刘雅楠
- 作品数：16 被引量：36H指数：4
- 供职机构：北京大学更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金国家高技术研究发展计划教育部科学技术研究重点项目更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学更多>>
- 应用nested和touch down PCR技术分离牦牛CAPN1大亚基基因EST被引量：7
- 2005年
- 钙激活中性蛋白酶1(CAPN1)基因是影响肉嫩度的侯选基因。根据GeneBank中已公布的CAPN1基因cDNA序列设计同源PCR引物,通过RT,nested和touch-downPCR技术从牦牛肌肉组织总RNA中分离目的序列,与pGEM-T-easy载体连接后转化DH5α感受态菌株,通过PCR扩增、限制性酶切和测序分析鉴定阳性克隆。分离到的基因片段为牦牛CAPN1大亚基的部分编码序列,在GeneBank中的注册号为AY197555,与奶牛、人、食蟹猴、小鼠、绵羊以及大鼠相应序列的同源性分别为98%,89%,89%,83%,96%和81%,在不同物种之间具有较强的保守性。CAPN1基因EST的分离为进一步研究牦牛CAPN1基因奠定了基础。此研究表明,在总RNA质量不理想的情况下,同时采用这2种技术可以较大限度地获取目的序列。
- 蔡欣吴建平徐明旭张利平汪虹英刘雅楠
- 关键词：PCR牦牛
- CKLFSF1基因与CKLFSF2基因间存在的顺式作用元件被引量：5
- 2003年
- 探讨趋化素样因子超家族成员 1,2基因 (CKLFSF1基因与CKLFSF2基因 )间的短序列对其下游基因表达的调控作用 .运用PCR技术扩增CKLFSF1基因与CKLFSF2基因间的序列 ,将此片段插入含有萤光素酶 (luciferase)报告基因载体上 .以磷酸钙介导基因转染技术 ,将重组质粒以及阴性和阳性对照组质粒转染到HeLa细胞 ,进行瞬时表达分析 .在pGL3 Basic质粒中的报告基因萤光素酶无表达 ,但将CKLFSF1与CKLFSF2基因间的序列插入到启动子上游或下游后 ,显著抑制其下游基因的表达 ,萤光素酶活性明显降低 .结果提示 ,CKLFSF1与CKLFSF2基因间的序列不具有启动子活性 。
- 徐明旭程宁杨松桦王莺芮珉丁培国张颖妹刘雅楠王露韩文玲
- 关键词：顺式作用元件趋化素样因子基因调控萤光素酶
- CMTM5:一个新的潜在抑癌基因
- CMTM是我室在国际上首次报道的一个新基因家族,在人类,该家族包括9个基因,即:CKLF(Chemo- kine-like Factor)和CMTM1-8(CKLF-like MARVEL transmembrane d...
- 邵陆宁刘雅楠王彧李婷张培孙嘉明韩文玲马大龙
- 文献传递
- 人凋亡相关基因TFAR19缺失突变体的原核表达、产物纯化及鉴定被引量：16
- 2002年
- 构建TF 1细胞凋亡相关基因 19(TF 1cellapoptosisrelatedgene 19,TFAR19)缺失突变体的原核表达载体 ,获取缺失突变体蛋白 ,用于TFAR19促凋亡分子机理的研究 .从真核表达载体pcDI TFAR19扩增出野生型TFAR19和 4个缺失突变体 ,重组到原核表达载体pGEX 4T 2 .经亲和层析方法对缺失体蛋白进行纯化后 ,再利用凝胶过滤的方法进一步纯化 .利用抗GST和抗TFAR19的单克隆抗体对蛋白进行免疫学鉴定 .用白血病细胞株HL 6 0检测蛋白活性 .成功地克隆并重组了野生型TFAR19及缺失突变体 pGEX 4T 2表达载体 ,对融合蛋白的表达条件进行了优化 .SDS PAGE结果显示 ,各个缺失突变体融合蛋白均有较高水平的表达 .免疫学检测证实获得了正确的表达产物 .活性检测证实 ,野生型TFAR19和缺失突变体 4可以明显促进去血清诱导的HL 6 0细胞凋亡 ,第
- 李现亭莫晓宁夏东岚刘雅楠宋泉声张颖妹马大龙
- 关键词：原核表达产物纯化GST
- 具有多种功能的细胞因子
- 本发明涉及一种编码如SEQ ID NO：2所示氨基酸序列或其片段的多核苷酸，含有所述多核苷酸的基因工程载体和宿主细胞。同时，本发明涉及一种如SEQ ID NO：2所示的氨基酸序列或其片段的多肽及多肽的生产方法。本发明还涉...
- 韩文玲马大龙石爽王应邱晓彦刘雅楠李婷钟英成钟吉张颖妹宋泉声
- 文献传递
- 具有多种功能的多肽
- 本发明涉及如SEQ ID NO：2所示氨基酸序列的多肽或如SEQ ID NO：2的9-27位氨基酸所示的多肽(统称CKLF1 C末端多肽)，以及编码CKLF1 C末端多肽的多核苷酸，含有所述多核苷酸的基因工程载体和宿主细...
- 王应张颖妹韩文玲马大龙刘雅楠李丹
- 文献传递
- 具有骨骼肌刺激活性和免疫调节作用的趋化素样因子超家族
- 本发明涉及新的具有骨骼肌刺激活性和免疫调节作用的趋化素样因子超家族的核苷酸序列与氨基酸序列，生产趋化素样因子超家族的方法及含有趋化素样因子超家族的载体与宿主细胞。本发明还涉及趋化素样因子超家族成员的抗体，含有趋化素样因子...
- 韩文玲马大龙丁培国夏东岚徐明旭王露芮珉邱晓彦王应石爽刘雅楠陈英玉张颖妹宋泉声
- 文献传递
- 大鼠趋化素样因子1对主动脉平滑肌细胞的趋化作用和增殖促进作用被引量：6
- 2006年
- 目的:探讨大鼠趋化素样因子1(rat chemokine-like factor 1,rCklf1)对大鼠主动脉平滑肌细胞(aortic smooth muscle cells,ASMC)的趋化作用和促增殖作用。方法:将rCklf1真核细胞表达载体瞬时转染293T细胞,收获培养上清液,分析rCklf1对大鼠ASMC的趋化作用。同时,用3-(4,5-二甲基-2-噻唑)-2,5-二苯基溴化四唑 (MTT)实验分析rCklf1真核细胞表达载体瞬时转染细胞上清液以及rCklf1在细胞内瞬时超表达对ASMC增殖的影响。结果:rCklf1真核细胞表达载体瞬时转染的293T细胞培养上清液对大鼠ASMC具有趋化作用,10倍稀释的转染上清液所趋化的细胞数是对照组的2．2倍,这种趋化作用可以被浓度为10μg／L的百日咳毒素(pertussis toxin, PTX)抑制。同时,rCklf1对ASMC有促增殖作用,10倍稀释的rCklf1真核细胞表达质粒瞬时转染上清液和rCklf1 在细胞内瞬时超表达均可以促进ASMC的增殖,光密度值分别为对照组的1．3和1．5倍。结论:rCklf1对大鼠 ASMC具有促增殖作用和依赖于Gi蛋白偶联受体(Gi protein coupled receptor,GiPCR)的趋化作用,可能参与动脉粥样硬化的病理过程。
- 娄雅欣刘雅楠宋泉声张颖妹
- 关键词：趋化因子类肌细胞平滑肌
- 与前列腺疾病相关的基因及其编码的多肽以及它们的应用
- 本发明涉及一种编码如SEQ ID NO：2所示的多肽(称为CKLFSF5－v1)的多核苷酸、包含该多核苷酸的基因工程载体、宿主细胞以及利用所述宿主细胞生产由本发明的多核苷酸编码的多肽的方法。本发明还涉及一种多肽，其包含如...
- 韩文玲刘雅楠马大龙邱晓彦石爽丁培国李婷钟吉娄雅欣杨田张颖妹宋泉声
- 文献传递
- 与前列腺疾病相关的基因及其编码的多肽以及它们的应用
- 本发明涉及一种编码如SEQ ID NO：2所示的多肽(称为CKLFSF5-v1)的多核苷酸、包含该多核苷酸的基因工程载体、宿主细胞以及利用所述宿主细胞生产由本发明的多核苷酸编码的多肽的方法。本发明还涉及一种多肽，其包含如...
- 韩文玲刘雅楠马大龙邱晓彦张颖妹宋泉声
- 文献传递
