- 蛋白激酶Cη转基因过渡表达未引起心肌肥厚和心衰——介绍转基因小鼠体内心功能评价方法被引量：1
- 2004年
- 目的 蛋白激酶Cη(PKCη)转基因对心脏表型的影响。 方法表达低水平 (Tg PKCη L)和高水平 (Tg PKCη H)靶心脏野生型PKCη的转基因小鼠通过标准技术被建立。Tg PKCη L、Tg PKCη H阳性鼠通过PCR和Southern印迹鉴定 ,转基因阴性鼠作为研究对照。用非开胸经颈总动脉插管的显微外科技术测血液动力学指标和评价小鼠左室收缩功能。Western免疫印迹分析α 骨骼肌肌动蛋白 (α \|SkeletalMuscleActin)和PKCη表达水平。苏木精染色进行心脏组织学分析。 结果与对照鼠相比Tg PKCη L、Tg PKCη H鼠基线左室最大收缩压、左室收缩压、最大收缩速率 (dp/dt)、 dp/dt、左室舒张末压、舒张压均无明显变化 (均P >0 0 5 ) ,异丙肾上腺素激发后左室dp/dt剂量依赖的升高无明显抑制 (均P >0 0 5 )。此外 ,Tg PKCη H、Tg PKCη L鼠心脏 /体重比、心肌α 肌动蛋白表达无显著变化 ,(P >0 0 5 ) ,心肌组织学分析表现了正常的心肌细胞形态。结论 低水平和高水平PKCη的转基因过渡表达未导致心肌肥厚、心衰表型的出现。用非开胸经颈总动脉插管的显微外科方法能敏感、准确地评价小鼠左室收缩功能。
- 高玖鸣吴信孔德瀛郑玉庭张军William BillPING Peipei
- 关键词：心肌肥厚心衰转基因小鼠
- 腺病毒介导的心肌蛋白激酶Cε基因转移的心肌保护作用
- 2004年
- 目的 蛋白激酶Cε (ProteinKinaseCε,PKCε)转基因小鼠表现了保护心肌缺血 /再灌注损伤的遗传特性 (心肌保护表型 )。本文旨在研究腺病毒介导的成年小鼠心肌直接的PKCε基因转移对心肌缺血 -再灌注损伤的影响。方法 通过克隆PKCεcDNA到人类 5型腺病毒基因组DNA的E1区建立表达PKCε基因的重组腺病毒。直接注射重组腺病毒 3 3× 10 10 菌落形成单位 (pfu) /体重 (kg)到小鼠 (10～ 13周 ) ,对照鼠被直接注射相同剂量的空载腺病毒。Western免疫印迹被用于测定PKCε蛋白质表达水平。通过冠状动脉阻断 /再灌注、染色、照像和微机计算进行心肌梗死分析。结果 PKCε重组腺病毒直接心肌注射优于静脉注射 ;直接心肌注射后 4 8h ,基因转移鼠心肌PKCε蛋白质表达水平比对照鼠增加近 4倍。心脏重、左室重、危险区重和危险区重 /左室重百分数在PKCε基因转移和对照小鼠之间无显著差异 ,而PKCε基因转移小鼠的梗死重 [(35 4± 3 1)mgvs(10 3±1 3)mg]、梗死 /危险区域百分数 (5 1 1%± 0 3%vs 17 0 %± 2 6 % )、梗死 /左室百分数 (30 0 %±3 0 %vs 9 2 %± 0 5 % )明显低于对照鼠 (均P <0 0 1)。结论 腺病毒介导的、心肌直接的PKCε基因转移小鼠表现了对心肌梗死的保护作用。
- 高玖鸣宋昌旭张军郑玉庭WEAD William Bill PING Peipei
- 关键词：蛋白激酶CΕ基因转移心肌保护再灌注损伤
- 腺病毒介导的心肌蛋白激酶Cε基因转移导致心肌损害被引量：3
- 2006年
- 目的研究腺病毒介导的成年小鼠心肌直接蛋白激酶(PK)Cε基因转移对左心室收缩功能的影响。方法使用标准方法建立表达PKCε基因的重组腺病毒载体。直接注射重组腺病毒到FVB/N和ICR小鼠心肌,对照鼠给予相同剂量空载腺病毒。Western免疫印迹测定PKCε蛋白质表达水平。用非开胸经颈总动脉插管的显微外科技术评价小鼠左心室收缩功能。结果与对照鼠相比基因转移鼠心肌转基因PKCε蛋白质表达水平增加近4倍,基线左心室最大收缩压、最大收缩速率(dP/dt)、-dP/dt明显降低,左心室舒张末压、舒张压明显升高(P<0.01),异丙肾上腺素刺激后左心室dP/dt随剂量递增的依次升高明显抑制(P<0.01),PKCε基因转移鼠心脏质量/体质量比也较对照鼠明显增加(P<0.01)。结论腺病毒介导的、心肌直接的PKCε基因转移诱发了左心室收缩功能降低,导致了心肌肥厚和心力衰竭。
- 高玖鸣宋昌旭张军郑玉庭Wead William BillPing Peipei
- 关键词：基因转移心肌收缩功能
- 腺病毒介导的心肌蛋白激酶Cε基因转移导致心功能损害被引量：1
- 2004年
- 目的 本文旨在研究腺病毒介导的成年小鼠心肌直接PKCε基因转移对左室收缩功能的影响。方法 使用标准方法建立表达PKCε基因的重组腺病毒载体。直接注射重组腺病毒到FVB/N和ICR小鼠心肌 ,对照鼠给予相同剂量空载腺病毒。Western免疫印迹测定PKCε蛋白质表达水平。用非开胸经颈总动脉插管的显微外科技术评价小鼠左室收缩功能。结果 与对照鼠相比基因转移鼠心肌转基因PKCε蛋白质表达水平增加近 4倍 ,基线左室最大收缩压、最大收缩速率 (dP/dt)、 -dP/dt明显降低 ,左室舒张末压、舒张压明显升高 (p <0 0 1) ,异丙肾上腺素激发后左室dP/dt剂量依赖的升高明显减弱 (p <0 0 1) ,PKCε基因转移鼠心脏 /体重比也较对照鼠明显增加 (p <0 0 1)。结论 腺病毒介导的、心肌直接的PKCε基因转移诱发了左室收缩功能的损害 ,导致了心肌肥厚和心衰。
- 高玖鸣宋昌旭张军郑玉庭WEAD William Bill PING Peipei
- 关键词：基因转移心肌收缩功能心衰
