施用辉
- 作品数：5 被引量：5H指数：1
- 供职机构：江南大学食品学院食品营养与安全研究所更多>>
- 相关领域：生物学化学工程理学更多>>
- 质粒DNA的大规模制备
- 2000年
- 质粒ＤＮＡ有重要的基因调节性能，直接注射裸露或用脂质体包埋的质粒ＤＮＡ常需要大量的质粒ＤＮＡ。当前广泛被采用的碱溶从细胞中提取质粒的方法有不少问题，其中纯化工艺产量较低是质粒大规模生产的主要瓶颈，因此设计和开发新型质粒生产方法具有重要的意义。
- 王志军乐国伟施用辉
- 关键词：质粒DNA基因治疗发酵纯化DNA
- 用可降解聚合物开发一次性接种疫苗(SAV)的研究被引量：1
- 2000年
- 要消除某种疾病的最好方法是使用疫苗，这常需要重复免疫，为了开发只接种一次的疫苗（ＳＡＶ），方法之一就是开发含抗原的控制释放微球，这种微球在注射入体内之后能够缓慢释放，用控制释放技术制成的疫苗只经一次接种就能够达到完全免疫某种疾病的目的。本文重点论述了控制释放抗原的ＰＬＧＡ微球体系，对聚合物的组成与降解性能作了讨论，描述了降解模型，对目前生产ＳＡＶ的主要问题作了分析。
- 王志军乐国伟施用辉
- 关键词：SAV
- 携带pcDNA3s与EGFPC3质粒的重组减毒沙门氏菌的免疫性与EGFP的表达被引量：1
- 2007年
- 目的研究HBsAg DNA重组减毒鼠伤寒沙门氏菌的免疫性与增强型绿色荧光蛋白(EGFP)基因EGFPC3在小鼠体内的表达。方法将质粒pcDNA3s与pEGFPC3分别电转化减毒鼠伤寒沙门氏菌SL8786,构建重组减毒鼠伤寒沙门氏菌SL8786/EGFPC3与SL8786/pcDNA3s。利用时间分辨荧光免疫分析技术(TRFIA)检测小鼠的血清抗体的含量,以及重组菌引起的T细胞增殖和细胞毒性T淋巴细胞(CTL)应答。用荧光显微镜观察EGFPC3表达。结果口服SL8786/p cDNA3s免疫小鼠后,可诱导产生较强的特异性CTL应答。口服免疫小鼠后第11周抗-HBs含量最高。用流式细胞术检测贴壁培养的2只小鼠的脾细胞中SL8786/EGFPC3阳性率分别为19.20%和17.36%,而SL8786/pcDNA3口服的2只小鼠脾细胞中的EGFP阳性率分别仅为1.95%和1.63%。给小鼠口服SL8786/EGFPC33周后,在小鼠肝脏、脾脏、肾脏、胸腺、十二指肠及肌肉等组织中,均有EGFPC3的表达。结论口服SL8786/pcDNA3s在小鼠体内诱导了特异性细胞和体液免疫应答。携带EGFPC3的重组鼠伤寒沙门氏菌SL8786/EGFPC3在小鼠的部分组织中产生绿色荧光表达,该重组菌的构建为减毒沙门氏菌作为活载体基因工程疫苗的研制提供了一个优良模型。
- 方希修王冬梅施用辉乐国伟白新鹏刘建文
- 关键词：免疫应答
- 以减毒鼠伤寒沙门氏菌为载体的重组HBsAg口服疫苗构建与鉴定被引量：2
- 2006年
- 采用大量培养含有pcDNA3s的大肠杆菌,提取pcDNA3s质粒,利用电转化方法将pcD-NA3s质粒转化到感受态减毒鼠伤寒沙门氏菌,SDS-PAPG检测到930 bp大小的条带,基因序列分析到重组菌含有乙肝表面抗原(HBsAg)基因序列;观察重组菌体外传代培养的稳定性,该重组菌株在体外能稳定地繁殖、生长和传代。试验结果表明,携带HBsAg的重组减毒鼠伤寒沙门氏菌疫苗X8786/pcDNA3s已成功构建,为研究和应用人和动物治疗用乙型肝炎病毒口服基因工程活疫苗奠定了基础。
- 方希修乐国伟王冬梅刘建文施用辉
- 关键词：电转化乙肝表面抗原基因序列分析
- 肽核酸与基因表达被引量：1
- 2002年
- 肽核酸 (PNA)是一类人工合成的核酸类似物 ,PNA与核酸链以 Waston- Crick碱基配对方式稳定互补结合 ,具有高度的亲合性、稳定性、特异性特征 ,PNA能调节基因的表达作用 ,包括调节基因的复制、转录 (或逆转录 )、翻译过程 ,因此 PNA有着广泛的分子生物学效应 。
- 宫霞乐国伟施用辉
- 关键词：肽核酸基因表达靶基因
