康祥锦 作品数:35 被引量:87 H指数:5 供职机构: 广州医科大学 更多>> 发文基金: 国家自然科学基金 广东省自然科学基金 广东省人口和计划生育委员会科研项目 更多>> 相关领域: 医药卫生 文化科学 生物学 更多>>
乙肝病毒S蛋白诱导人精子凋亡的分子机制 被引量:2 2015年 目的:探讨乙肝病毒S蛋白(HBs)诱导人精子凋亡的分子机制。方法:人精子与不同浓度(0、25、50、100μg/m L)HBs共孵育3 h后,应用Annexin V-FITC/PI双染法检测HBs对精子早期凋亡指标磷脂酰丝氨酸外翻情况,用流式细胞术检测精子细胞内半胱氨酸蛋白酶-3、-8、-9(Caspase-3、-8、-9)活化,用TUNEL结合流式细胞术检测精子DNA的损伤。结果:人精子与25~100μg/m L HBs共孵育3 h后,Annexin V-FITC+/PI-精子,Caspase-3、-8、-9阳性精子,TUNEL阳性精子的比率均显著高于对照组(P〈0.05或P〈0.01),且均呈剂量依赖趋势。结论:25~100μg/m L HBs可诱发人精子胞膜磷脂酰丝氨酸外翻,胞内Caspase-3、-8、-9激活和DNA损伤,从而致使人精子凋亡以影响精子的功能。 康祥锦 丁悦 杨洁 杜红姿 刘见桥 黄天华关键词:HBS 精子功能 乙肝表面S蛋白与人精子相互作用的初步研究 被引量:2 2009年 目的:研究乙肝表面S蛋白(HBs)与人精子表面去唾液酸糖蛋白受体(ASGP-R)的结合情况,探讨乙肝病毒(HBV)侵入人精子的早期机制。方法:HBs预先与人精子孵育一定时间后,采用异硫氰酸荧光素标记的ASGP-R单克隆抗体对人精子表面ASGP-R标记,通过流式细胞术考察HBs与该受体结合情况。结果:HBs在浓度25μg/mL时孵育1 h,ASGP-R单克隆抗体浓度10μg/mL时,观察到标记的人精子的平均荧光强度显著降低。结论:HBV可能通过HBs与人精子表面AS-GP-R受体结合而侵入精子,为进一步研究HBV侵入精子的早期机制提供了初步基础。 孙平楠 康祥锦 陈惠芳 黄天华关键词:去唾液酸糖蛋白受体 人精子 22215个IVF/ICSI周期的不孕原因分析 被引量:1 2016年 目的研究辅助生殖技术中不孕症的病因构成及年度变化。方法回顾性分析2007年1月-2014年11月共22 215个体外受精(IVF)/胞浆内单精子注射(ICSI)周期,分析不孕症的病因构成及年度变化。结果 22 215个周期中继发性不孕占49.40%,原发性不孕占50.60%。不孕的主要原因是盆腔及输卵管因素(57.00%),其次为双方因素(18.65%)及男方因素(14.90%)。盆腔输卵管因素在继发性不孕中所占比例(70.19%)显著高于在原发性不孕中所占比例(44.12%)(P〈0.05)。盆腔及输卵管因素不孕患者中,继发性不孕比例(60.83%)高于原发性不孕比例(39.17%)。其他不孕原因中,均是原发性不孕比例高于继发性不孕比例。2007-2014年盆腔及输卵管因素都是助孕的首要指征,占52.0%~60.1%。结论无论继发性不孕还是原发性不孕,输卵管因素都是IVF/ICSI治疗的首要指征。盆腔及输卵管因素不孕患者中,继发性不孕比例高于原发性不孕比例;其他各种不孕原因中,原发性不孕比例高于继发性不孕比例。 吴乙璇 刘见桥 郑海燕 刘海英 康祥锦关键词:辅助生殖技术 体外受精-胚胎移植 不孕 乙肝病毒S蛋白对人精子氧化应激的影响 被引量:2 2015年 目的:乙肝病毒(HBV)可通过血睾屏障将病毒DNA整合到男性生殖细胞的基因组中,诱发多种染色体畸变,而且还能破坏精子线粒体功能,导致精子活力受损,受精率和受精指数下降,但其机制未明。本研究主要考察乙肝病毒S蛋白(HBs)对人精子氧化应激的影响。方法:人精子与不同浓度(0、25、50、100μg/m L)HBs共孵育3 h后,用流式细胞术检测精子内活性氧(ROS)的变化情况,应用酶标仪检测精子细胞内丙二醛(MDA)含量和总抗氧化能力(TAC)。结果:人精子与25~100μg/m L HBs共孵育3 h后,ROS阳性精子比率、人精子细胞膜MDA水平显著高于对照组,而TAC水平显著低于对照组(P〈0.05或0.01)。MDA水平以及ROS阳性精子比率的升高与HBs呈剂量依赖关系(r=0.62,r=0.75;P均〈0.01)。TAC水平的降低与HBs呈剂量依赖关系(r=-0.89;P〈0.01)。结论:HBs可诱导人精子内ROS升高、TAC降低,从而产生氧化应激,使细胞膜脂质过氧化进而影响人精子的功能。 康祥锦 丁悦 杨洁 杜红姿 刘见桥 黄天华关键词:氧化应激 活性氧 脂质过氧化 人血管内皮生长因子基因修饰的肌源性干细胞的构建及表达 被引量:1 2015年 目的:构建携带人血管内皮生长因子基因(VEGF)的慢病毒载体,转染肌源性干细胞(MDSCs)并检测VEGF的表达。方法:体外培养兔肌源性干细胞,细胞免疫荧光检测MDSCs的CD34、CD45、Bcl-2和Desmin表达。构建p CDH-CMV-MCS-EF1-cop GFP-VEGF慢病毒载体,双酶切及测序鉴定。转染MDSCs,流式细胞仪(FCM)检测转染率。Real-time PCR,Western blot及ELISA检测VEGF在MDSCs的表达情况。结果:测序结果显示成功构建p CDH--VEGF慢病毒载体。FCM检测各组MDSCs的转染率,MOI值分别为1、5、15时转染率分别达到16.7%、45.6%、66.3%和85.6%。MOI值为20时,更达到90.1%。Real-time PCR,Western blot及ELISA均显示VEGF在MDSCs内稳定表达。结论:成功构建携带VEGF的慢病毒载体,转染MDSCs并稳定表达。 安庚 康祥锦 张文 张金明关键词:慢病毒载体 血管内皮生长因子 肌源性干细胞 转染 健康教育图教育方式对妊娠期糖尿病患者血糖控制的影响 被引量:23 2016年 目的探讨健康教育图教育方式对妊娠期糖尿病患者血糖控制的影响。方法将195例妊娠糖尿病患者随机分为试验组93例与对照组102例,在饮食控制、运动及药物等综合治疗的基础上,试验组以健康教育图进行糖尿病健康教育,对照组以传统的多媒体方式进行糖尿病教育。分别在教育前、教育后3个月末对两组患者空腹血糖(FPG)、餐后2 h血糖(2h PG)以及糖化血红蛋白(Hb A1c)指标进行比较。结果教育前两组患者FPG、2h PG、Hb A1c水平差异无统计学意义(P>0.05),教育后3个月末两组间患者FPG、2h PG、Hb A1C差异均有统计学意义(P<0.05)。结论健康教育图教育方式相对于传统的糖尿病教育,能更有效改善妊娠糖尿病患者的血糖控制指标水平。 陈钰仪 王少晶 康祥锦关键词:妊娠期糖尿病 EGCG通过调控SIRT1-P53通路诱导人卵巢癌SKOV-3细胞凋亡 被引量:5 2016年 目的:研究表没食子儿茶素没食子酸酯(epigallocatechin gallate,EGCG)调控人卵巢癌SKOV-3细胞活力和凋亡的分子机制。方法:SKOV-3细胞给予EGCG(0~50μmol/L)、SIRT1激动剂SRT1720(1μmol/L)和SIRT1抑制剂EX527(1μmol/L)处理后,用CCK-8法检测细胞活力,流式细胞术检测细胞凋亡,real-time PCR检测Bax和Bcl-2 mRNA的表达水平;采用SIRT1去乙酰化酶活性检测试剂盒检测SIRT1酶活性;使用Western blot法检测SIRT1、乙酰化P53和P53的蛋白表达变化。结果:与正常对照组相比,单独给予EGCG或EX527处理之后SKOV-3细胞活力下降,凋亡率增加;SIRT1的酶活性和蛋白表达水平均明显下降;P53的乙酰化水平显著增加。与EGCG组相比,SRT1720预处理组的细胞活力上升,凋亡率下降,Bax/Bcl-2的相对比值及激活型caspase-3的蛋白水平明显下降,并且SIRT1的酶活性和蛋白表达水平显著增加,P53的乙酰化水平下降。结论:EGCG可通过调控SIRT1-P53通路抑制卵巢癌SKOV-3细胞活力并诱导其凋亡。 尤慧敏 康祥锦 杨洁 林燕珊 刘见桥 杜红姿关键词:表没食子儿茶素没食子酸酯 SKOV-3细胞 HIV病毒父婴垂直传播的研究进展 被引量:2 2009年 人免疫缺陷病毒(human immunodeficiency virus,HIV)的传播途径除性传播、血液传播和围产期传播外,还存在经男性生殖细胞垂直传播的可能性。本文对HIV经人精子垂直传播的相关线索以及在HIV传播过程中发挥HIV-1受体功能的辅助受体等内容作简要综述。 康祥锦 黄天华关键词:人免疫缺陷病毒 精子 受体 艾滋病 乙肝病毒S蛋白对人精子胞膜完整性及功能的影响 【背景与目的】: 乙型肝炎是严重威胁人类健康和生命的全球性疾病。世界各国共约4亿人为乙肝病毒(HBV)感染者并以每年5千万新感染者的速度递增。我国感染HBV的人数约9300万,占全国人口的8%。乙型肝炎在肝癌的发生中占... 康祥锦关键词:S蛋白 文献传递 HIV/AIDS 28例患者精子形态特点分析 2010年 目的分析HIV/AIDS患者精子的形态学特点,探讨HIV感染对精子形态学的影响。方法收集已确诊HIV/AIDS患者,采用精子分析仪分析其精子形态学特点。结果收集了28例HIV/AIDS患者,分析精子的形态学结构发现,患者精子畸形率在24.2%~93.9%之间,平均(67.7±11.2)%,精子畸形以头部畸形为主,尤以小头畸形常见(54.2±15.7)%;其次可见大头、无定形头、圆形头等。颈部畸形率为(4.16±4.23)%,以颈部粗壮、不规则为主。尾部畸形率为(3.28±4.93)%,主要以尾部弯曲为主。结论 HIV/AIDS患者精子形态学存在明显的异常,HIV感染对患者精子的形态有明显的影响。 王典 李练兵 候志伟 谢庆东 康祥锦 黄天华关键词:HIV/AIDS患者 精子 形态学特点