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张琼: 作品数：24 被引量：135H指数：6; 供职机构：华中科技大学同济医学院更多>>; 发文基金：国家自然科学基金国家杰出青年科学基金更多>>; 相关领域：医药卫生生物学更多>>

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抑制HSP70-2基因表达诱导肝癌细胞G_2/M期阻滞的机制研究被引量：3: 2008年; 目的探讨HSP70-2在肝癌组织中的表达,以及抑制HSP70-2表达对肝癌细胞生长和周期影响的详细作用机制。方法免疫组织化学检测HSP70-2在45例肝癌组织和癌旁组织中的表达,Western blot检测HSP70-2在5种肝癌细胞株中的表达。设计合成针对HSP70-2基因的特异性shRNA,构建真核表达载体HSP70-2 shRNA1和HSP70-2 shRNA2。转染肝癌细胞后,MTT法检测细胞增殖,流式细胞仪检测细胞周期,Western blot检测HSP70-2表达及细胞周期相关蛋白p-Cdc2(Tyr15)、Cdc25C、Cdc2和cyclinB1的表达变化。结果免疫组织化学检测显示,45例肝癌组织中有33例(73.3%)HSP70-2蛋白表达阳性,45例癌旁组织中仅4例(8.9%)表达阳性,表达差异有显著性(P<0.05)。HSP70-2蛋白在HepG2、Bel-7402、Huh-7、Hep3B、SMMC-7721肝癌细胞中的表达明显高于其在L02细胞中的表达。HSP70-2 shRNA1和shRNA2均能有效抑制肝癌细胞HepG2和Bel-7402中HSP70-2的表达。与control shRNA组相比,转染HSP70-2 shRNA1和shRNA2组HepG2和Bel-7402细胞生长增殖速度均明显减慢,细胞周期表现为处于G2/M期的细胞比例显著增加。Western blot检测发现,转染HSP70-2 shRNA1和shRNA2后肝癌细胞中磷酸化的p-Cdc2(Tyr15)表达增加,Cdc25C、Cdc2和cyclinB1表达显著减少。结论HSP70-2在肝癌中过表达,抑制HSP70-2表达可以显著抑制肝癌细胞的增殖,诱导细胞周期阻滞,其诱导G2/M期阻滞的机制是通过影响Cdc25C-Cdc2/cyclinB1通路来实现的。; 夏丽敏田德安张琼晏维周珍珍朱倩罗敏张全乐; 关键词：肝癌 RNA干扰细胞周期

沉默热休克蛋白70-2基因经线粒体依赖通路介导肝癌细胞凋亡被引量：5: 2008年; 目的探讨沉默热休克蛋白（HSP）70—2对肝癌细胞生长、凋亡的影响，以及诱导肝癌细胞凋亡的详细作用机制。方法Western blot、免疫细胞化学法检测HSP70—2在4种肝癌细胞和正常肝细胞中的表达。设计合成针对HSP702基因的特异性短发夹状RNA（shRNA），构建真核表达载体HSP70-2 shRNA1和HSP70—2 shRNA2。转染肝癌细胞后，四甲基偶氮唑盐法检测细胞增殖，膜联蛋白／碘化丙啶双染法检测细胞凋亡情况，罗丹明染色检测细胞线粒体跨膜电位变化，Western blot检测多聚ADP-核糖聚合酶、caspase3、caspase-9蛋白切割情况，以及细胞色素C、Bax、Bcl-2蛋白的表达变化。结果HSP702在4种肝癌细胞中均高表达，在L02细胞中仅有微量表达。HSP70-2 shRNA1、shRNA2均能有效抑制肝癌细胞中HSP70—2的表达。沉默HSP70-2基因显著抑制肝癌细胞生长，诱导肝癌细胞凋亡；转染48h后，shRNAl和shRNA2诱导HepG2细胞的凋亡指数分别为55．8％±1．8％和57．1％±1．6%；诱导Huh细胞凋亡指数分别为54．9%±1．1％和60．2％±2．6%，与对照组相比，差异均有统计学意义，P值均〈0．01。转染HSP70—2 shRNA48h后，肝癌细胞线粒体跨膜电位显著下降，细胞色素C从线粒体释放到胞质中，caspase3、caspase-9激活，多聚ADP核糖聚合酶被剪切降解，抗凋亡蛋白Bcl-2表达减少，促凋亡蛋白Bax表达明显增加。结论沉默HSP70-2能通过激活线粒体凋亡通路导致肝癌细胞凋亡。; 夏丽敏田德安张琼晏维王波刘梅黎培员陈斌; 关键词：热休克蛋白细胞凋亡 RNA干扰

人遗传印记基因PEG10重组真核表达质粒的构建及其在转染细胞株中的表达被引量：5: 2007年; 目的构建人遗传印记基因PEG10的全长表达基因质粒,观察PEG10的过表达对人正常肝细胞及其非肝脏来源的对照细胞的作用。方法将PEG10基因全长cDNA直接连入真核细胞表达质粒pcDNA3．1hisC中,以脂质体介导的方法将该表达质粒pcDNA3．1hisC-PEG10转染入人正常肝细胞及其对照细胞,采用RT-PCR、Western blot、MTT、TUNEL等方法分析PEG10基因在正常人肝细胞及其对照细胞中的表达和功能。结果限制性酶切及DNA测序结果均说明所构建质粒为PEG 10全长表达质粒。该质粒经过稳定筛选后稳定表达于细胞内,促进人肝细胞的生长,抑制其凋亡,但对非肝脏来源的对照组细胞没有明显影响。结论PEG10全长表达质粒的构建为进一步研究PEG10基因的效应和机制提供了有利的工具,研究结果显示PEG10基因可以促进人正常胚肝细胞增殖并抑制其凋亡,但对非肝脏来源的对照组细胞人胚肾细胞株293细胞没有明显效应。; 张琼谢娜王晓燕常莹林园园林菊生; 关键词：转染质粒

脑活素对豚鼠庆大霉素耳毒性拮抗作用及机理的实验研究: 张帆李再香曹永茂叶菁熊杰张琼林凌; 该课题通过建立豚鼠庆大霉素耳毒性模型及脑活素拮抗模型，测试听性脑干电位，反映听力阈值；耳蜗铺片、切片、毛细胞记数、螺旋神经节细胞记数观察耳蜗细胞病理形态，以确定脑活素有无拮抗作用，运用化学方法观察耳蜗琥珀酸脱氢酶（SDH...; 关键词：; 关键词：脑活素庆大霉素耳毒性拮抗作用

联合检测CA19-9、CEA、CA72-4、MG-Ag对胃癌的诊断价值被引量：30: 2010年; 目的:探讨联合检测CA19-9、CEA、CA72-4、MG-Ag对胃癌的诊断价值.方法:采用电化学发光法联合检测胃癌、胃良性病变、健康体检者血清中CA19-9、CEA、CA72-4、MG-Ag浓度,并进行统计学分析.结果:胃癌组患者血清中CA19-9、CEA、CA72-4、MG-Ag的含量均明显高于良性胃病组及健康对照组,差异有统计学意义(P<0.05),联合检测血清CA19-9、CEA、CA72-4和MG-Ag对胃癌诊断敏感性为65.2%,特异性为92.9%,有效性为72.1%,与单项检测胃癌敏感性、特异性和有效性相比较,差异有统计学意义(P<0.05).结论:联合检测血清中CA19-9、CEA、CA72-4、MG-Ag含量可提高胃癌的诊断敏感性.; 周琦张琼魏来; 关键词：胃癌糖类抗原19-9 糖类抗原72-4 胃癌相关抗原

乙型肝炎病毒启动子调控的增强型绿色荧光蛋白真核表达载体的构建与表达被引量：10: 2006年; 目的研究乙型肝炎病毒(HBV)启动子(含增强子)调控下的增强型绿色荧光蛋白(EGFP) 报告基因在肝癌细胞中的表达。方法用聚合酶链反应(PCR)技术分别扩增出HBV的4个启动子,载入 T载体,测序后插入到含EGFP报告基因的质粒pEGFP-1,构建出HBV不同启动子调控的EGFP基因表达载体,经酶切、测序鉴定各重组体。采用脂质体介导法将4种构建好的载体转染肝癌细胞株H e p G 2,用倒置荧光显微镜观察各重组体转染细胞中EGFP的表达。结果各目的片段测序正确并成功插入表达载体中, 转染了各质粒的阳性细胞克隆均可检测出E G F P的表达,不同启动子调控下的蛋白表达量有所不同。结论 H B V启动子调控下的E G F P报告基因能够在肝癌细胞中特异表达,不同启动子表达效率之间存在一定的差异性,从而为肝脏疾病的基因治疗提供了一个新的选择。; 谢娜王晓燕张琼林园园林菊生; 关键词：启动区增强型绿色荧光蛋白

PEG10基因在不同转移潜能肝癌细胞中表达的定量分析被引量：12: 2006年; 目的通过对不同转移潜能的肝癌细胞株中PEG10基因(parternal express gene 10)表达水平的定量分析,探讨其作为肝癌转移基因的可能性。方法提取肝癌细胞株HepG2、MHCC-97L、MHCC-97H的RNA,反转录合成第一链cDNA,对反转录产物进行荧光定量PCR。用管家基因-βactin的cDNA起始浓度作为参照标化PEG10的cDNA起始浓度,对标化结果进行方差分析。结果HepG2、MHCC-97L、MHCC-97H标化后的PEG10 cDNA相对起始浓度分别为(3.15±0.05)×10-3(、5.06±0.03)×10-3(、6.14±0.09)×10-3,各肝癌细胞系之间PEG10表达量差异也存在极显著性意义(P<0.01)。结论PEG10基因表达水平与肝癌细胞的转移潜能呈正相关,可以推测PEG10基因可能是促使肝癌转移的癌基因。; 张琼叶达伟常莹宋宇虎谢娜王晓燕林菊生; 关键词：肝癌肿瘤转移荧光定量PCR

Tbx2蛋白在胰腺癌组织和细胞中的表达及其意义被引量：7: 2007年; 目的检测Tbx2蛋白在胰腺癌组织及细胞中的表达,并探讨Tbx2表达与胰腺癌临床和病理的关系。方法运用免疫组化SP法,检测13例正常胰腺组织和49例胰腺癌组织中Tbx2蛋白的表达,并分析其表达水平与胰腺癌临床病理因素间的关系;采用RT-PCR和Western印迹检测Tbx2在胰腺癌细胞株SW1990中的表达。结果癌组织中Tbx2表达率(34/49,69.4%)高于正常胰腺组织(1/13,7.7%),P<0.01;Tbx2的表达水平与肿瘤细胞分化程度、TNM分期有关,与患者性别、年龄以及肿瘤发生部位无关;胰腺癌细胞株SW1990中亦有Tbx2表达。结论Tbx2蛋白在胰腺癌组织和细胞中表达水平特异性升高,并与肿瘤细胞分化程度、TNM分期有关。Tbx2参与了胰腺癌的发生发展。; 陈平田德安刘梅张琼但自力杨玉珍刘南植; 关键词：胰腺癌 TBX2 免疫组化 SW1990

Barrett食管在增强放大内镜下黏膜象与病理关系的研究被引量：5: 2007年; 目的探讨增强放大内镜对 Barrett 食管的诊断价值。方法对40例疑诊为 Barrett 食管的患者使用2%～3%乙酸喷洒于食管下端,然后使用放大内镜观察并根据黏膜象进行活检。所有活检切片均由高年资病理专家在单盲情况下进行阅片。结果参考2003年 Toyoda 在增强放大内镜下的分型黏膜象共有3型:Ⅰ型小圆型7例(17.5%),其中5例病理为胃底型(71.4%);Ⅱ型网格型24例(60.0%),其中16例病理为胃底型(66.7%);Ⅲ型脑回/绒毛型9例(22.5%),病理均为肠上皮化生或异型增生。Ⅲ型黏膜象与病理的符合率高。结论使用增强放大内镜对食管远端进行详细黏膜象观察与病理检查结果有较高符合率,有助于对 Barrett 食管肠上皮化生和异型增生的诊断。; 梅凡田德安但自力柯昌庶覃华廖家智王波吴小力张琼何春萍; 关键词：BARRETT食管肠上皮化生异型增生

蓝色橡皮泡痣综合征1例及文献分析被引量：4: 2008年; 蓝色橡皮泡痣综合征是一种存在于皮肤和胃肠道两方面的海绵状或毛细血管状血管瘤的罕见疾病。其发生率仅为1∶14000。1958年由BEAN首先描述,故亦称Bean综合征。; 张琼田德安廖家智覃华但自力刘南植; 关键词：内镜血管瘤皮肤消化道

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