李少丽
- 作品数:49 被引量:236H指数:8
- 供职机构:首都儿科研究所更多>>
- 发文基金:国家自然科学基金北京市自然科学基金北京市优秀人才培养资助更多>>
- 相关领域:医药卫生农业科学环境科学与工程轻工技术与工程更多>>
- 肺炎支原体P1黏附因子主要抗原表位的表达及其临床应用研究被引量:2
- 2011年
- 目的探索肺炎支原体(Mycoplasmapneumoniae,Mp)P1蛋白作为抗原成分在临床血清抗体检测中的应用。方法通过生物信息学分析P1基因主要抗原决定簇,选择其分值较高的部位进行原核表达、纯化,并进行Westernblot鉴定,用纯化后的蛋白免疫小鼠,评价其免疫原性,同时用其作为抗原,采用ELISA方法检测肺炎支原体患儿血清抗体并与全菌体抗原进行比较。结果成功构建了pET-28C.P1-534原核表达载体,经表达、纯化后获得了相对分子质量为26×10^3的融合蛋白;Westernblot检测其能与坳阳性血清发生特异性反应;利用纯化的重组蛋白免疫小鼠,能诱导小鼠产生特异性免疫应答,抗体滴度可达1:2000;用此蛋白作为抗原成分检测患儿血清,其敏感性和特异性分别为85.00%及97.67%。结论重组表达的P1—534蛋白具有良好的免疫原性,作为新的抗原成分其敏感性和特异性优于全菌体抗原,为肺炎支原体抗原成分及其蛋白保护作用的研究奠定了基础。
- 薛冠华孙红妹赵汉青王洛平冯燕玲李少丽
- 关键词:肺炎支原体黏附蛋白抗原表达纯化免疫原性
- 基于标本核酸的肺炎支原体基因分型荧光PCR方法的建立和应用
- 2024年
- 目的建立一种基于临床标本核酸的肺炎支原体(Mycoplasma pneumoniae,Mp)核酸检测及基因分型方法。方法通过基因组学比对,选取Mp Genotype 1型和Genotype 2型菌株特异性靶序列设计合成引物和探针,建立Mp双荧光探针PCR检测分型方法,同时评价该方法的特异度、准确度、检测限和重复性。采用建立的荧光PCR方法对临床标本核酸进行检测,并与已报道的荧光PCR方法进行比对。结果对与Mp种属关系相近的其他种支原体以及常见呼吸道细菌、病毒等18种病原体的核酸进行检测,结果显示均无交叉反应;对90份Mp核酸的检测及分型的准确度为100%。该方法对于Genotype 1型和Genotype 2型Mp检测限均为1.0拷贝/μl的核酸样本,组内、组间重复性实验变异系数均小于2.5%。对88份临床标本核酸的检测中,与已报道的荧光PCR方法RepMp1体系的检测结果相比,Kappa值为0.675,P值为0.267,显示出高度的一致性。结论本研究所建立的Mp核酸检测及基因分型方法敏感度和特异度高,分型准确,可应用于各级省市疾控系统对Mp的监测与防控,促进Mp防控体系的完善,增强监测能力,对Mp的预警预测具有重要意义。
- 张倚玮刘立雍何利华孟凡亮顾瑞雪龚杰李少丽赵飞
- 关键词:肺炎支原体实时荧光PCR
- 儿科肺炎克雷伯菌中质粒介导的喹诺酮耐药基因流行现状被引量:5
- 2017年
- 目的了解质粒介导的喹诺酮耐药基因(plasmid-mediated quinolone resistance genes,PMQR)在儿科临床分离肺炎克雷伯菌中的流行情况与分布特点。方法收集首都儿科研究所附属儿童医院临床分离的肺炎克雷伯菌,E-test法及琼脂稀释法测定菌株对不同抗生素的最低抑菌浓度(MIC);PCR法检测质粒介导的喹诺酮耐药基因qnrA、qnrB、qnrS、aac(6’)-I b-cr和qepA;PCR扩增后测序检测超广谱B.内酰胺酶(ESBLs)相关基因及染色体喹诺酮耐药决定基因gyrA及parC的突变情况:质粒接合实验检测耐药基因是否在菌株间转移。结果131株肺炎克雷伯菌中,喹诺酮类药物耐药率为9.92%:PMQR基因检出率为30.5%(40/131),其中90%为产ESBLs菌株,各种基因检出率qn培基因6.87%,qnrS基因22.9%,aac(6’)-Ib-cr基因4.58%,未检出qnrA及qepA基因;40株PMQR阳性菌株中,2株存在gyrA和parC编码氨基酸序列改变;23株PMQR阳性菌株通过接合试验传递成功。相对于受体菌,接合子对环丙沙星的MIC提高了2~32倍。结论质粒介导喹诺酮类药物耐药基因在儿科肺炎克雷伯菌中有高水平的携带率,阳性菌株多为产ESBLs株,耐药基因可在菌株问水平传播。
- 薛冠华李少丽闫超冯燕玲赵汉青孙红姝白晓晨
- 关键词:肺炎克雷伯菌超广谱Β-内酰胺酶
- 健康体检儿童肺炎支原体检出情况研究被引量:2
- 2023年
- 目的了解参与健康体检儿童人群的肺炎支原体(Mycoplasma pneumoniae,Mp)检出情况。方法随机入组2023年参与健康体检的6~12岁小学生1303人,采集受试者口咽拭子及静脉血标本,使用分离培养、核酸检测以及血清学抗体方法检测受试者Mp检出情况,并进行统计学分析。结果1303例健康儿童中Mp培养阳性检出率为4.1%(53/1303),核酸阳性检出率为7.3%(95/1303),血清学IgM抗体阳性检出率为13.6%(177/1303)。经统计学分析,健康儿童人群中Mp培养与核酸检测以及血清IgM抗体检测阳性率之间的差别均具有统计学意义(P<0.05)。结论2023年健康体检儿童中Mp检出率约为4.1%。分离培养方法对健康人群中Mp检出率检测准确性优于核酸以及血清学方法,核酸和血清学方法会高估正常人群中Mp检出率。
- 李少丽刘立雍黄乐乐刘洁王磊党荔向才鑫杨颖赵飞
- 关键词:肺炎支原体检出率
- 北京市通州区2704名6~18岁女童青春期性征发育现状
- 2024年
- 目的了解北京市通州区6~18岁女童青春期性发育现状,并比较消瘦、正常体重、超重及肥胖女童性发育情况的差异。方法2022年9月至2023年7月对北京市通州区2844名6~18岁女童进行横断面调查,现场测查乳房、阴毛发育分期,询问月经初潮状况,测量体重和身高,并划分为消瘦组、正常体重组和超重及肥胖组。问卷调查获得家庭及个人基本信息。应用Probit概率单位回归方法计算性征发育各期年龄、月经初潮年龄,计数资料组间比较采用χ^(2)检验。结果共调查2844名女童,符合纳入条件2704名,调查有效率为95.1%,其中6~9岁1105名(40.9%)、10~13岁1053名(38.9%)、14~18岁546名(20.2%)。女童身高Z分值(HAZ)、体重Z分值(WAZ)、体质指数Z分值(BAZ)分别为0.46(-0.23,1.16)、0.69(-0.16,1.67)、0.67(-0.27,1.73);消瘦、超重、肥胖检出率分别为1.7%(45/2704)、17.3%(467/2704)、19.9%(538/2704)。消瘦组45名、正常体重组1654名、超重及肥胖组1005名。乳房发育2期(B2)、阴毛发育2期(P2)、月经初潮年龄分别为9.0(95%CI 8.9~9.1)岁、10.5(95%CI 10.4~10.6)岁、11.4(95%CI 11.3~11.5)岁。发育期女童64.6%(1211/1874)乳房发育分期大于阴毛,32.4%(607/1874)乳房和阴毛发育分期相同,3.0%(56/1874)阴毛发育分期大于乳房。乳房发育B2与B5年龄差4.7(95%CI 4.6~4.8)年;阴毛发育P2与P5年龄差4.5(95%CI 4.4~4.6)年;B2与月经初潮年龄差2.4(95%CI 2.3~2.5)年。消瘦、正常体重、超重及肥胖组B2年龄依次为10.0(95%CI 9.5~10.6)、9.3(95%CI 9.2~9.4)、8.6(95%CI 8.4~8.7)岁,月经初潮年龄依次为13.1(95%CI 12.4~13.7)、11.6(95%CI 11.4~11.7)、11.1(95%CI 11.0~11.2)岁;超重及肥胖组女童B2与B5年龄间隔、P2与P5年龄间隔为4.5、4.1年,正常体重组分别为4.7、4.5年,消瘦组分别为4.6、4.7年。结论北京市通州区女童性征发育各期年龄以及初潮年龄较20年前北京市报道有提前趋势;超重肥胖女童相比于正常体重女童不仅青春期开始发
- 张亚钦武华红书文李阳余程东李涛黄贵民侯冬青陈芳芳刘军廷李少丽宗心南
- 关键词:青春期女童性征月经初潮超重肥胖
- 肺炎支原体耐药菌株的PCR-SNP检测方法
- 本发明根据已知的Mp23S rRNA中的耐药突变基因位点设计3条引物对其进行特异性扩增,为增加引物的特异性,人为在特异性引物的3′端引入一个错配碱基且3′端末端落在突变位点上;利用上述引物及其它PCR组份构建PCR反应体...
- 孙红妹李少丽薛冠华赵汉青冯燕玲
- 文献传递
- 肺炎支原体的耐药机制和耐药基因检测现状被引量:4
- 2010年
- 肺炎支原体是社区获得性肺炎的常见病原体之一,一年四季均可发病.严重感染者可引起多器官损伤、脑炎,甚至导致死亡.目前大环内酯类抗生素是治疗儿童支原体感染的首选药物,但近年来国内外均报道其耐药现象逐渐增加.现将肺炎支原体对于大环内酯类耐药现象、耐药机制和耐药基因检测现状及展望作一综述.
- 李少丽孙红妹
- 关键词:肺炎支原体大环内酯类抗生素耐药基因检测
- 儿童腹泻病原菌检测方法比较及致泻性大肠杆菌基因型分析
- 目的 了解不同检测方法对儿童腹泻病原菌的检出情况及儿童易感致泻性大肠杆菌的基因型特征.方法 收集2012年5-10月在首都儿科研究所附属儿童医院感染消化科门诊就诊的腹泻患儿粪便标本,用选择性培养基分离培养致腹泻性大肠杆菌...
- 冯燕玲张艳玲薛冠华李少丽宁慧娟闫超赵汉青孙红妹
- 肺炎支原体快速液体培养法的评价和存在的问题
- 赵汉青闫超孙红妹冯燕玲薛冠华李少丽
- 肺炎支原体大环内酯类耐药基因突变与基因分型的关系
- 目的 比较肺炎支原体23S rRNA中大环内酯类耐药基因突变与基因分型之间的关系。方法 利用套式PCR法检测407例肺炎支原体阳性标本(北京318例,美国59例,澳大利亚30例)的23S rRNA中耐药相关基因突变,并利...
- 闫超薛冠华孙红妹李少丽赵汉青冯燕玲白晓晨
- 关键词:肺炎支原体耐药