朱晨露
- 作品数：6 被引量：15H指数：2
- 供职机构：江苏大学基础医学与医学技术学院检验医学研究所更多>>
- 发文基金：江苏省自然科学基金国家自然科学基金江苏省卫生厅医学科研项目更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- 小鼠GITR真核表达载体的构建及表达
- 2011年
- 目的:构建小鼠GITR(mGITR)的真核表达载体,转染COS-7细胞表达小鼠GITR蛋白。方法:用TRIzol试剂抽提小鼠脾细胞总RNA,经RT-PCR扩增出GITR全长基因,构建真核重组载体pIRES2-EGFP-mGITR,经鉴定后采用脂质体介导DNA法转染COS-7细胞。结果:从小鼠脾细胞中成功扩增得到GITR全长基因。重组载体pIRES2-EGFP-mGITR转染COS-7细胞后,经荧光显微镜观察可见绿色荧光,提取蛋白后经蛋白质印迹鉴定有目的蛋白mGITR。结论:成功构建了小鼠GITR基因的真核表达载体pIRES2-EGFP-mGITR,转染COS-7细胞后mGITR蛋白获得成功表达。
- 沈培郑东刘艳田洁赵银霞刘青玲朱晨露马洁苏兆亮马斌许化溪王胜军
- 关键词：真核表达转染COS-7细胞
- 小鼠白介素17受体A胞外段的表达、纯化及鉴定
- 2012年
- 目的:分别克隆小鼠白介素17受体A胞外段(mIL-17RAaa32-322)及小鼠IgG2AFc(mIgG2AFc)基因,构建mIL-17RAaa32-322-mIgG2AFc融合蛋白原核表达载体,并在体外表达、纯化及鉴定。方法:利用基因重组技术构建pET32a(+)-mIL-17RAaa32-322-mIgG2AFc原核表达载体,并在E.coli Rosetta中表达mIL-17RAaa32-322-mIgG2AFc融合蛋白,经镍离子螯合层析分离纯化后,用SDS-PAGE电泳和蛋白质印迹法进行鉴定。结果:成功构建pET32a(+)-mIL-17RAaa32-322-mIgG2AFc原核表达载体,获得高效表达的融合蛋白,且蛋白质印迹证实为目的蛋白。结论:获得mIL-17RAaa32-322-mIgG2AFc融合蛋白,为进一步研究其生物学功能奠定基础。
- 魏衍财朱晨露陈艳红秦伟田洁袁靖陈娟吴晶晶汤新逸Samuel Essien Baidoo许化溪王胜军
- 关键词：原核表达纯化
- 桥本甲状腺炎患者Th17细胞比例升高被引量：9
- 2012年
- 目的研究桥本甲状腺炎（HT）患者Th17细胞及其相关因子的变化。方法选取30例桥本甲状腺炎患者，并以30名健康对照进行研究。Th17细胞采用流式细胞术测定，孤儿核受体γt（RORγt）和白细胞介素（IL）-17采用实时定量PCR测定，IL-6和IL-23采用ELISA法测定。结果（1）与健康对照相比，桥本甲状腺炎患者外周血中Th17细胞比例明显增加[（0．75±0．79）％对（0．28±0．23）％]，RORγt水平增高（0．30±0．38对0．04±0．02，均P〈0．05）；（2）桥本甲状腺炎患者血清中IL-6和IL-23水平显著高于健康对照组（3．66±4．70对0．47±1．11，154.7±75．81对80．65±61．41．均P〈0．05）；（3）桥本甲状腺炎患者Th17细胞与甲状腺球蛋白抗体（TgAb）水平呈正相关（r=0．8484，P=0．0077）；（4）桥本甲状腺炎患者甲状腺组织中表达RORγt和IL-17基因。结论桥本甲状腺炎患者体内Th17细胞及相关因子异常增高。
- 柳迎昭朱晨露田洁陈建华陈建国陈娟许化溪王胜军
- 关键词：桥本甲状腺炎TH17细胞自身免疫甲状腺
- 老年人Treg细胞的变化与老年疾病被引量：3
- 2010年
- 王胜军朱晨露
- 关键词：老年疾病老年人群TREG细胞CD4^+T细胞机体免疫系统自身免疫性疾病
- 人IL-21 mRNA实时荧光定量PCR检测方法的建立及应用被引量：1
- 2013年
- 目的:建立检测人白细胞介素-21(interleukin-21,IL-21)mRNA的实时荧光定量PCR(real-time fluorescencequantitative PCR,qRT-PCR)方法。方法:分离人外周血单个核细胞(peripheral blood mononuclear cells,PBMC),磁珠分选CD4+细胞,经PHA刺激后提取总RNA并逆转录成cDNA。采用qRT-PCR方法检测IL-21 mRNA的表达水平。评价该方法的特异性,应用该方法检测Graves病患者CD4+T细胞中IL-21 mRNA的相对表达水平。结果:建立了人IL-21 mRNA的实时荧光定量PCR检测方法。该法的熔解曲线为单峰,核酸电泳显示为一特异性条带。Graves病患者CD4+T细胞中IL-21 mRNA的相对表达水平明显高于健康对照组(P<0.001)。结论:建立的检测人IL-21 mRNA的实时荧光定量PCR方法灵敏性、特异性好,为进一步临床应用提供了实验基础。
- 朱晨露陈艳红魏衍财秦伟马洁许化溪王胜军
- 关键词：白细胞介素-21实时荧光定量PCRGRAVES病
- 小鼠CCL20 mRNA实时荧光定量PCR检测方法的建立被引量：2
- 2012年
- 目的:建立检测小鼠脂肪组织中趋化因子CCL20(CC chemokine ligand 20)mRNA的实时荧光定量PCR(real-time fluorescence quantitative PCR,qRT-PCR)的方法。方法:分离小鼠脂肪组织细胞,经PMA和离子霉素刺激4 h后收集细胞提取总RNA并逆转录为cDNA。采用qRT-PCR方法检测趋化因子CCL20 mRNA的表达水平。评价该方法的特异性,同时应用该方法检测小鼠脂肪组织中趋化因子CCL20mRNA相对表达水平。结果:建立了小鼠脂肪组织中趋化因子CCL20的SYBR Green实时荧光定量PCR检测方法,结果显示该方法的熔解曲线为单峰,同时核酸电泳显示一条特异性条带。检测结果表明高脂饮食诱导的肥胖小鼠脂肪组织中趋化因子CCL20的相对表达水平明显高于正常饮食对照组(t=3.02,P<0.05)。结论:建立了检测小鼠脂肪组织中趋化因子CCL20 mRNA的实时荧光定量PCR方法,特异性好、灵敏性强,为进一步研究小鼠CCL20的生物学功能提供了实验基础。
- 陈艳红朱晨露魏衍财秦伟田洁袁靖陈娟吴晶晶汤新逸许化溪王胜军
- 关键词：SYBR实时荧光定量PCR
