张奇军
- 作品数：7 被引量：7H指数：2
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- P19细胞向心肌细胞分化过程中FABP3基因表达的变化被引量：3
- 2008年
- 目的观察脂肪酸结合蛋白（FABP3）基因在胚胎癌细胞（P19细胞）向心肌细胞诱导分化过程中表达水平的变化，探讨FABP3基因与心肌细胞分化之间的关系。方法P19细胞经1％二甲基亚砜（DMSO）诱导至第15天，用肌钙蛋白I（cTnI）抗体行蛋白质斑迹法（Western blot）鉴定心肌细胞分化，并采用逆转录聚合酶链反应（RT-PCR）、Western blot技术检测FABP3基因mRNA和蛋白的表达水平。结果诱导的P19细胞于第8天出现自发性节律跳动，Western blot检测cTnI蛋白呈阳性。在P19细胞分化过程中，FABP3基因mRNA表达呈先下调（0～6d）后再逐渐上调（5～15d）的表达模式，每隔两个时间点均有显著差异（P〈0．05）；FABP3蛋白也呈现相同的表达模式，但其表达水平在0～4d间无显著差异（P〉0．05）。结论FABP3基因可能参与心肌细胞的分化。
- 张奇军郭英杰钱玲梅孔祥清曹克将
- 关键词：细胞分化
- 1a，25（OH）2D3对心肌细胞生物钟基因表达的影响
- 2016年
- 目的探讨1a，25（OH），D，对心肌细胞生物钟基因Bmal!mRNA、Per2mRNA和Rev—erbamRNA表达的影响。方法分离培养7H龄SD大鼠乳鼠心肌细胞，并用免疫荧光法鉴定。原代心肌细胞培养72h后，设置1a，25（OH）：D，5个终浓度梯度即0nmol／L、1nmol／L、10nmol／L、50nmol／L和100nmol／L处理心肌细胞2h，然后提取细胞RNA，实时荧光定量PCR（RT—PCR）检测生物钟基因（BmalI、Per2、Rev—erba）表达量变化，以确定1a，25（OH）：D，最佳处理浓度。再将培养72h的原代心肌细胞分为3组，对照组：无血清培养基培养；血清休克组：含体积分数50％马血清的DMEM培养2h；1a，25（OH）2D3处理组：最佳1a，25（OH）2D3浓度培养2h。分别于7个时间点（0h、4h、8h、12h、16h、20h、24h）收集细胞，提取细胞总RNA，再采用RT-PCR分析心肌细胞生物钟基因（Bmall，Per2，Rev—erba）的转录水平。结果1a，25（OH）：D，培养浓度为50nmol／L时，BmallmRNA表达水平最高，Per2和Rev—erbamRNA表达水平最低。与对照组相比，1a，25（OH）：D，处理组和血清休克组均引起心肌细胞Bmall、Per2和Rev—erba基因呈日周期的节律振荡，且Bmall和Per2的表达模式呈相反的时相表达，在12h时Bmall的表达量出现在波峰，而nr2的表达量出现在波谷。Rev—erba的表达变化趋势在8h开始上升，在12～16h出现最高表达量。结论1a，25（OH）2D3可影响心肌细胞生物钟基因Bmall、nr2和Rev—erbamRNA表达。
- 陈玉梅范燚李杏李华吴丽洁张奇军程子杰钱玲梅
- 关键词：心肌细胞生物钟生物钟基因
- FABP3基因与心肌细胞分化关系的研究
- 第一部分
目的：观察脂肪酸结合蛋白(Fat acid binding protein-3，FABP3)基因在畸胎瘤细胞P19细胞向心肌细胞诱导分化过程中表达水平的变化，探讨FABP3基因与心肌细胞分化之间的关系...
- 张奇军
- 关键词：心肌细胞诱导分化细胞增殖细胞凋亡
- 文献传递
- FABP3对P19细胞增殖的影响及其生物信息学分析被引量：1
- 2011年
- 目的探讨脂肪酸结合蛋白(FABP)3基因过表达对P19细胞分化、增殖的影响及FABP3基因的生物信息学特征。方法构建FABP3过表达载体及相应的空载体,转染P19细胞,经0.9%二甲基亚砜(DMSO)诱导分化为心肌细胞,定量PCR检测肌钙蛋白T(cTnT)和转录调控因子GATA4基因的表达,MTT法检测P19细胞增殖,应用在线数据库软件分析FABP3的核苷酸基本特征、蛋白质理化性质、亚细胞定位等。结果与空载体相比,FABP3基因过表达能抑制cTnT、GATA4 mRNA表达及P19细胞增殖(P<0.05或P<0.01)。生物信息学分析显示,FABP3基因mRNA全长1097 bp,开放阅读框长402 bp,编码133个氨基酸,相对分子质量为14 858 Da,蛋白主要位于胞浆。结论 FABP3基因过表达显著抑制心肌细胞分化、增殖,生物信息学分析为进一步研究该基因奠定了基础。
- 沈亚卉刘垚秋胡德亮张奇军孔祥清钱玲梅
- 关键词：P19细胞生物信息学
- 长链非编码RNA-uc．167的生物信息学特征及其对小鼠心脏发育的时空表达规律被引量：2
- 2016年
- 目的探索长链非编码RNA（1ncRNA）-uc．167基本生物学特征，及uc．167在小鼠心脏发育过程中的空间分布特征、时间表达规律。方法利用生物信息学软件ENCODE UCSC genomebrowser预测uc．167的基本结构和功能。取不同阶段（孕7．5、11．5、14．5、18．5d）的胚胎小鼠心脏，使用实时荧光定量（RT）-PCR方法检测uc．167及邻近基因在心肌组织中的表达情况，并采用原位杂交技术检测UC．167在心肌组织的分布情况。采用二甲基亚砜方法诱导P19细胞向心肌细胞方向分化，采用RT-PCR方法检测分化过程中（d0、d4、d6、d8、d10）UC．167及邻近基因的表达变化。结果人uc．167全长201bp，定位于基因组5q14．3（chr5：88179623-88179824，GRCh37／hgl9），根据lncRNA分类原则，属Intronic antisense lncRNA；uc．167主要表达于心室肌组织内；uc．167在小鼠胚胎发育过程的表达水平逐渐下调（7．5d：1．000±0．100，11．5d：0．714±0．107，14．5d：0．393±0．043，18．5d：0．125±0．013），而Mef2c的表达水平逐渐上调（7．5d：1．081±0．118，11．5d：2．340±0．351，14．5d：3．958±0．542，18．5d：9．361±0．722），二者呈相反趋势；在P19细胞向心肌细胞分化的过程中，UC．167呈现“先升后降”的表达模式，在胚胎样小体形成（d4）时表达水平达到最高，而后逐渐下调（d0：1．071±0．117，d4：4．714±0．501，d6：3．572±0．414，d8：2．550±0．314，d10：0．786±0．085），临近基因Mefee的表达变化与其呈相反趋势（d0：1．012±0．041，d4：0．353±0．037，d6：2．470±0．329，d8：6．706±0．682，d10：7．765±0．705）。结论UC．167可能在胚胎小鼠心脏发育中具有一定功能；HC．167可能通过负向调控其邻近基因Mef2c来发挥作用。
- 吴丽洁宋桂仙李杏陈玉梅范燚李华张奇军钱玲梅
- 关键词：生物信息学分析心脏发育长链非编码RNA
- P19细胞向心肌细胞分化过程中FHL1基因的表达变化被引量：3
- 2008年
- 目的:观察FHL1(Four and a half LIM domains protein1)基因在P19细胞向心肌细胞诱导分化过程中表达水平的变化,探讨FHL1基因与心肌细胞分化之间的关系。方法:P19细胞经1%二甲基亚砜(DMSO)诱导悬浮培养4天形成细胞聚集体,将聚集体用生长培养基黏附培养至14天,观察细胞跳动情况,用肌钙蛋白I(cTnI)抗体行Western Blot以鉴定心肌细胞分化,并采用RT-PCR、Western Blot技术在细胞分化成熟的不同时段检测P19细胞中FHL1基因mRNA和蛋白的表达水平。结果:DMSO诱导4天后,用生长培养基黏附培养至第8天,P19细胞出现自发性节律跳动的细胞团片,Western Blot检测cTnI蛋白呈阳性。FHL1基因在P19细胞向心肌细胞分化过程中,随细胞分化成熟该基因表达水平逐渐上调,Western Blot检测结果与RT-PCR检测结果基本一致。FHL1基因在分化第0～8天表达显著增高,各时间点之间差异显著(P<0.05);第8～14天表达趋于稳定,各时间点之间差异无显著性(P>0.05)。结论:FHL1基因在P19细胞向心肌细胞分化过程中表达逐渐上调,可能参与心肌细胞的分化和发育。
- 郭英杰张奇军钱玲梅孔祥清曹克将
- 关键词：P19细胞细胞分化
- 心脏再生相关的内源性多肽的初步研究
- 本文从以下几个部分展开论述： 第一部份 心脏再生相关的内源性多肽的多肽组学分析 目的： 通过检测出生第1天乳鼠（P1）与出生第7天乳鼠（P7）心脏的差异多肽表达谱，为研究心脏再生提供可能的干预靶标。 方法： 1...
- 张奇军
- 关键词：心脏损伤心肌组织
- 文献传递
