方文
- 作品数：21 被引量：65H指数：6
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- 发文基金：国家自然科学基金贵州省优秀科技教育人才省长资金项目贵州省科技攻关计划更多>>
- 相关领域：医药卫生农业科学文化科学更多>>
- 红细胞膜脂蛋白(a)含量检测及相关因素研究
- 2001年
- 目的 :对 2 3例老年冠心病 (CHD)红细胞膜 (RBCm)脂蛋白 (a)〔Lp(a)〕及胆固醇 (TC)含量进行测定 ,并与正常对照组进行比较。方法 :RBCm制备采用Dodge法 ,膜蛋白测定采用酚试剂法 ,Lp(a)测定用ELISA法、TC测定用胆固醇酶法。结果 :CHD组RBCmLp(a)及血浆Lp(a)含量明显高于对照组 (P <0 0 5 ,P <0 0 1) ,CHD组RBCm及血浆TC与对照组无显著性差异 (P >0 0 5 )。相关分析显示 :膜上Lp(a)含量与血浆Lp(a)含量呈明显正相关 (r =0 5 6 3,P <0 0 5 ) ,与血浆TC相关性不显著 (r =0 12 6 ,P >0 0 5 )。结论 :高Lp(a)是CHD的独立危险因素 ,脂质代谢紊乱与CHD有密切关系。
- 方文
- 关键词：冠状动脉疾病红细胞膜胆固醇
- 未成熟与成熟猪囊尾蚴蛋白双向电泳的图谱分析
- 2011年
- 为从蛋白质水平揭示猪带绦虫入侵中间宿主家猪的免疫逃避机制,应用双向电泳技术分析未成熟与成熟猪囊尾蚴蛋白质表达差异,进行双向电泳图像软件分析。结果表明:未成熟猪囊尾蚴与成熟猪囊尾蚴蛋白的双向电泳凝胶上分别有(217±13)个、(241±17)个蛋白斑点,未成熟猪囊尾蚴表达上调2倍以上的蛋白有6个,下调2倍以上的蛋白有2个。
- 方文肖靓靓包怀恩牟荣
- 关键词：猪带绦虫囊尾蚴双向电泳蛋白质组
- 感染猪囊尾蚴的家猪组织中不同时间IL-6、IL-8、TNF-α和sIL-2R含量变化被引量：8
- 2009年
- 目的研究实验家猪感染猪囊尾蚴不同时间组织中细胞因子IL-6、IL-8、TNF-α和sIL-2R含量变化,从细胞因子角度探讨家猪抗猪带绦虫免疫应答的机制。方法用猪带绦虫虫卵直接灌胃20d龄健康乳猪4头,并以健康乳猪4头作对照。于感染后第40、60、80和120 d取实验组猪肝脏、骨骼肌、心肌、舌肌及脑组织中囊尾蚴寄生处组织200 mg匀浆,用ELISA法测定匀浆上清液中细胞因子IL-6、IL-8、TNF-α和sIL-2R的含量。结果1.肝脏病变组织中4种细胞因子的含量在40d时均明显高于同期对照组(P<0.01);随感染时间延长,4种细胞因子的含量逐渐降低,至80d时与同期对照组差别缩小(P<0.05),120d时肝脏已无囊尾蚴寄生;对照组肝脏组织中4种细胞因子的含量在不同时间始终保持基本稳定。2.肌肉和脑部份病变组织中4种细胞因子的含量在40d时也明显高于同期对照组(P<0.01);随感染时间延长至80d时与同期对照组差别变小(P<0.05),120d时与同期对照组差别无显著性(P>0.05)。3.对照组家猪肝脏中4种细胞因子的含量绝对值高于肌肉和脑组织(P<0.01);实验组肝组织在40d时各种细胞因子的增量更明显高于肌肉和脑组织中的增量(P<0.01)。结论家猪感染猪带绦虫早期,IL-6、IL-8和TNF-α作为前炎性反应因子在家猪肝脏的高水平表达诱导肝脏发生严重的炎症反应,限制和杀灭肝内的早期囊尾蚴,而肌肉和脑组织中这些细胞因子表达稍低,炎症反应相对较轻,因而囊尾蚴易于在这些部位存活。这一点可以从感染后期肌肉、脑组织中的囊尾蚴数量远多于肝脏而得到证实。
- 方文包怀恩肖靓靓牟荣
- 关键词：猪带绦虫猪囊尾蚴SIL-2R
- 四川雅江县和甘肃岷县绦/囊虫病流行现状调查被引量：7
- 2009年
- 目的了解我国西部藏族地区四川省雅江县及甘肃省岷县绦/囊虫病的流行现状。方法采用以询问排节片史为主的方法对雅江县和岷县绦/囊虫病病例进行调查,用槟榔-南瓜子法对调查到的病人进行驱虫治疗,对驱出的成虫进行形态学鉴定和测量。结果在雅江县呷拉乡及瓦多乡的7个村寨共调查1137人,有自觉症状的病人73例,经驱虫治疗后有2人排出猪带绦虫,21人排出牛带绦虫,另发现皮下结节患者18例,脑囊虫病患者2例。在岷县寺沟乡及秦许乡的6个村寨共调查652人,27例有排节片史病人均未驱出绦虫,岷县确诊的脑囊虫病患者17例。结论目前四川省雅江县及甘肃省岷县存在绦/囊虫病的流行,其原因是当地藏民喜欢生吃猪肉和牛肉;岷县囊虫病的流行可能与当地农民接触粪便机会较多有关。
- 方文包怀恩黄江郎书源
- 关键词：流行病学调查
- 猪囊尾蚴膜联蛋白基因的原核表达和免疫学分析被引量：2
- 2015年
- 目的对猪囊尾蚴AF239799-1膜联蛋白基因进行高效原核表达,对表达产物进行免疫学分析。方法通过DNA自动合成仪,用固相亚磷酸酰胺法合成一段5＇端有NdeⅠ内切酶位点,3＇端有XhoⅠ内切酶位点的猪囊尾蚴AF239799-1基因序列,并将其克隆到原核表达载体pET28a（＋）中,经测序、PCR及双酶切鉴定后,将其转入到宿主菌E.coli BL21（DE3）中,用IPTG诱导表达,表达产物采用十二烷基硫酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳（SDS-PAGE）进行鉴定,并用Ni-NTA亲和层析柱纯化,纯化的重组蛋白用Western blot进行免疫学分析。结果该基因全长为1 250bp,编码区为2~1 042bp,编码346个氨基酸,理论分子质量、等电点分别为40.39ku和6.80。经DNA测序、PCR及双酶切鉴定,pET28a（＋）-AF239799-1重组质粒构建成功。重组质粒在E.coli BL21（DE3）主要以包涵体形式表达,Western blot显示重组蛋白可被猪带绦虫病猪血清识别。结论猪囊尾蚴AF239799-1基因可在原核表达系统中高效表达,表达产物具有免疫反应性。
- 钟树怀方文
- 关键词：猪囊尾蚴原核表达免疫反应性
- 双向电泳结合蛋白质印迹技术分析猪囊尾蚴乳酸脱氢酶被引量：1
- 2011年
- 为了研究猪囊尾蚴乳酸脱氢酶(LDH)的表达,试验选择四川省雅江县呷拉乡猪带绦虫病患者,给其口服槟榔-南瓜子驱虫,收集、制备虫卵悬液(8万个/mL),再给3头20日龄三元杂交乳猪猪灌胃虫卵悬液,每头1 mL,40 d后收集、制备猪囊尾蚴蛋白,进行双向电泳(2-DE)分析,将凝胶蛋白斑点转移至聚偏氟乙烯膜(PVDF膜),用自制的大鼠抗猪带绦虫LDH血清作为一抗、健康大鼠血清作为阴性对照进行蛋白质印迹(Western-blotting)分析。结果表明:双向电泳凝胶共检测到(207±9)个蛋白质斑点,相对分子质量(Mr)为14 400～94 000,等电点(pI)为3.0～10.0;试验组特异性抗原抗体阳性杂交斑点为1个,阴性对照未见阳性杂交斑点;将Western-blotting检测的抗原抗体阳性杂交斑点与原双向电泳凝胶斑点进行比对,找到对应蛋白斑点,经ImageMaster 2D Platinum 5.0软件分析后初步确定该蛋白斑点的pI/Mr为7.03/35 368,与猪带绦虫LDH的pI/Mr理论推导值接近,说明猪囊尾蚴表达LDH。
- 方文包怀恩肖靓靓牟荣
- 关键词：猪带绦虫囊尾蚴乳酸脱氢酶双向电泳蛋白质印迹
- 猪囊尾蚴基质金属蛋白酶-9在猪肌肉和脑组织的表达分布
- 2011年
- 应用免疫组化分析猪囊尾蚴基质金属蛋白酶-9(MMP-9)的表达。用猪带绦虫卵1 mL(8万个/mL)灌胃20 d龄健康乳猪6头,于感染后40、801、20 d分别宰杀2头猪并取含囊尾蚴的肌肉及脑组织制作4μm厚石蜡切片,采用Envision二步法,观察不同时期寄生在肌肉及脑组织的猪囊尾蚴基质金属蛋白酶-9的表达。结果显示,不同时期寄生在肌肉及脑组织的猪囊尾蚴均表达MMP-9,随着感染时间增加,各组织猪囊尾蚴MMP-9的表达均变化不大(P>0.05),寄生在脑组织的猪囊尾蚴MMP-9的表达要略高于同期寄生在肌肉组织的猪囊尾蚴MMP-9的表达(P<0.05)。感染部位组织学特征不同,猪囊尾蚴MMP-9的表达略有差异。
- 方文肖靓靓包怀恩牟荣
- 关键词：猪囊尾蚴基质金属蛋白酶-9免疫组化
- 血清胆碱酯酶活性在肝病时的变化及其相关性被引量：11
- 1999年
- 用碱性羟胺比色法测定１２４ 例肝脏疾病患者及４５ 例健康人的血清胆碱酯酶（ＣＨＥ） 活力，并同时测定血清总蛋白、白蛋白及谷丙转氨酶（ＡＬＴ） 活力。结果显示：肝脏疾病患者血清胆碱酯酶与正常对照比较活力降低，且以肝癌患者降低量为显著，其降低顺序为肝癌＞ 肝硬化＞ 慢性肝炎＞ 急性肝炎。肝脏疾病患者血清ＣＨＥ 活力与血清蛋白质含量、ＡＬＴ 的直线相关分析结果为：ＣＨＥ与总蛋白、白蛋白之间呈正相关。相关系数分别为：ｒ ＝ ０－９７３ ８ 、Ｐ＜ ０－０１ ，ｒ＝ ０－９７４ ７ 、Ｐ＜ ０－０１ 。与球旦白呈负相关，ｒ＝ － ０－９２８ ５ 、Ｐ＜ ０－０５ 。与ＡＬＴ 无显著相关性，ｒ＝ ０－３６２ ６ ，Ｐ＞ ０－１０ 。故肝功能检测时，测定ＣＨＥ、总蛋白、球蛋白、ＡＬＴ，并探讨它们之间的相关性，具有重要意义。
- 方文胡鸿
- 关键词：肝疾病胆碱酯酶蛋白质丙氨酸转氨酶
- 六种肝胆疾病血清碱性磷酸酶活力分析
- 1996年
- 用Ｋｉｎｇ－Ａｒｍｓｔｒｏｎｇ法对六种肝胆疾病进行Ａｋｐ活力测定，结果表明：肝内外胆道梗阻ＡＫＰ活力增高最为显著（３１．４±１４．２），其次为肝癌（２９．３±１０．５）、急性黄疸型肝炎（２７．３±８．８），而肝硬化（１８．５±７．７）、慢性肝炎（１８．１±９．１）、急性无黄疸型肝炎（１４．３±５．
- 方文谭德安黄铁生
- 关键词：碱性磷酸酶肝疾病胆道疾病
- 四川省雅江县绦∕囊虫病的流行病学调查被引量：2
- 2007年
- 目的了解绦∕囊虫病在四川雅江县的流行特点。方法采用传统流行病学调查方法(即询问病史、驱虫、观察皮下结节等)对雅江县相邻7个村寨进行绦∕囊虫病调查,并对59位年龄在10～73岁有临床表现的病人(男55,女4)进行驱虫治疗,并对皮下结节病人进行了初步调查。结果在55例男性患者中有20人驱出虫体,在4例女性患者中有1人驱出虫体(为猪带绦虫),驱虫率达35.59%。皮下结节患者共18人。该地区绦∕囊虫病流行的主要原因可能是当地群众喜欢生吃牛肉、猪肉。结论四川省雅江县绦∕囊虫病感染严重,患者主要是青壮年。
- 黄江阿斗塔龙昌平郎书源包怀恩方文
- 关键词：流行病学调查
