张佳星
- 作品数：4 被引量：22H指数：3
- 供职机构：重庆医科大学附属儿童医院更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- 两种提取铜绿假单胞菌外膜囊泡的方法比较被引量：6
- 2014年
- 目的对两种方法提取的铜绿假单胞菌(PA)的外膜囊泡(OMV)的纯度、产量及外毒素A(ETA)含量进行比较。方法分别采取超滤浓缩法和Optiprep密度梯度离心法提取PA的OMV,负染电镜检测形态及纯度;BCA法检测两种方法提取的OMV产量并用Western blotting对OMV中所含ETA进行比较;建立OMV感染人肺癌上皮细胞A549模型并检测IL-8表达水平。结果超滤浓缩法提取的OMV中存在明显的细胞碎片、鞭毛等杂质,产量为21.3μg/1010个细菌,密度梯度离心提取的OMV无明显杂质存在,产量为48.7μg/1010个细菌;相比于超滤浓缩法,密度梯度离心法提取的OMV中含有更高浓度的ETA且诱导A549细胞产生更高水平的IL-8。结论 Optiripe密度梯度离心法提取的PA的OMV的产量和纯度和ETA含量以及激活宿主细胞炎性应答的能量均高于超滤浓缩法。
- 张佳星沈犁华子瑜刘岚周薇姜俊如
- 关键词：铜绿假单胞菌超滤浓缩密度梯度离心外毒素AIL-8
- 穿心莲内酯对临床铜绿假单胞菌感染人支气管上皮细胞的干预研究被引量：6
- 2013年
- 目的:用铜绿假单胞菌(pseudomonas aeruginosa,PA)感染人支气管上皮细胞BEAS-2B,观察穿心莲内酯对细菌感染性肺炎及其诱发的宿主细胞炎性反应的影响。方法:PA标准株PAO1和临床分离株Cq1(exoU-)及Cq40(exoU+)感染上皮细胞BEAS-2B;体外肉汤培养观察穿心莲内酯(浓度300μmol/L)对细菌生长的影响。侵袭实验、乳酸脱氢酶(lactic dehydrogenase,LDH)释放实验、菌落计数法检测PA对BEAS-2B细胞的侵袭力;ELISA法检测BEAS-2B细胞炎症因子白细胞介素(interleukin,IL)-6、IL-8的表达水平。穿心莲内酯(3.0μmol/L和4.5μmol/L)用于对PA感染人BEAS-2B的干预实验。结果:同PAO1相似,PACq1及Cq40在LB培养基中的生长均不受高浓度(300μmol/L)穿心莲内酯影响。但穿心莲内酯(3.0μmol/L和4.5μmol/L)降低侵入胞内的PA数,减少细菌感染所致的上皮细胞LDH释放,也降低了细菌刺激上皮细胞IL-6及IL-8的表达水平。结论:穿心莲内酯可降低PA临床分离株对人支气管上皮细胞的侵袭力,并可降低细胞损伤及抑制细胞炎症反应。
- 王静华子瑜沈犁张佳星
- 关键词：铜绿假单胞菌穿心莲内酯干预作用
- 不可分型流感嗜血杆菌生物膜体外形成规律及其扫描电镜形态学被引量：1
- 2014年
- 目的:探讨不可分型流感嗜血杆菌(NTHi)生物膜(BF)体外形成规律,采用扫描电子显微镜(SEM)观察BF内部结构。方法:以NTHi标准菌株ATCC49247为研究菌株,以铜绿假单胞菌(PA)标准菌株PAO1为阳性对照菌株,同时设空白对照组,分别培养1、2、3、4、5、6和7d时,使用平板计数法和结晶紫染色法检测BF形成情况,并于3d时采用SEM检测ATCC49247的BF结构。结果:平板计数法检测BF内菌落数,ATCC49247和PAO1培养3d时活菌数逐渐上升至最高,而后逐渐下降,至7d时分别降至(0.829 4±0.007 5)×107cfu·mL-1和(0.942 6±0.019 9)×107cfu·mL-1,培养3、4、5和6d时2组间比较差异均有统计学意义(P<0.05),同种细菌各不同时间点间比较差异有统计学意义(P<0.05)。结晶紫染色检测BF致密程度,ATCC49247和PAO1培养3d时BF致密度逐渐上升至最高,波长570nm吸光度(A570)值分别为2.717 4±0.017 2和2.885 3±0.039 0,而后逐渐下降,至7d时分别降至0.151 7±0.074 5和1.196 9±1.108 5,各时间点2组细菌与空白组比较差异均有统计学意义(P<0.05),培养3、4和5d时2组细菌间比较差异均有统计学意义(P<0.05),同种细菌不同时间点比较差异有统计学意义(P<0.05)。SEM观察,培养3d时ATCC49247形成了典型的BF结构。结论:ATCC49247可以在体外形成BF,结晶紫染色、平板计数和扫描电镜可作为检测BF的常规手段。
- 姜俊如刘岚沈犁楚丽娟张佳星王磊周薇伏小红
- 关键词：不可分型流感嗜血杆菌生物膜扫描电镜
- 穿心莲内酯抗金黄色葡萄球菌生物膜作用及其与庆大霉素的协同作用被引量：9
- 2014年
- 目的研究穿心莲内酯(andrographolide,Andro)抗金黄色葡萄球菌(staphylococcus aureus,S.aureus)生物膜作用及其与庆大霉素(gentamicin,GEN)的协同作用。方法选择金黄色葡萄球菌ATCC25923以及2株临床菌株CY001与CY002进行研究。比浊法测定Andro(浓度100μg/mL)对S.aureus各菌株生长的影响;建立S.aureus生物膜体外模型,分为对照组、Andro干预组、GEN干预组以及Andro与GEN联合干预组,结晶紫染色后,用酶标仪在600 nm波长处测定光密度值D(600)间接观察各组生物膜的形成能力;扫描电镜观察各组生物膜的结构。结果 100μg/mL Andro作用下S.aureus各菌株生长曲线与对照组相比无显著性差异(P>0.05);除CY002由于不形成生物膜,各组间两两比较均无明显差异外(P>0.05),CY001与ATCC25923在各干预条件下生物膜均较对照组减少(P<0.001),其中100μg/mL Andro对生物膜的抑制作用强于50μg/mL GEN(P值分别为0.001,0.003),两者联用时的抗生物膜作用明显增强(P<0.05)。扫描电镜观察提示各干预条件对S.aureus生物膜均有抑制作用,以Andro与GEN联用的抑制作用最为明显。结论 Andro对S.aureus无直接杀菌作用,但对S.aureus生物膜具有良好抑制作用,与GEN联合应用,具有协同抗生物膜作用。
- 周薇沈犁张燕张佳星姜俊如华子瑜
- 关键词：生物膜金黄色葡萄球菌穿心莲内酯庆大霉素
