周薇
- 作品数：5 被引量：19H指数：3
- 供职机构：重庆医科大学附属儿童医院更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- 穿心莲内酯增强庆大霉素对小鼠烧伤创面感染的防治研究被引量：3
- 2020年
- 目的:研究穿心莲内酯联合庆大霉素对烧伤创面感染的作用。方法:建立烧伤创面铜绿假单胞菌及金黄色葡萄球菌混合感染小鼠模型,取BALB/c成年小鼠共48只,每只小鼠做4个烫伤创面,分为对照组、穿心莲内酯干预组、庆大霉素干预组及联合干预组(各组创面48个)。病理切片观察组织坏死情况,ELISA检测肿瘤坏死因子(tumor necrosis factor-α,TNF-α)、白细胞介素-6(interleukin-6,IL-6)及白细胞介素-1β(interleukin-1β,IL-1β)水平,电镜观察生物膜情况;建立混合生物膜体外模型,Western blot检测上清及菌体中外毒素A(exotoxin A,ExoA)的表达;qPCR检测exoS及exoY表达水平。结果:电镜证实建模成功并显示各干预条件下生物膜破坏情况;病理评分显示,联合干预组(4.86±0.38)预后好于庆大霉素干预组(3.29±0.49)和穿心莲内酯干预组(4.14±0.69)(P=0.000,P=0.020);ELISA示庆大霉素干预组、穿心莲内酯干预组、联合干预组与对照组比较IL-1β、IL-6和TNF-α表达量均降低(P<0.05);Western blot示庆大霉素干预组上清及菌体中ExoA灰度值分别为43.73±1.07和73.53±1.90,均高于联合干预组的40.99±0.57和53.37±2.31(P=0.017,P=0.000);qPCR显示庆大霉素组exoS与exoY表达水平高于联合干预组(P=0.003,P=0.011)。结论:穿心莲内酯可增强庆大霉素对烧伤组织的修复作用,其原因与穿心莲内酯促进庆大霉素对生物膜的破坏、炎症因子及毒力因子的减少有关。
- 王瑶周薇沈犁华子瑜
- 关键词：铜绿假单胞菌穿心莲内酯庆大霉素生物膜毒力因子
- 心肌祖细胞中Tbx5启动子区的组蛋白乙酰化调控机制研究
- 2023年
- 目的研究心肌祖细胞中Tbx5启动子区p300和CBP介导的组蛋白乙酰化修饰对Tbx5表达的调控及其修饰位点,探讨Tbx5的组蛋白乙酰化修饰调控网络。方法体外培养胚胎心肌祖细胞,分为对照组、二甲基亚砜(DMSO)组和姜黄素组,对照组不给予额外干预,DMSO组给予DMSO干预,姜黄素组给予30 mmol/L姜黄素干预。同时,采用慢病毒载体转染胚胎心肌细胞48 h,分为对照组、GFP组和p300-RNAi组,对照组不转染,GFP组采用GFP慢病毒载体转染,p300-RNAi组采用p300-RNAi慢病毒载体转染。Western blot方法检测各组的组蛋白H3的乙酰化水平;实时荧光定量逆转录PCR检测各组Tbx5和p300 mRNA水平的表达;染色质免疫共沉淀(CHIP)-实时荧光定量逆转录PCR检测Tbx5启动子区组蛋白H3不同位点H3K4、H3K9和H3K27的乙酰化水平及Tbxt5启动子结合的p300和CBP水平。结果姜黄素组Tbx5 mRNA相对表达水平及H3ac水平较对照组和DMSO对照组明显降低,差异有统计学意义(P<0.05)。p300-RNAi组p300 mRNA相对表达水平、H3ac水平较GFP组和对照组明显降低,差异有统计学意义(P<0.05);3组Tbx5 mRNA相对表达水平比较,差异无统计学意义(P>0.05)。与GFP组和对照组比较,p300-RNAi组H3ac、H3K4ac、H3K27ac水平降低,H3K9ac水平升高,差异有统计学意义(P<0.05)。p300、CBP均与Tbx5启动子区域相结合。与GFP组和对照组比较,p300-RNAi组p300结合水平降低,CBP结合水平升高,差异有统计学意义(P<0.05)。结论Tbx5启动子区组蛋白乙酰化修饰受p300和CBP的双重调控,p300-RNAi介导的H3K4和H3K27低乙酰化对Tbx5表达的抑制作用,可被CBP介导的H3K9高乙酰化代偿,保证Tbx5的正确表达。
- 孙慧超周薇吕铁伟刘玲娟田杰
- 关键词：组蛋白乙酰化P300CBP
- 两种提取铜绿假单胞菌外膜囊泡的方法比较被引量：6
- 2014年
- 目的对两种方法提取的铜绿假单胞菌(PA)的外膜囊泡(OMV)的纯度、产量及外毒素A(ETA)含量进行比较。方法分别采取超滤浓缩法和Optiprep密度梯度离心法提取PA的OMV,负染电镜检测形态及纯度;BCA法检测两种方法提取的OMV产量并用Western blotting对OMV中所含ETA进行比较;建立OMV感染人肺癌上皮细胞A549模型并检测IL-8表达水平。结果超滤浓缩法提取的OMV中存在明显的细胞碎片、鞭毛等杂质,产量为21.3μg/1010个细菌,密度梯度离心提取的OMV无明显杂质存在,产量为48.7μg/1010个细菌;相比于超滤浓缩法,密度梯度离心法提取的OMV中含有更高浓度的ETA且诱导A549细胞产生更高水平的IL-8。结论 Optiripe密度梯度离心法提取的PA的OMV的产量和纯度和ETA含量以及激活宿主细胞炎性应答的能量均高于超滤浓缩法。
- 张佳星沈犁华子瑜刘岚周薇姜俊如
- 关键词：铜绿假单胞菌超滤浓缩密度梯度离心外毒素AIL-8
- 穿心莲内酯抗金黄色葡萄球菌生物膜作用及其与庆大霉素的协同作用被引量：9
- 2014年
- 目的研究穿心莲内酯(andrographolide,Andro)抗金黄色葡萄球菌(staphylococcus aureus,S.aureus)生物膜作用及其与庆大霉素(gentamicin,GEN)的协同作用。方法选择金黄色葡萄球菌ATCC25923以及2株临床菌株CY001与CY002进行研究。比浊法测定Andro(浓度100μg/mL)对S.aureus各菌株生长的影响;建立S.aureus生物膜体外模型,分为对照组、Andro干预组、GEN干预组以及Andro与GEN联合干预组,结晶紫染色后,用酶标仪在600 nm波长处测定光密度值D(600)间接观察各组生物膜的形成能力;扫描电镜观察各组生物膜的结构。结果 100μg/mL Andro作用下S.aureus各菌株生长曲线与对照组相比无显著性差异(P>0.05);除CY002由于不形成生物膜,各组间两两比较均无明显差异外(P>0.05),CY001与ATCC25923在各干预条件下生物膜均较对照组减少(P<0.001),其中100μg/mL Andro对生物膜的抑制作用强于50μg/mL GEN(P值分别为0.001,0.003),两者联用时的抗生物膜作用明显增强(P<0.05)。扫描电镜观察提示各干预条件对S.aureus生物膜均有抑制作用,以Andro与GEN联用的抑制作用最为明显。结论 Andro对S.aureus无直接杀菌作用,但对S.aureus生物膜具有良好抑制作用,与GEN联合应用,具有协同抗生物膜作用。
- 周薇沈犁张燕张佳星姜俊如华子瑜
- 关键词：生物膜金黄色葡萄球菌穿心莲内酯庆大霉素
- 不可分型流感嗜血杆菌生物膜体外形成规律及其扫描电镜形态学被引量：1
- 2014年
- 目的:探讨不可分型流感嗜血杆菌(NTHi)生物膜(BF)体外形成规律,采用扫描电子显微镜(SEM)观察BF内部结构。方法:以NTHi标准菌株ATCC49247为研究菌株,以铜绿假单胞菌(PA)标准菌株PAO1为阳性对照菌株,同时设空白对照组,分别培养1、2、3、4、5、6和7d时,使用平板计数法和结晶紫染色法检测BF形成情况,并于3d时采用SEM检测ATCC49247的BF结构。结果:平板计数法检测BF内菌落数,ATCC49247和PAO1培养3d时活菌数逐渐上升至最高,而后逐渐下降,至7d时分别降至(0.829 4±0.007 5)×107cfu·mL-1和(0.942 6±0.019 9)×107cfu·mL-1,培养3、4、5和6d时2组间比较差异均有统计学意义(P<0.05),同种细菌各不同时间点间比较差异有统计学意义(P<0.05)。结晶紫染色检测BF致密程度,ATCC49247和PAO1培养3d时BF致密度逐渐上升至最高,波长570nm吸光度(A570)值分别为2.717 4±0.017 2和2.885 3±0.039 0,而后逐渐下降,至7d时分别降至0.151 7±0.074 5和1.196 9±1.108 5,各时间点2组细菌与空白组比较差异均有统计学意义(P<0.05),培养3、4和5d时2组细菌间比较差异均有统计学意义(P<0.05),同种细菌不同时间点比较差异有统计学意义(P<0.05)。SEM观察,培养3d时ATCC49247形成了典型的BF结构。结论:ATCC49247可以在体外形成BF,结晶紫染色、平板计数和扫描电镜可作为检测BF的常规手段。
- 姜俊如刘岚沈犁楚丽娟张佳星王磊周薇伏小红
- 关键词：不可分型流感嗜血杆菌生物膜扫描电镜
