张亚飞
- 作品数:36 被引量:83H指数:6
- 供职机构:第四军医大学唐都医院更多>>
- 发文基金:国家自然科学基金陕西省科技攻关计划中国博士后科学基金更多>>
- 相关领域:医药卫生更多>>
- HCV持续感染对人滋养层细胞MMP-2和MMP-9合成分泌的影响
- 目的:我们前期研究证实体外培养人胎盘的合体滋养层细胞可感染丙型肝炎病毒(HCV)且其侵袭能力可因持续感染而下降。本文探讨HCV持续感染对体外培养人胎盘合体滋养层细胞MMP-2和MMP-9合成分泌的影响。方法:应用ELIS...
- 张亚飞聂青和
- 文献传递
- HCV体外感染对人滋养层细胞MMP-2和MMP-9合成分泌的改变
- 目的探讨丙型肝炎病毒持续感染对体外培养人胎盘合体滋养层细胞MMP-2和MMP-9合成分泌的影响。方法应用ELISA方法检测细胞培养上清MMP-2和MMP-9水平,分析感染组和对照组数据间的差异,并用明胶酶谱进一步验证EL...
- 张亚飞聂青和罗新栋邵彬李军
- 关键词:HCV人滋养层细胞体外感染
- 文献传递
- 人DC-SIGN真核表达载体的构建及在K-562细胞中的表达被引量:1
- 2006年
- 目的构建含人DC-SIGN基因的真核表达载体,探讨DC-SIGN在K-562细胞中的表达,为研究丙型肝炎病毒(HCV)与DC-SIGN的相互作用奠定基础。方法分离人外周血单个核细胞,体外诱导分化为树突状细胞(DC);提取细胞总RNA并反转录为cDNA,设计上下游引物,利用PCR技术扩增DC-SIGN片段,连接入克隆载体pGEM-Teasy;应用双酶切回收基因片段,定向克隆入真核表达载体pCDNA3.1;通过脂质体介导的基因转染技术将pCDNA3.1-DC-SIGN和空载体转入K-562细胞,应用G-418筛选稳定表达DC-SIGN的K-562细胞,以DC-SIGN单抗通过免疫荧光法检测K-562细胞的表达产物。结果PBMC体外成功刺激分化为DC,含DC-SIGN基因的克隆载体pGEM-DC-SIGN经酶切、PCR及测序鉴定分析正确,pCDNA3.1-DC-SIGN经酶切、PCR鉴定分析正确,DC-SIGN可在K-562细胞表面稳定表达。结论DC-SIGN可在K-62细胞中大量表达,为进一步研究DC-SIGN在HCV感染中的作用奠定了基础。
- 李军冯志华聂青和李光玉牟丹蕾张亚飞
- 关键词:肝炎病毒丙型树突状细胞DC-SIGN真核表达
- A8.人胎盘滋养层细胞内吞HCV颗粒的动态电镜观察
- 我国属HCV高感染地区,每年因宫内感染而出生的新生儿估什有几万人,这些人不仅是HCV感染的主要传染源,同时又是肝硬化,肝癌的高危人群。在日前丙型病专性肝炎缺乏特效药物治疗的情况下,研究HCV宫内感染的确切机制,在此基础上...
- 聂青和罗新栋黄晓峰程勇前张亚飞邵彬
- 关键词:胎盘滋养层细胞
- 文献传递
- HIV/HCV合并感染患者的抗HCV治疗
- 2005年
- 张亚飞聂青和
- 关键词:HIV/HCV抗HCVHIV感染者HCV感染
- TIMP-1 ELISA检测方法的建立及临床初步应用
- 2007年
- 目的建立一种检测人血清中基质金属蛋白酶组织抑制剂-1(TIMP-1)的酶联免疫吸附方法(ELISA),用于血清学诊断人肝纤维化病程进展。方法以抗人TIMP-1单克隆抗体(McAb)为包被抗体,15%小牛血清为封闭液,和辣根过氧化物酶(HRP)标记的抗TIMP-1 McAb作为标记抗体建立检测人血清TIMP-1 ELISA法。并用于临床初步检测408例肝病患者血清。结果实验理想的包被抗体浓度为1μg/ml,血清稀释倍数1∶100,HRP标抗体的最佳工作浓度1∶400。该法具有良好的重复性,灵敏度达3 ng/ml,中和抑制率在85%以上,稳定性能好,与国外TIMP-1 ELISA试剂盒进行对比试验,表明两种检测方法有良好的相关性(Y=0.0085+0.9892X,r=0.988)。临床检测表明TIMP-1随着病损纤维化程度加重而升高,与正常人血清TIMP-1水平相比差异显著(P<0.01)。结论该法可用于肝纤维化进展定量血清学诊断。同时对影响因素的判定进行了初步的摸索研究,结果可靠。为国内TIMPs诊断试剂盒的研制和开发提供了科学实验依据。
- 邵彬聂青和王平忠李光玉张亚飞苟艳子
- 关键词:基质金属蛋白酶组织抑制剂-1酶联免疫吸附法血清学诊断肝纤维化
- 实验性肝纤维化大鼠肝脏中TIMP-2基因及蛋白表达阻断研究被引量:6
- 2005年
- 目的:探讨以TIMP-2为靶基因,应用反义寡核苷酸 (asON)技术抑制其在肝组织中的表达对大鼠肝纤维化发展的影响.方法:22只大鼠分为治疗组(n=6)、模型组(n=6)和正常对照组(n=10).以人血白蛋白免疫攻击方法制备免疫诱导型肝纤维化大鼠模型.模型制备过程中,治疗组大鼠以尾静脉注射方式给予针对TIMP-2的硫代反义寡核苷酸.RT-PCR、原位杂交、免疫组化、ELISA 等方法检测TIMP-2的转录以及表达水平.用病理学检查以及Ⅰ、Ⅳ型胶原的免疫组化结果分析肝纤维化发展程度.通过胶原纤维特殊染色及电镜等观察asON对大鼠肝纤维化的影响.结果:治疗组病理学分级状况优于模型组(u=2.071, P<0.05).治疗组血清TIMP-2低于模型组(T=55, P<0.05),高于正常对照组(T=55,P<0.05).治疗组肝组织TIMP-2 mRNA表达弱于模型组(t=3.332,P<0.05), 高于正常对照组(t=5.550,P<0.05).Ⅳ型胶原免疫组化图像定量分析结果显示,治疗组与模型组有显著差异(t =2.310,P<0.05),其表达较低,但仍高于正常对照组(t= 3.623,P<0.05).治疗组Ⅰ型胶原免疫组化图像扫描结果与模型组相比,其数值亦较低(t=2.845,P<0.05).治疗组肝窦基底膜胶原沉积较轻,与模型组无明显差异.结论:抑制TIMP-2在肝组织中的表达可以减缓大鼠肝纤维化发展.
- 聂青和张亚飞谢玉梅邵彬李军苟艳子周永兴
- 关键词:反义寡核苷酸金属蛋白酶组织抑制因子-2
- 丙型肝炎病毒感染与血液系统相关疾病被引量:3
- 2005年
- 聂青和张亚飞
- 关键词:丙型肝炎病毒病毒感染肝脏损害淋巴瘤特发性血小板减少性紫癜
- HCV持续感染对体外培养人胎盘合体滋养层细胞生物学特性的影响
- 目的:我们前期研究证实人胎盘滋养层细胞可以感染丙型肝炎病毒(HCV),且持久感染可导致超微结构的明显改变,细胞超微结构的改变理论上可以影响细胞的生物学特性。本文探讨HCV持续感染对体外培养人胎盘合体滋养层细胞生物学特性的...
- 聂青和张亚飞
- 文献传递
- 丙型肝炎病毒的免疫逃逸机制被引量:5
- 2005年
- 张亚飞聂青和
- 关键词:免疫逃逸机制丙型肝炎病毒免疫监视HCV