徐明旭
- 作品数：16 被引量：34H指数：4
- 供职机构：北京大学更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金教育部科学技术研究重点项目首都医学发展科研基金更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学农业科学更多>>
- 应用nested和touch down PCR技术分离牦牛CAPN1大亚基基因EST被引量：7
- 2005年
- 钙激活中性蛋白酶1(CAPN1)基因是影响肉嫩度的侯选基因。根据GeneBank中已公布的CAPN1基因cDNA序列设计同源PCR引物,通过RT,nested和touch-downPCR技术从牦牛肌肉组织总RNA中分离目的序列,与pGEM-T-easy载体连接后转化DH5α感受态菌株,通过PCR扩增、限制性酶切和测序分析鉴定阳性克隆。分离到的基因片段为牦牛CAPN1大亚基的部分编码序列,在GeneBank中的注册号为AY197555,与奶牛、人、食蟹猴、小鼠、绵羊以及大鼠相应序列的同源性分别为98%,89%,89%,83%,96%和81%,在不同物种之间具有较强的保守性。CAPN1基因EST的分离为进一步研究牦牛CAPN1基因奠定了基础。此研究表明,在总RNA质量不理想的情况下,同时采用这2种技术可以较大限度地获取目的序列。
- 蔡欣吴建平徐明旭张利平汪虹英刘雅楠
- 关键词：PCR牦牛
- CKLFSF1基因与CKLFSF2基因间存在的顺式作用元件被引量：5
- 2003年
- 探讨趋化素样因子超家族成员 1,2基因 (CKLFSF1基因与CKLFSF2基因 )间的短序列对其下游基因表达的调控作用 .运用PCR技术扩增CKLFSF1基因与CKLFSF2基因间的序列 ,将此片段插入含有萤光素酶 (luciferase)报告基因载体上 .以磷酸钙介导基因转染技术 ,将重组质粒以及阴性和阳性对照组质粒转染到HeLa细胞 ,进行瞬时表达分析 .在pGL3 Basic质粒中的报告基因萤光素酶无表达 ,但将CKLFSF1与CKLFSF2基因间的序列插入到启动子上游或下游后 ,显著抑制其下游基因的表达 ,萤光素酶活性明显降低 .结果提示 ,CKLFSF1与CKLFSF2基因间的序列不具有启动子活性 。
- 徐明旭程宁杨松桦王莺芮珉丁培国张颖妹刘雅楠王露韩文玲
- 关键词：顺式作用元件趋化素样因子基因调控萤光素酶
- 子宫内膜癌细胞中[^(12)Asp]K-ras4B基因对雌激素受体亚型转录活性的影响被引量：3
- 2004年
- 目的 探讨人子宫内膜癌细胞株HEC 1A细胞ras基因第 12密码子中突变型 (即[12 Asp]K ras4B基因 )对雌激素受体 (ER)及其亚型α、β蛋白的表达和转录活性的影响。 方法 ( 1)用蛋白免疫印迹法检测 [12 Asp]K ras4B基因对ERα、ERβ蛋白表达的影响。 ( 2 )构建含荧光素酶报告基因和ER反应元件 (ERE)的真核表达质粒 pGL3 ERE luciferase ,与表达绿色荧光蛋白的 pEGFP N1质粒共同转染鼠成纤维细胞株NIH3T3细胞及HEC 1A细胞 ,观察雌二醇调节 [12 Asp]K ras4B基因对ER的转录活性 ;分别转染含有全长野生型ERαcDNA的 pSV5 HER0和抑制raf基因的 pCMV rafS6 2 1A ,探讨 [12 Asp]K ras4B/raf信号通路对ER转录活性的调节作用。 结果 ( 1)NIH3T3细胞转染 pcDI [12 Asp]K ras4B质粒与转染空载体 pcDI质粒比较 ,ERα表达水平增加 3 6倍 (分别为 97± 2 5和 349± 6 7,P <0 0 1) ,ERβ增加 1 9倍 (分别为 12 8± 37和 2 4 9± 30 ,P <0 0 5 )。 ( 2 ) pCMV rafS6 2 1A质粒分别转染到含 pcDI [12 Asp]K ras4B质粒的NIH3T3细胞和HEC 1A细胞 ,转染前、后NIH3T3细胞ERα蛋白表达水平分别为 72 4± 4 5和 310± 4 6 (P <0 0 5 ) ,ERβ蛋白表达水平分别为 4 93± 2 0和2 84± 2 0 (P <0 0 1) ;转染前、后HEC
- 桂黎明魏丽惠徐明旭王建六钟英成李小平屠铮孙蓬明马大龙
- 具有骨骼肌刺激活性和免疫调节作用的趋化素样因子超家族
- 本发明涉及新的具有骨骼肌刺激活性和免疫调节作用的趋化素样因子超家族的核苷酸序列与氨基酸序列，生产趋化素样因子超家族的方法及含有趋化素样因子超家族的载体与宿主细胞。本发明还涉及趋化素样因子超家族成员的抗体，含有趋化素样因子...
- 韩文玲马大龙丁培国夏东岚徐明旭王露芮珉邱晓彦王应石爽刘雅楠陈英玉张颖妹宋泉声
- 文献传递
- 雌激素受体α和β及其变异体在子宫内膜癌组织的表达被引量：1
- 2001年
- 目的 :比较雌激素受体两种亚型α和 β及其变异体在子宫内膜癌组织的表达 ,验证子宫内膜癌发生的双受体学说 ,为寻找新的有治疗和 /或预防子宫内膜癌的雌激素拮抗剂提供理论依据。方法 :用RT PCR、DNA测序和限制性内切酶酶切鉴定等方法分析子宫内膜癌和正常子宫内膜组织雌激素受体及其变异体mRNA的表达。结果 :(1)与正常子宫内膜组织比较 ,子宫内膜癌组织ERα及其变异体与ERβ的共表达率分别为 34 %和 6 7% ,差异有显著性 ,(P <0 .0 5 ) ;(2 )ERαmRNA在子宫内膜癌组织的相对表达水平为 0 .880± 0 .16 8,ERβmRNA为0 .5 5 3±0 .10 8,差异显著 (P <0 .0 5 ) ;(3)在正常子宫内膜和子宫内膜癌组织中未检测出ERβ变异体。 (4 )野生型 (wild type ,wt)ERαmRNA表达水平较各类△ERαmRNA表达高 (P <0 .0 5或 0 .0 1) ;(5 )ERα变异体的类型包括△ 2ERα单独缺失、△ 4ERα和△ 5ERα的联合缺失、△ 7ERα的单独缺失以及△ 7ERα和部分△ 8ERα的联合缺失 ,在正常子宫内膜和子宫内膜癌组织无区别。结论 :(1)子宫内膜癌的发生受wtERβ和wtERα及其变异体的共调节 ;(2 )子宫内膜癌组织ERα的表达水平明显高于ERβ ,而且ERα有 4种剪接形式 ,推测子宫内膜癌的发生与ERα关系更密切。
- 桂黎明魏丽惠狄春晖王建六屠铮徐明旭马大龙
- 关键词：雌激素子宫内膜肿瘤雌激素Α受体雌激素Β受体
- 大鼠肝脏癌前病变组织线粒体谷胱甘肽S-转移酶的纯化及其部分性质
- 1990年
- 本文分离纯化了正常大白鼠肝脏和癌前病变大白鼠肝脏组织线粒体谷胱甘肽S-转移酶(GST),对其部分性质进行了探讨。经O-(二乙胺基乙基)-纤维素、羟基磷灰石,羧甲基-琼脂糖6B(CM-Sapharose 6B)柱层析以及等电聚焦电泳法,从正常肝组织和癌前病变肝组织中,分离纯化了两种不同性质的GST,暂命名为线粒体GST_1和线粒体GST_2。通过十二烷基磺酸钠(SDS)-聚丙烯酰胺凝胶电泳法和等电聚焦电泳法测定的线粒体GST_1的分子量约为23000,等电点为6.2,线粒体CST_2的分子量约为45000,等电点为9.1。在正常组织和癌前病变组织中CST同工酶无质上的差异。但是,线粒体GST_1在癌前病变组织中的活性明显著高于正常对照组(P<0.01)。
- 徐明旭尹宗柱
- 关键词：肝脏癌前病变线粒体GST
- 人程序性细胞死亡分子5基因以及趋化素样因子1基因上游序列的克隆及表达调控的研究
- 人类凋亡相关基因TFAR19(TF-1apoptosis related gene,TFAR19)是该室1999年克隆的与凋亡相关的新基因,国际人类基因命名委员会将其命名为程序性细胞死亡分子5(programmed ce...
- 徐明旭
- 电脉冲介导hIL-10基因转移治疗骨关节炎的实验研究被引量：4
- 2003年
- 目的 研究电脉冲介导人白细胞介素10裸质粒肌肉注射对骨关节炎的治疗作用。方法 兔右膝关节髌旁内侧切口,行内侧半月板切除术制作骨关节炎模型,4周后按分组于右侧股四头肌注射pcDI或pcDI-IL10质粒,然后立即于注射部位施以电压200v(电极间距离为1cm),波宽40ms,脉冲次数6次和频率1Hz的电脉冲。共注射2次,每次间隔2周。按分组情况分别于术后4周、8周处死动物,行解剖显微镜观察及关节软骨、滑膜病理检查。结果 pcDI-IL10质粒注射组的关节软骨破坏程度较注射pcDI组轻(P<0.01),而较4周处死组稍重。结论 电脉冲介导肌肉pcDI-IL10转移可以延缓骨关节炎的发展。
- 程爱新娄思权徐明旭马大龙
- 关键词：骨关节炎白细胞介素10基因治疗
- 牦牛MT-Ⅰ/-Ⅱ cDNA分子克隆及其蛋白质结构分析被引量：6
- 2005年
- 利用基因特异引物YMTSP1和YMTSP2,通过RT-PCR从牦牛肝脏组织RNA中克隆出了牦牛 MT-Ⅰ(Genbank Accession No:AY513744)和MT-Ⅱ(Genbank Accession No:AY513745)基因编码区全 长。将牦牛MT-Ⅰ和MT-Ⅱ cDNA序列在CBI上进行同源性搜索发现,牦牛MT-Ⅰ/-Ⅱ编码区序列在 不同哺乳动物中相当保守。牦牛MT-Ⅰ和MT-Ⅱ编码的MT-Ⅰ和MT-Ⅱ蛋白分别由61个氨基酸组 成,其具有保守的短肽结构如:C-X-C,C-C-X-C-C,C-X-X-C等,其决定MT蛋白分子的整个三维结 构,在分子进化上十分保守。同时对牦牛MT的疏水性和跨膜区分析表明,牦牛MT蛋白可能不 存在跨膜区,也不存在信号肽,是1种非分泌蛋白。并通过同源比较模建,预测和构建了牦牛 MT-Ⅰ和MT-Ⅱ蛋白的分子空间结构,表明牦牛MT-Ⅰ和MT-Ⅱ由α-和β-两个结构域组成,在α-结构 域含有5个Cys短肽结构,β-结构域有4个Cys短肽结构,且2个结构域由保守的三肽序列KKS 相连。
- 马彬云任宏伟吴建平徐明旭张利平向云贺鹏飞蔡欣
- 关键词：蛋白质结构分析牦牛CDNA序列基因编码区CYSMT
- 具有骨骼肌刺激活性和免疫调节作用的趋化素样因子超家族
- 本发明涉及新的具有骨骼肌刺激活性和免疫调节作用的趋化素样因子超家族的核苷酸序列与氨基酸序列，生产趋化素样因子超家族的方法及含有趋化素样因子超家族的载体与宿主细胞。本发明还涉及趋化素样因子超家族成员的抗体，含有趋化素样因子...
- 韩文玲马大龙丁培国夏东岚徐明旭王露芮珉邱晓彦王应石爽刘雅楠陈英玉张颖妹宋泉声
- 文献传递
