王伟伟
- 作品数：8 被引量：29H指数：3
- 供职机构：四川农业大学动物科技学院更多>>
- 发文基金：国家科技重大专项青岛市科技发展计划项目国家科技攻关计划更多>>
- 相关领域：农业科学生物学理学化学工程更多>>
- 猪链球菌2型致病性研究及其双重荧光PCR检测方法的建立
- 王伟伟
- 关键词：猪链球菌2型病理
- 猪链球菌2型四川分离株猪体回归试验被引量：14
- 2006年
- 选用35～38日龄的健康断奶仔猪21头，分3组，用2005四川分离株SSsc0501分别经静脉、肌肉注射和口服3种途径感染，进行猪体回归试验。肌肉注射组（含菌0．6×10^8个／mL）16h开始出现症状，至36h全部死亡，发病率、病死率均为100％；静脉注射组（含菌0．2×10^8个／mL）25h开始出现症状，48h内全部死亡，发病率和病死率均为100％；口服攻毒组（含菌2×10^8个／mL）90h后开始有发病症状，第9天有1头死亡，发病率75％，病死率33％。从感染病死猪的肝脏、脾脏、肾脏、心血、大脑、脑脊液、淋巴结、肺脏和关节液中均分离到链球菌，经鉴定为试验攻毒的目的菌，表明猪体能够很好地用于猪链球菌2型动物感染模型，同时说明该菌侵害器官广泛，为进一步探讨该病的综合防制提供了重要技术依据。
- 王君玮王志亮赵永刚赵云玲郑东霞王伟伟王涛刘华雷陈义平王珊
- 关键词：猪链球菌2型毒力因子
- 猪链球菌2型病理学研究及其双重荧光PCR检测方法的建立
- 本实验通过猪体攻毒实验，系统研究了猪链球菌2型引起的病理学变化；并建立了快速、准确检测猪链球菌2型的方法—双重荧光PCR检测方法。
试验选用9头30日龄SPF仔猪，分成3组/(每组3头/)，利用中国动物...
- 王伟伟
- 关键词：猪链球菌2型病理MRP
- 文献传递
- 猪链球菌2型四川分离株毒力基因的检测及其序列分析被引量：2
- 2009年
- 根据猪链球菌2型的MRP、EPF和SLY基因设计合成了四对引物,对我们分离鉴定的2005四川分离株进行毒力因子检测,并对阳性产物测序比较。结果以分离株为模板,获得了与预期结果一致的867bp(MRP)、572bp(EF)的2个片段,以及SLY的长度为1502bp目的片段(外引物)和1443bp的目的片段(内引物)。说明分离株SSsc0501为MRP+EF+SLY+,属于具有3种主要毒力因子的强毒株。经对PCR阳性产物测序及序列分析,结果其与P1/7株的核苷酸序列完全一致,与1933株的同源性达99.7%,仅在128位、217位、744位、1380位、1386位的5个核苷酸发生突变。在氨基酸水平上SSsc0501株与1933株的同源性达99.6%,有2个氨基酸发生替代。
- 赵永刚王君玮王志亮赵云玲王清华张维陈义平刘华雷王华王伟伟田晓灵
- 关键词：猪链球菌2型毒力基因
- 利用16S rDNA快速鉴定C群链球菌的研究被引量：7
- 2007年
- 本试验应用PCR方法,根据16S rDNA两端的保守序列,用primer5.0软件设计引物扩增待检细菌,然后对扩增产物DNA片段进行测序、序列分析,经与Gen Bank中的已知序列进行同源性比较后,发现该未知菌属于链球菌C群。该方法比传统的细菌鉴定方法省时省力,并且能将细菌定型到群,结果准确、快速、重复性好。
- 王伟伟陈义平张喜悦赵永刚刘春菊王志亮
- 关键词：链球菌RDNADNA测序
- 左氧氟沙星混悬注射液对仔猪黄白痢临床疗效观察
- 2006年
- 陈春雷宗玉国陈春艳王昆蕾王伟伟付臣于湘
- 关键词：硫酸庆大霉素注射液左氧氟沙星仔猪黄白痢临床疗效观察病理模型
- 双重实时荧光PCR快速检测猪链球菌2型方法的建立及应用被引量：1
- 2009年
- 根据GenBank上公布的MRP与CPS2J的开放性阅读框保守序列,运用BEACON Desigener 2.0软件设计和合成了2对引物和其相应的荧光探针,优化各个反应物的浓度和实时荧光PCR循环程序,建立从组织中直接检测2型链球菌主要毒力因子MRP与CPS2J的实时荧光PCR方法。双重实时荧光PCR检测2型猪链球菌方法能够从病料中直接检测2型猪链球菌并可以检测出该菌的主要毒力基因MRP,运用该方法可以最低检测到24CFU/mL 2型猪链球菌,并且与其他血清型链球菌和其他病原菌无交叉反应,特异性良好。通过对8个样品在3个不同时间的检测,结果显示该方法的稳定性和重复性均很好。
- 王伟伟王君玮李林赵永刚赵云玲邓俊良王志亮
- 关键词：猪链球菌2型MRP
- 应用多重荧光Real-time PCR快速鉴定猪链球菌2型被引量：6
- 2007年
- 目的建立能同时鉴定链球菌2型(S.suis2)和确定主要毒力标志MRP的快速检测方法。方法根据S.suis2CPS2J与MRP的保守序列,设计并合成了2对引物及其相应探针。通过优化各反应物的浓度、配比和循环程序,建立能从组织中直接检测CPS2J和MRP的实时荧光PCR方法。结果能在3h内对送检组织样品检测确定S.suis2型和MRP毒力基因,最低检测菌体浓度24CFU/ml。与普通PCR相比,敏感性在检测CPS2J时比普通PCR高至少10倍以上,而在检测MRP时比其高100倍。与葡萄球菌、化脓链球菌、沙门氏菌、S.suis1型、9型等无交叉反应。同一人在试剂放置0d、20d和60d检测,以及不同人用同一方法检测,变异系数均小于5%,差异不显著。用于检测SSsc0501攻毒后的样品,结果在心、肝、脾、肺、肾、淋巴结、脑中均检测到S.suis2阳性,MRP阳性。而在肌肉中,S.suis2和MRP均为阴性。结论建立的多重荧光Real-timePCR敏感性高、特异性强,稳定性和重复性好,能用于可疑S.suis2型组织样品的快速定型和毒力鉴定。
- 王君玮王志亮王伟伟赵永刚孙承英李林赵云玲张维
- 关键词：猪链球菌2型MRP
