性
- 2009年
- 目的建立人前列腺癌小鼠转移模型,筛选前列腺癌高转移细胞亚系。方法采用DU145细胞悬液原位注射法接种BNX小鼠,建立前列腺癌小鼠COI模型,取肺转移灶体外培养并采用侵袭小室体外筛选高侵袭性细胞,扩增后进行原位注射,如此将肺转移灶癌细胞在小鼠体传代2次,筛选高转移细胞亚系。结果(1)原位细胞悬液注射法接种10只小鼠均成瘤,并都伴有肠系膜、腹股沟淋巴结,其中3只发现肺转移。(2)获得高转移前列腺癌细胞亚系DU145-M3,其侵袭能力强,肿瘤转移相关基因MAPK4和TIPM-2低表达,MMP-2高表达。结论COI法是有效的前列腺癌转移模型制作方法;体内外连续筛选可获得高转移细胞亚系。
- 张玉侠朱秀王金萍
- 关键词：前列腺肿瘤疾病模型
- 小鼠白介素17基因的表达、纯化、活性鉴定及抗小鼠白介素17抗体的制备
- 目的通过基因工程技术获得有活性的重组小鼠白介素17（recombinant mouse Interleukin-17,rmIL-17）蛋白,检测验证rmIL-17的活性及免疫原性。同时用纯化的重组蛋白rmIL-17免疫小...
- 王金萍
- 关键词：生物学活性
- 文献传递
