王轶男
- 作品数：17 被引量：34H指数：4
- 供职机构：延边大学更多>>
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- 相关领域：农业科学生物学医药卫生文学更多>>
- 延边地区牛瑟氏泰勒虫病的分子流行病学调查被引量：11
- 2012年
- 为了解吉林省延边地区牛瑟氏泰勒虫病的流行情况,分别采用血涂片染色镜检法和PCR方法对采自延边地区的206份牛血液样本进行了牛瑟氏泰勒虫病的分子流行病学调查。结果显示,PCR检测的阳性率为62.6%,显著高于血涂片染色镜检法检测的阳性率(17.5%)。采用统计学分析方法对PCR检测的206份血液样本进行了不同地区、不同年龄、不同品种及饲养方式的比较;结果,不同地区之间和不同品种之间瑟氏泰勒虫感染率差异不显著(P>0.05);而不同年龄阶段之间和不同饲养方式之间牛瑟氏泰勒虫感染率差异显著(P<0.05)。结果表明,吉林省延边地区是牛瑟氏泰勒虫病的流行地区。
- 胡诗悦钱年超王轶男贾立军张守发
- 关键词：瑟氏泰勒虫PCR分子流行病学调查
- 解冻稀释液中添加精浆对冻融猪精子品质的影响
- 2022年
- 【目的】探究冷冻前添加热休克蛋白A8(heat shock protein A8,HSPA8)和解冻后添加不同浓度精浆(seminal plasma,SP)对冻融猪精子的影响。【方法】采用手握法采集长白猪精液,添加0.5μg/mL HSPA8到猪精液冷冻保护剂中进行细管分装,投入液氮中保存3周后进行解冻,解冻后添加不同浓度精浆(0、10%、30%和50%),对冻融后长白猪精子的运动能力、质膜完整性、顶体完整性、细胞凋亡、线粒体膜电位、鱼精蛋白缺乏及体外获能水平等进行评估。【结果】与对照组相比(无HSPA8和精浆),添加0.5μg/mL HSPA8处理组(无精浆)的精子直线速度(VSL)、曲线速度(VCL)、平均路径速度(VAP)和前向性运动(STR)均显著提升(P<0.05),精子直线性运动(LIN)和运动的摆动性(WOB)均无显著差异(P>0.05);精子质量参数中活力、质膜完整性和顶体完整性均显著升高(P<0.05),细胞凋亡水平与线粒体膜电位均显著降低(P<0.05);精子鱼精蛋白缺失率显著降低(P<0.05);精子蛋白酪氨酸磷酸化水平显著提高(P<0.05)。之后在解冻液中添加不同浓度的精浆,与添加0.5μg/mL HSPA8处理组(无精浆)相比,精浆添加量达到50%时,精子VSL、VCL、VAP、LIN、STR和WOB均显著提升(P<0.05);精子活力、质膜完整性、顶体完整性和线粒体膜电位均显著提高(P<0.05),细胞凋亡水平显著降低(P<0.05);精子鱼精蛋白缺失率显著降低(P<0.05);精子蛋白酪氨酸磷酸化水平显著提高(P<0.05)。【结论】在冷冻基础液中添加0.5μg/mL HSPA8和解冻稀释液中添加50%精浆联合使用可以有效改善冻融精子质量,将会对猪精液的冷冻保存及商业化生产提供一定的参考。
- 王轶男孔令敏徐海峰张正文李春宇尹伊金一吕艳秋
- 关键词：猪精子冻融
- 牛瑟氏泰勒虫荧光定量PCR方法的建立及应用
- 牛瑟氏泰勒虫（Theileria sergenti）是经过蜱传播的泰勒科（Theileriidae）、泰勒属（Theileria）的血液原虫。临床上感染瑟氏泰勒虫的牛会出现慢性贫血和高热、黄疸，甚至死亡。当前，牛瑟氏泰勒...
- 王轶男
- 关键词：荧光定量PCR
- 文献传递
- LDL对玻璃化冷冻解冻培养MⅡ期猪卵母细胞线粒体膜电位和透明带泛素化水平的影响被引量：4
- 2017年
- 本试验旨在探究添加低密度脂蛋白(low density lipoprotein,LDL)对玻璃化冷冻解冻后MⅡ期猪卵母细胞发育率、线粒体膜电位及透明带泛素化水平的影响。采用线粒体膜电位特异性探针JC-1检测各处理组线粒体膜电位,并采用SDS-PAGE及Western blotting方法分析不同处理组MⅡ期猪卵母细胞透明带蛋白泛素化水平。结果显示,玻璃化冷冻法处理中,10mg/mL LDL处理组MⅡ期卵母细胞正常率和成熟率(71.92%和69.86%)显著高于对照组(58.26%和54.55%)(P<0.05),最接近未冷冻组。10mg/mL LDL处理组MⅡ期卵母细胞线粒体膜电位显著高于对照组、1和20mg/mL LDL组(P<0.05)。免疫印迹结果显示,未冷冻组和LDL处理组MⅡ期卵母细胞ZP1、ZP2及ZP3蛋白分别在61、80、106ku发生不同程度的泛素化标记;10 mg/mL LDL处理组ZPs(ZP1、ZP2、ZP3)蛋白泛素化水平显著高于1和20 mg/mL LDL组(P<0.05),但显著低于非冷冻组(P<0.05)。结果表明LDL可改善玻璃化冷冻解冻培养后MⅡ期猪卵母细胞成熟率、线粒体膜电位及透明带泛素化水平。
- 姜泽玄彪李作臣王轶男金一
- 关键词：卵母细胞玻璃化冷冻线粒体膜电位
- 牛瑟氏泰勒虫与牛卵形巴贝斯虫多重PCR检测方法的建立被引量：3
- 2013年
- 根据GenBank上登录的牛瑟氏泰勒虫内转录间隔子基因(ITS基因)和牛卵形巴贝斯虫CCTη基因序列,设计合成了2对特异性引物。通过对反应条件进行优化,建立了同时检测牛瑟氏泰勒虫和牛卵形巴贝斯虫的多重PCR方法。结果显示,用该多重PCR方法可同时扩增出2条与试验设计相符的1 020bp(牛瑟氏泰勒虫)和537bp(牛卵形巴贝斯虫)的特异性条带,对牛瑟氏泰勒虫和牛卵形巴贝斯虫的最低检出限分别为10pg/μL和1pg/μL。用该方法对采自吉林省珲春市的23份临床样本进行检测,结果牛瑟氏泰勒虫的阳性率为69%,牛卵形巴贝斯虫的阳性率为52%,混合感染率为52%。表明,建立的多重PCR方法可用于临床诊断。
- 王轶男钱年超黄国明胡诗悦薛书江贾立军张守发
- 关键词：牛瑟氏泰勒虫多重PCR
- 荧光定量PCR检测牛瑟氏泰勒虫方法的建立
- 2021年
- 本试验旨在建立快速诊断牛瑟氏泰勒虫的荧光定量PCR检测方法。以常规PCR方法扩增牛瑟氏泰勒虫P33基因,将其克隆至载体pMD-18T,然后进行质粒标准品的构建,以此为模板建立牛瑟氏泰勒虫P33基因TaqMan荧光定量PCR和SYBR Green荧光定量PCR检测方法。结果显示:2种方法均能检测到2.26~2.26×10^(8)copies/μL范围,特异性试验中与其他病原体均无特异性扩增曲线,批内和批间变异系数都小于4%。鉴于2种方法均具有较好的敏感性、特异性和重复性,适用于牛瑟氏泰勒虫P33基因的临床实验室鉴别。
- 王轶男胡诗悦陈洪涛金春梅金一于龙政
- 关键词：牛瑟氏泰勒虫荧光定量PCR
- 乳酸片球菌在动物生产中的研究进展被引量：1
- 2021年
- 近些年来,抗生素在养殖业中的滥用造成的副作用日趋严重,饲料中禁止添加抗生素日趋重要。2020年农业农村部正式实施第194号公告,标志着药物饲料添加剂将有序退出饲料行业,有效推动我国养殖饲料的发展转型,因此微生物饲料添加剂在饲料替代和减少抗生素使用中的重要性进一步凸显[1]。伴随微生物领域研究的快速发展,大量试验研究表明,乳酸菌制剂可有效抑制肠道有害细菌的生长繁殖[2-3],提高机体免疫功能,改善动物生长性能。
- 王轶男胡诗悦于龙政
- 关键词：微生物饲料添加剂药物饲料添加剂乳酸片球菌有害细菌乳酸菌制剂
- 吉林省延边地区羊泰勒虫病的分子流行病学调查
- 为了解羊泰勒虫病在吉林省延边地区的流行情况,本试验采用PCR方法和血液涂片染色镜检法对吉林省延边地区延吉市、龙井市、和龙市、珲春市等4个地区采集的93份羊血液样本进行检测,并对不同地区、不同饲养方式、不同地理条件以及不同...
- 王轶男胡诗悦钱年超薛书江贾立军张守发
- 关键词：羊泰勒虫病PCR分子流行病学调查
- 吉林省延边地区羊泰勒虫病的分子流行病学调查被引量：4
- 2013年
- 为了解羊泰勒虫病在吉林省延边地区的流行情况,本研究采用PCR方法和血液涂片染色镜检法对吉林省延边地区延吉市、龙井市、和龙市、珲春市4个地区采集的93份羊血液样品进行检测,并对不同地区、饲养方式、地理条件以及不同年龄间羊泰勒虫病的感染情况进行比较分析。结果显示,PCR方法检测样品的阳性率为31.18%,显著高于血涂片染色镜检法19.35%的阳性率。经统计学分析,不同地区和不同品种,羊泰勒虫感染率差异不显著(p>0.05);而不同年龄阶段和不同饲养方式,羊泰勒虫的感染率差异显著(p<0.05)。调查结果表明,吉林省延边地区是羊泰勒虫病的流行地区。
- 王轶男胡诗悦钱年超薛书江贾立军张守发
- 关键词：羊泰勒虫病PCR分子流行病学调查
- 牛瑟氏泰勒虫ITS基因PCR诊断方法的建立被引量：5
- 2012年
- 本试验根据GenBank上登录的牛瑟氏泰勒虫ITS基因序列(AY661522.1),应用Primer Premier 5.0和Oligo 6.31软件设计合成1对特异性引物,以牛瑟氏泰勒虫DNA为模板,建立了牛瑟氏泰勒虫ITS基因PCR诊断方法。该方法扩增片段大小为1020 bp,与参考序列的同源性为98%;建立的PCR方法与猪附红细胞体、犬新孢子虫和弓形虫均无交叉反应,最低DNA检出量为1.5 pg/μL;通过对60份临床样品的检测,并与血涂片方法进行比较,结果显示PCR方法具有特异、敏感等特点,适用于牛瑟氏泰勒虫的检测。
- 王轶男贾立军薛书江张影钱年超张守发
- 关键词：牛瑟氏泰勒虫ITS基因PCR
