王宇
- 作品数：12 被引量：27H指数：4
- 供职机构：长春生物制品研究所有限责任公司更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学经济管理更多>>
- 氢氧化铝佐剂配制工艺的优化被引量：7
- 2010年
- 目的优化氢氧化铝[A(lOH)3]佐剂配制工艺。方法对A(lOH)3配制工艺中的反应温度、氢氧化钠(NaOH)溶液的滴入速度、气体流量和反应终点pH值进行优化,观察配制的A(lOH)3溶液的状态。分别以原工艺和优化工艺配制的A(lOH)3溶液为佐剂制备重组乙型肝炎疫苗(CHO细胞),比较二者的外观和效力。结果优化的A(lOH)3配制工艺为:反应温度70～72℃;NaOH溶液滴入速度185ml/min,10个点滴入;气体流量0.2bar;反应终点pH值5.80±0.05,以该工艺配制的A(lOH)3胶体颗粒大小均匀,呈淡淡的蓝白色,不发生沉淀。以优化工艺配制的A(lOH)3溶液为佐剂制备的重组乙型肝炎疫苗(CHO细胞)无沉淀,为均匀的胶体,成品放置3年外观无显著变化;疫苗效力略有提高,但不显著。结论优化了A(lOH)3溶液佐剂的配制工艺。
- 李德娟何巍张睿付琳娜赵丽剑王宇金立杰
- 关键词：氢氧化铝乙型肝炎疫苗佐剂
- 纯化乙型肝炎病毒表面抗原新层析工艺的建立被引量：4
- 2006年
- 目的建立提高乙型肝炎病毒表面抗原(HBsAg)纯度和收率的新工艺。方法采用微滤法、疏水层析、“穿透式”阴离子交换层析、硫酸纤维素亲和层析和凝胶过滤层析进行HBsAg的纯化。结果采用新建立的工艺,HBsAg收率在50%以上,纯度大于95%,各项检定结果均符合《中国药典》三部(2005版)要求。结论新工艺提高了HBsAg的纯度和收率,适用于规模化生产。
- 李建平杨屹王宇李德娟陈万革
- 关键词：乙型肝炎病毒表面抗原纯化层析
- 国产与进口DMEM培养基培养CHO-C28细胞效果比较被引量：6
- 2007年
- 目的比较国产与进口DMEM培养基培养CHO-C28细胞的效果。方法采用国产DMEM培养基与进口DMEM培养基培养同批CHO-C28细胞,收集培养上清,检测HBsAg表达水平。采用相同条件纯化培养上清中的HBsAg,比较二者的层析图谱及纯化抗原的电泳图谱。并用其抗原制备疫苗,进行异常毒性和效力试验。结果培养上清中HBsAg表达水平,国产培养基略好于进口培养基,二者纯化图谱和抗原电泳图谱一致。两种培养基制备的疫苗异常毒性试验均合格,小鼠效力试验结果差异无显著意义。结论国产培养基在细胞培养中安全、有效,达到进口培养基水平,可用于规模化生产。
- 李建平周长军王宇田静刘成赵小琳李宏涛
- 关键词：DMEMCHO细胞乙型肝炎疫苗
- 纤维连接蛋白(FN)对CHO-C28细胞生长的影响被引量：6
- 2009年
- 纤维连接蛋白(FN)最重要的功能是促进细胞的粘连、生长,因而对传代细胞的贴壁、增殖具有重要意义。试验通过观察不同含有FN的培养液对CHO-C28细胞的贴壁、集落形成、细胞增长速度的不同作用,比较FN对CHO-C28细胞的影响,同时对比进口与国产FN之间的区别。证明FN对克隆形成及细胞增殖有明显的促进作用,进口FN组和国产FN组无明显区别。
- 王宇吴学军谷丽娟于漫伦赵小琳郝富勇付琳娜王德亮胡太梅
- 关键词：纤维连接蛋白CHO-C28细胞克隆增殖
- 疫苗研发的技术创新模式质量控制
- 2014年
- 目的:为疫苗生产企业技术创新提高了参考。方法:通过比较3种技术创新模式,分别是自主创新、模仿创新和合作创新的优缺点,提出了疫苗在生产过程中需采取的技术创新模式。结果:三种疫苗创新生产模式各具优缺点。结论:总结出采用"自主创新为主导,合作创新求发展"的技术创新模式,并建议各企业要依据自身的发展情况进行不断调整。
- 王宇胡太梅马志刚
- 关键词：技术创新
- 狂犬病病毒抗原ELISA检测方法的建立及其应用被引量：2
- 2009年
- 目的建立狂犬病病毒抗原ELISA检测方法,并进行初步应用。方法采用狂犬病病毒CTN-1V纯化抗原免疫家兔,制备多克隆抗体,作为酶标抗体,马抗狂犬血清纯化抗体作为包被抗体,建立双抗体夹心ELISA法。对该方法进行验证,检测狂犬病病毒原液毒力和疫苗效力,并与小鼠(NIH)法检测结果进行对比。结果双抗体夹心ELISA检测方法的最低检出限为0.17 IU/ml,最佳线性范围为0.17～2.00 IU/ml,相关系数R>0.97;批间及试验内变异系数均小于10%,特异性、稳定性均良好;检测20批病毒原液毒力及疫苗效力,结果与NIH法相比,差异无统计学意义。结论已建立狂犬病病毒抗原ELISA检测方法,可用于生产过程中狂犬病疫苗原液和半成品的检定。
- 王亚军戚凤春薛向光李晓波王丽娜谢琳王宇夏青娟隋波张梅魏涛郭立君
- 关键词：狂犬病疫苗病毒抗原ELISA效力
- 应用国产激流式生物反应器培养表达HBsAg的重组CHO细胞被引量：1
- 2012年
- 目的采用国产激流式生物反应器培养表达HBsAg的重组CHO细胞。方法分别应用美国NBS公司的Celligen310型生物反应器和国产AP20SC型激流式生物反应器(单个细胞培养袋和4个细胞培养袋)连续灌流培养重组CHO细胞,连续培养35 d,每24 h收获1次,采用ELISA法测定细胞收获液中HBsAg的滴度。结果 Celligen 310型生物反应器培养重组CHO细胞分泌的HBsAg在2.0μg/ml水平上可持续8 d,至第18天达最高水平(2.16μg/ml),第35天收液中HBsAg含量为1.12μg/ml;国产AP20SC激流式生物反应器单个细胞培养袋培养重组CHO细胞分泌的HBsAg在2.0μg/ml水平上可持续9 d,第18天达最高水平(2.20μg/ml),第35天收液中HBsAg含量为1.08μg/ml,与Celligen 310型生物反应器相比,收液中HBsAg含量在2.0μg/ml水平持续时间无明显差异;国产AP20SC激流式生物反应器4个细胞培养袋培养重组CHO细胞分泌的HBsAg在2.0μg/ml水平上可持续13 d,与该生物反应器单个细胞培养袋相比明显延长,第21天达最高水平(2.14μg/ml),第35天收液中HBsAg含量为1.5μg/ml,明显高于单个细胞培养袋培养的细胞。结论国产AP20SC型激流式生物反应器可代替进口生物反应器对传代细胞进行大规模培养,用于人用疫苗的生产。
- 李志强张睿王宝忠赵丽剑王宇董海波吕学用李德娟刘瑞
- 关键词：重组CHO细胞
- 不同佐剂对preS2/S乙型肝炎疫苗免疫原性的影响
- 2013年
- 目的探讨不同佐剂对preS2/S乙型肝炎疫苗免疫原性的影响。方法将BALB/C小鼠随机分为6组:铝佐剂组(S+Al和S2/S+Al)、细胞因子佐剂组(S2/S+CK1、S2/S+CK2和S2/S+CK3)及阴性对照组(NG),用相应抗原腹腔免疫各组小鼠,1 mL/只,分别于免疫后2、4和6周采血,分离血清,ELISA法检测血清中抗-HBs抗体和preS2抗体水平;WST-1法检测淋巴细胞增殖情况。结果免疫后2周,铝佐剂组(S+Al和S2/S+Al)抗体水平较高,阳转率达100%,而细胞因子佐剂组抗-HBs抗体水平均较低,S2/S+CK2及S2/S+CK3组抗体阳转率为0,与NG组比较差异无统计学意义(P>0.05);免疫后4周,细胞因子佐剂组抗-HBs抗体水平升高明显,铝佐剂组S2/S+Al抗体水平显著高于S+Al(P<0.05);免疫后6周,细胞因子佐剂组抗体水平高于铝佐剂组,其中S2/S+CK1组抗体水平较高。免疫后2周,各组小鼠血清中抗-preS2抗体均达到较高水平,各组间差异均无统计学意义(P>0.05);免疫后4周和6周,抗体水平均有所下降,但下降不明显;铝佐剂组S+Al和S2/S+Al抗-preS2抗体水平差异无统计学意义(P>0.05)。免疫后4周,各组小鼠淋巴细胞刺激指数铝佐剂组(S+Al和S2/S+Al)低于细胞因子佐剂组,且差异有统计学意义(P<0.05),其中S2/S+CK1组淋巴细胞增殖水平较高。结论不同佐剂的preS2/S乙型肝炎疫苗均能诱导较高水平的抗-HBs和抗-preS2抗体,细胞因子佐剂组淋巴细胞增殖水平显著高于铝佐剂组,为新型乙型肝炎疫苗和治疗性乙型肝炎疫苗的研究提供了实验依据。
- 徐艳玲徐晓霞王宇谷丽娟杨明隋红高湛翱刘令九赵小琳
- 关键词：S抗原乙型肝炎疫苗佐剂
- 乙型肝炎病毒PreS2S基因在毕赤酵母中表达的研究
- 构建重组质粒PHIL-D2/PreS2S以研究乙肝病毒PreS2(120-146)S基因编码蛋白在毕赤酵母中的表达.通过PCR扩增获得PreS2S片段,插入含AOX1启动子的Pichia Pastoris表达载体PHIL...
- 李利金立杰杨屹邵丽军谷丽娟刘岩松董厉子王宇
- 关键词：S基因毕赤酵母
- 文献传递
- 重组CHO细胞C28株S基因序列的测定及分析
- 目的:测定重组CHO细胞C株S基因序列,研究其遗传稳定性,并与已全基因序列测定的乙型肝炎病毒的S基因序列进行比较分析,预测和预警现有疫苗株对当前疾病流行株的防病效果。方法:从C株中选取第22代、24代、25代、27代、2...
- 姜崴冯雪惠琦付博李德娟王宇张睿郑晓丽
- 关键词：乙型肝炎病毒重组CHO细胞S基因
- 文献传递
