方丽莎
- 作品数：5 被引量：2H指数：1
- 供职机构：广东工业大学轻工化工学院更多>>
- 发文基金：广东省教育部产学研结合项目更多>>
- 相关领域：生物学理学轻工技术与工程更多>>
- SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳在拟糖蛋白检测中的应用
- 2009年
- 将不同分子量分布的葡聚糖与人血清（HSA）、牛血清（BSA）蛋白偶联，通过提高葡聚糖的分支度，增加葡聚糖的分子量，以改变其空间结构，提高其抗原免疫活性。采用SDS．聚丙烯酰胺凝胶电泳，结合考马斯亮蓝和过碘酸．品红两种染色方法，对所得葡聚糖拟糖蛋白分子量的分布进行表征。
- 方丽莎谢珍茗余倩余林
- 关键词：SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳分子量分布考马斯亮蓝葡聚糖空间结构
- 人血清蛋白-葡聚糖偶合抗原的制备与表征被引量：2
- 2010年
- 将葡聚糖用NaIO4氧化成带醛基的产物,再与人血清蛋白(HSA)中的氨基反应形成不稳定的席夫碱,在还原剂硼氰氢化钠(NaCNBH3)的作用下,成为稳定的拟糖蛋白抗原,并对影响偶合反应的几个方面进行讨论,包括:不同分子质量的葡聚糖、葡聚糖氧化所用NaIO4的量、氧化葡聚糖与HSA的比例和偶合时间。结果表明:偶合反应的最佳条件为:葡聚糖T40与氧化剂NaIO4物质的量比为1:187,偶合溶液pH9.0,氧化葡聚糖T40与HSA物质的量比为4:1,偶合时间12h。质量相等的不同类型葡聚糖,葡聚糖分子质量越大,氧化时需要的氧化剂越多,氧化度越高接枝度也越高。
- 方丽莎谢珍茗梁达奉曾练强余林
- 关键词：葡聚糖
- 大分子葡聚糖—牛血清蛋白抗原偶联物的制备与表征
- 2010年
- 用还原胺化法制备大分子葡聚糖-牛血清蛋白(BSA)拟糖蛋白抗原,通过SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳结合考马斯亮蓝和过碘酸-品红两种染色方法验证偶联物的生成。考察不同反应条件(葡聚糖T40的氧化度,偶联pH,氧化葡聚糖和蛋白质的比值,偶联时间)对偶联反应的影响。确定拟糖蛋白抗原的最佳偶联条件为:葡聚糖T40/氧化剂NaIO4=1/120(物质的量比),偶联溶液pH8.0,葡聚糖T40/BSA=1/1(物质的量比),偶联时间24h。并将此反应条件用于T10和T100拟糖蛋白抗原的合成。
- 方丽莎谢珍茗梁达奉余林
- 关键词：葡聚糖抗原
- SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳在拟糖蛋白检测中的应用
- 将不同分子量分布的葡聚糖与人血洁（HSA）、牛血清(BSA)蛋白偶联，通过提高葡聚糖的分支度，增加葡聚糖的分广量，以改变其空间结构，提高其抗原免疫活性，采用SDS-聚内烯酰胺凝胶电泳，结台考马斯亮蓝和过碘酸-品红两种染色...
- 方丽莎谢珍茗余倩余林
- 关键词：聚丙烯酰胺凝胶电泳
- 文献传递
- 葡聚糖抗体的制备及其Elisa检测方法的建立
- 2013年
- 制备并筛选葡聚糖拟糖蛋白抗原,通过动物免疫获得葡聚糖多克隆抗体并建立葡聚糖的Elisa检测方法,应用于实际样品检测。以还原胺化法制备大分子葡聚糖-牛血清蛋白(BSA)拟糖蛋白质,通过SDS-PAGE与自由氨基测定,优化葡聚糖拟糖蛋白抗原制备反应,建立直接竞争Elisa筛选抗原活性。以制得的葡聚糖T40-BSA拟糖蛋白抗原为免疫原,经过免疫白兔后获得高效价多抗;建立检测葡聚糖多抗的间接非竞争Elisa方法。确定拟糖蛋白抗原的最佳制备条件(n(葡聚糖)/n(氧化剂NaIO4)=1/120,偶联时间24 h);筛选获得不同制备条件下与标准抗体结合最强的抗原产物T40-BSA,动物免疫获得多抗,优化实验条件:以质量浓度10μg/mL的T40-BSA为包被抗原,37℃时血清多抗和酶标多抗的反应时间均为45 min,质量分数5%小牛血清为封闭液后洗板;建立了基于T40-BSA拟糖蛋白抗原的不同相对分子质量葡聚糖间接竞争Elisa检测方法,并应用于对市售白糖中葡聚糖T40的含量检测。研究结果表明,葡聚糖-BSA拟糖蛋白抗原制备条件不同,对其免疫活性有影响。建立的检测方法有良好的线性,能用于实际样品中葡聚糖含量的检测。
- 谢珍茗方丽莎孙明余林
- 关键词：葡聚糖抗体酶联免疫分析
