斯小明
- 作品数：13 被引量：44H指数：4
- 供职机构：第四军医大学西京医院更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金陕西省自然科学基金高等学校骨干教师资助计划更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- IL-18基因增强肿瘤抗原致敏DC诱导的CTL特异性杀伤肝癌细胞被引量：15
- 2009年
- 目的:探讨腺病毒介导的白细胞介素-18(IL-18)基因转染能否使肿瘤抗原冲击的树突状细胞(dentritic cell,DC)在体外诱导出更强的抗肝癌免疫反应。方法:携IL-18的重组腺病毒载体感染经肝癌细胞株HepG2冻融抗原致敏的DC(AdIL-18-HepG2/DC),FACS分析AdIL-18-HepG2/DC表面分子的表达,ELISA法检测IL-18的分泌水平,3H-TdR掺入法检测T淋巴细胞增殖能力,MTT法检测细胞毒性T淋巴细胞杀伤效应。结果:AdIL-18-HepG2/DC较未转染DC能高水平地表达CD1a、CD11c、CD80、CD86以及HLA-DR;较未经IL-18转染的DC分泌较高水平的IL-18。AdIL-18-HepG2/DC能非常有效地刺激自体T细胞增殖(CPM值为228 018±1 079),其刺激强度显著强于AdIL-18DC、HepG2/DC、AdlzcZ/DC及DC(均P<0.05)。当靶细胞为HepG2时,AdIL-18-HepG2/DC诱导的CTL杀伤活性显著高于其他各组(均P<0.05),并且其杀伤能力与效应细胞数量成正比。结论:IL-18基因转染且肝癌抗原致敏的DC可以显著增强DC的特异性抗肝癌效应。
- 杨静悦曹大勇刘文超斯小明
- 关键词：白细胞介素-18肿瘤抗原
- 含人AFP基因重组腺病毒载体的构建及其转染树突状细胞瘤苗的制备
- 2009年
- 目的:构建含人AFP基因的腺病毒载体,体外转染树突状细胞,制备树突状细胞肝癌瘤苗。方法:将AFP基因亚克隆到pIND载体和Shuttle2载体中,构建穿梭载体Shuttle2-AFP。用PI-Sce Ⅰ和I-Ceu Ⅰ双酶切后将所获AFP基因片段再与线性化的腺病毒载体pAdeno-X连接,构成pAdeno-AFP重组腺病毒载体。其后,用重组腺病毒载体转染HEK293细胞,包装腺病毒表达载体。通过酶切、PCR对腺病毒载体进行鉴定。包装好的重组病毒载体pAdeno-AFP体外感染树突状细胞制备树突状细胞肝癌瘤苗后,FACS分析pAd-eno-AFP/DC表面分子的表达,酶联免疫吸附试验法(ELISA)检测AFP水平。结果:酶切、PCR鉴定证实,穿梭质粒插入片段为AFP基因。包装的腺病毒载体具有良好的感染性,可以在293细胞中形成病毒颗粒,腺病毒载体内携带AFP基因感染树突状细胞,pAdeno-AFP/DC能高水平的表达CD1a,CD11c,CD80,CD86以及HLA-DR,并分泌较高水平的AFP。结论:构建成功的含AFP腺病毒载体可以在树突状细胞中表达AFP,为DC瘤苗的进一步研究奠定了基础。
- 杨静悦曹大勇刘文超斯小明
- 关键词：树突状细胞腺病毒载体AFP转染
- 腺病毒介导的HBsAg基因修饰树突状细胞的体外生物学特性被引量：2
- 2006年
- 目的:探讨腺病毒介导乙型肝炎病毒表面抗原(AdVHBsAg)基因修饰树突状细胞(dendriticcell,DC)瘤苗体外生物学活性。方法:将腺病毒表达载体AdVHBsAg转染人单个核细胞来源的DC,构建AdVHBsAg-DC肝癌瘤苗,采用Westernblotting法鉴定转染基因表达,FACS检测表面分子和内吞功能,3H-TdR法检测T细胞增殖反应的能力,MTT法检测CTL活性。结果:HBsAg基因转染后,Westernblotting法检测结果示HBsAg基因表达于转染的DC,表明腺病毒介导的HBsAg基因转染的有效性。AdVHBsAg-DC可高表达CD1a、CD11c、CD83、CD86和HLA-DR,但内吞功能较DC组降低(P<0.05)。AdVHBsAg-DC刺激自体T细胞增殖功能均明显高于DC对照组和AdVLacZ-DC组(P<0.05)。AdVHBsAg-DC体外诱导CTL对HepG2·2·15肿瘤细胞的杀伤作用具有特异性。结论:肝癌相关基因HBsAg可作为乙型肝炎病毒相关性肝癌的切入点,该研究为HBV相关肝癌DC体内免疫治疗提供了实验依据。
- 杨静悦曹大勇刘文超范黎斯小明腾增辉杨文涛
- 关键词：树突状细胞细胞毒T淋巴细胞免疫治疗HBSAG
- 护理美学的应用与老年病人心理效应被引量：3
- 1994年
- 为了提高护理质量，改善老年病人心理状态，我们尝试把美学教育贯穿于对护士教育管理中：通过抓护士美好心灵的陶冶，抓美好形象的塑造，抓技术的精益求精，抓优美环境的营建，提高了护士的整体素质，大家自觉地以高质量做好护理工作。病人产生了良好的心理效应，切实提高了老年病人住院期间的生活质量。
- 刘薇群王早娥斯小明田颖
- 关键词：美学老年病护理护理心理学
- 变性高效液相色谱检测乳腺癌患者血浆线粒体D环HVR2突变被引量：4
- 2003年
- 目的 :探讨扩增乳腺癌患者血浆线粒体DNA(mito chondrialDNA ,mtDNA)的可行性 ,研究乳腺癌患者血浆线粒体DNA基因突变检测对于乳腺癌早期诊断及其预后的意义 .方法 :选取乳腺癌患者 10例 ,正常健康者 10人 ,提取血浆DNA ,采用聚合酶链反应 (PCR)扩增血浆线粒体DNA的D环HVR2 ,用两对引物扩增 ,用变性高效液相色谱法 (DHPLC)对产物进行突变筛选 .结果 :10例乳腺癌患者血浆提取的DNA能扩增出 11个目的片断 ,DHPLC检测到有 4例突变 ,正常健康者 10人扩增出 1例 .结论 :乳腺癌患者血浆DNA扩增与正常组有明显差异 (P <0 .0 5 ) 。
- 靳斌任军张亮汪海丹白俊张燕军斯小明潘伯荣
- 关键词：乳腺肿瘤线粒体血浆色谱法
- 乳腺癌患者血浆线粒体D环高变区基因突变研究被引量：1
- 2005年
- 目的:研究检测血浆线粒体DNA基因突变对于乳腺癌诊断的参考价值。方法:选取乳腺癌患者35例,健康 对照者10人,提取血浆DNA,设计两对引物,采用聚合酶链反应(PCR)扩增血浆线粒体DNA的D环HVR1和HVR2,然后用 变性高效液相色谱法(DHPLC)对产物进行突变筛选。结果:乳腺癌患者的血浆DNA扩增率(46/140)和筛选的突变率(5/46) 与对照组比较,差异具有显著性(P<0.05)。结论:检测血浆线粒体DNA基因突变可能对于乳腺癌的诊断具有重要意义。
- 靳斌任军张亮汪海丹白俊张利旺斯小明
- 关键词：乳腺癌血浆DNA线粒体DNA变性高效液相色谱法
- 变性高效液相色谱检测恶性肿瘤患者血浆 DNA p53突变(英文)被引量：6
- 2002年
- 目的 探讨扩增恶性肿瘤患者血浆 DNA的可行性 ,建立一种快速检测血浆 DNA突变的新方法 .方法 选取恶性肿瘤患者共 4 0例 ,采用 Qiagen column柱抽提法提取血浆DNA,采用聚合酶链反应 (PCR)扩增 p5 3基因外显子 7,用变性高效液相色谱法 (DHPL C)对产物进行突变分析 ,并与测序结果比较 .结果 4 0例恶性肿瘤患者血浆提取的 DNA均能扩增出目的片断 ,DHPL C检测到有 8例突变 ,随机送检的 8份 DHPL C未检测到突变者测序也未发现突变存在 ,与 DNA直接测序结果相一致 .结论 对恶性肿瘤患者血浆 DNA行PCR扩增是可行的 ,DHPL C可作为一种快速 ,简便和经济的突变筛选方法 ,运用此方法检测血浆中 p5 3等基因的突变有望应用于恶性肿瘤高危人群的预警和早期诊断以及作为预后参考 .
- 汪海丹任军吕韶敏斯小明潘伯荣
- 关键词：变性高效液相色谱恶性肿瘤血浆DNA突变
- 腺病毒介导的HBsAg基因修饰树突状细胞抗HBV相关肝癌免疫治疗的实验研究
- 目的:探讨HBsAg作为HBV相关肝癌基因治疗和免疫治疗靶点的可行性以及应用腺病毒介导HBsAg基因修饰树突状细胞瘤苗对表达HBsAg肝细胞癌的免疫治疗的效果。方法:将HBsAg基因亚克隆到pIND载体和Shuttle2...
- 杨静悦刘文超曹大勇斯小明
- 关键词：树突状细胞免疫治疗
- 文献传递
- HBsAg基因修饰的树突状细胞体外诱导抗HepG2.2.15特异性细胞毒作用被引量：5
- 2004年
- 背景与目的目前缺少一种针对乙型肝炎病毒感染相关肝癌的有效免疫治疗手段。以树突状细胞(dendriticcell,DC)为基础的肿瘤特异性免疫治疗方法,为免疫治疗乙型肝炎病毒感染相关的肝癌提供了新方法。本实验通过体外负载乙型肝炎表面抗原基因(HBsAg)的重组质粒转染DC,制备HBsAg-DC瘤苗,评价HBsAg-DC瘤苗体外诱导抗HepG2.2.15的细胞毒性T淋巴细胞反应。方法将已构建含HBsAg基因的重组质粒pCR3.1-S转染培养第5天的DC;Westernblot和免疫荧光法鉴定转染基因表达;以MTT法测定DC诱导的抗HepG2.2.15特异性细胞毒作用。结果细胞表型鉴定结果显示诱导5天的DCCD1a、CD11c、CD86、CD80和HLA-DR表达量分别为55.0%、98.6%、86.1%、66.1%和88.9%;采用免疫荧光和Westernblot法研究表明HBsAg基因能在转染的DC中表达;MTT法检测特异性细胞毒作用结果显示不同效靶比,pCR3.1-S转染DC组均显示对HepG2.2.15肝癌细胞高效特异的杀伤活性,杀伤率分别为(52.3±2.8)%(E∶T为5∶1)、(64.6±2.4)%(10∶1)、(78.8±2.6)%(20∶1)、(82.1±2.4)%(40∶1),显著高于pCR3.1-DC组和DC组(P<0.05,n=4)。结论重组质粒转染的DC能够有效表达HBsAg;并在体外诱导出特异性CTL反应。
- 杨静悦任军白俊刘都户范黎斯小明腾增辉杨文涛
- 关键词：树突状细胞T淋巴细胞
- 玻璃体切割治疗外伤性眼内炎护理被引量：2
- 2000年
- 目的 :评估玻璃体切除术治疗外伤性眼内炎的临床效果。方法 :复习 1996年 6月～ 1998年 6月连续治疗的6 2例 (6 2只眼 )外伤性眼内炎患者。术式包括晶体切除、玻璃体切除、地塞米松和庆大霉素眼内灌注、眼内异物摘除、联合眼内激光光凝或巩膜外环扎及视网膜复位术。结果 :随访 6～ 2 4个月 ,平均 16个月 ;6 2例眼内感染全部控制。 5 8例的视力有提高或保存了原有的视力 ;4例眼球萎缩。术后 8例发生视网膜脱离 ,6例行Ⅱ期视网膜复位术 ,联合硅油注入术 ,术后视网膜复位 ,其中 2例硅油取出后视网膜再脱离。结论
- 王金兰斯小明
- 关键词：玻璃体切割术外伤性眼内炎护理
