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高转移肺癌细胞株的建立及其肿瘤干细胞生物学特性被引量：1: 2017年; 目的研究高转移肺腺癌细胞株的肿瘤干细胞生物学特征。方法肺腺癌细胞系A549接种裸鼠皮下成瘤后,取肺的转移灶,通过机械分离法获取肺转移细胞,体外扩大培养后,再次接种裸鼠。如此反复接种裸鼠,获得稳定肺转移的细胞株A549-V13。采用无血清悬浮培养及PKH26染色确定A549-V13存在肿瘤干细胞。流式细胞术(FACS)检测和分选A549和A549-V13中肿瘤干细胞标志物CD133的表达并进行体内外生物学特征实验。结果建立稳定高转移A549-V13细胞株。无血清悬浮培养A549-V13,7天后形成的球形细胞团中存在单个PKH26阳性细胞。FACS检测显示,与A549中CD133^+细胞相比,高转移A549-V13细胞株中CD133^+细胞的表达比例显著提高4.85倍。A549-V13中CD133^+细胞具有更强的自我更新能力,侵袭能力提高1.42倍,耐药能力也显著增强,其IC50提高1.26倍,A549-V13的CD133^+细胞在裸鼠皮下接种2×10~2个细胞3月致瘤4/6,而接种2×10~2个A549的CD133^+细胞3月才致瘤2/6。结论建立高转移肺癌细胞株A549-V13,伴随CD133^+细胞表达比例的增加,其体内外生物学功能显著增强。; 遇珑舒雄刘军孙力超杨治华冉宇靓; 关键词：人肺癌细胞肿瘤干细胞 CD133 CD90

识别肺癌上调表达的膜蛋白单抗抑制肺癌生长被引量：3: 2010年; 目的:分析研究抗肺癌24H7单抗的体内外功能,并初步鉴定其识别的抗原蛋白,为肺癌靶向治疗提供候选抗体药物及靶标。方法:采用活细胞免疫荧光及流式细胞荧光检测单抗与多种肺癌细胞的反应;应用CCK-8法和裸鼠体内成瘤实验鉴定单抗对肺癌细胞体外增殖及体内肿瘤生长的影响;同时采用免疫组化检测该单抗识别抗原在肿瘤及癌旁正常组织中的表达差异;免疫亲和层析纯化抗原。结果:活细胞免疫荧光及流式荧光结果显示24H7单抗识别抗原在12种不同肺癌细胞系膜上均有阳性表达;体外增殖及动物体内治疗实验显示该单抗在体外能抑制肺癌细胞的增殖,并在体内显著抑制肿瘤的生长,其抑制率达73.74%(P<0.01);免疫组化结果表明该单抗的靶抗原在肺腺癌组织中的表达较癌旁正常显著上调;免疫亲和层析显示靶抗原的分子量约为170 KD。结论:抗肺癌单抗24H7能够在体内外抑制肺癌的生长,其靶抗原可表达于肺癌细胞的膜上,且在肺腺癌组织上调表达,可能是一个肺腺癌靶向治疗的新靶标。; 杨薇薇遇珑孙力超孙立新李江伟杨治华冉宇靓; 关键词：肺癌膜蛋白功能性单克隆抗体

人肺腺癌A549细胞系干细胞样细胞的培养检测及其抗顺铂能力的研究被引量：1: 2011年; 目的:从人肺腺癌A549细胞系中培养获得含干细胞样细胞的球细胞(Sphere细胞),检测相关标志物表达及其对顺铂的耐药性。方法:采用含特定生长因子的无血清培养基诱导A549细胞的Sphere细胞形成,用亲脂荧光染料标记技术和免疫荧光法检测Sphere细胞中干细胞的存在,用流式细胞术检测干性标志物CD133,OCT4,CD56,CD117在Sphere细胞中的表达,用CCK8法检测顺铂处理后A549细胞及Sphere细胞的耐药性,并计算IC50。结果:A549细胞的Sphere细胞中含不对称分裂的干性标志物阳性细胞,且多种干性标志物表达比例升高,对顺铂耐药性也显著提高(P<0.05)。结论:人肺腺癌细胞系A549细胞在特定培养条件下可形成富集了干细胞样细胞的Sphere细胞,并对顺铂的抵抗能力增强。; 马晓雯刘彤孙力超刘军杨治华冉宇靓; 关键词：人肺腺癌细胞 A549细胞顺铂耐药性

一种抗Mac‑2BP人源化抗体的制备: 本发明涉及一种抗Mac‑2BP人源化抗体的制备，特别地，本发明涉及一种抗癌细胞表面表达的Mac ‑2BP蛋白的人源化抗体，编码该抗体的多核苷酸，包含该多核苷酸的表达载体以及含有所述表达载体的宿主细胞，以及它们在制备用于治...; 冉宇靓杨治华孙力超; 文献传递

^99mTc标记的抗CEA小分子嵌合抗体的体内分布与肿瘤显像: 2013年; [目的]采用99mTc标记抗人CEA小分子嵌合抗体Rch24 F(ab’)2,研究其在荷人结肠癌裸鼠体内的生物学分布及放射免疫显像的特征与应用价值。[方法]采用SnCl2直接还原法标记抗体,快速薄层层析法(ITLC)测定抗体的标记效率、放化纯度和体外稳定性,ELISA检测标记抗体的免疫比活性。荷人结肠癌裸鼠尾静脉注射99mTc-Rch24 F(ab’)2后,研究标记抗体在裸鼠体内的生物学分布,并进行肿瘤显像。[结果]99mTc-Rch24 F(ab’)2的标记率为90%,放化纯度>95%。99mTc-Rch24 F(ab’)2的放射比活为840MBq/mg,免疫比活性为65.7%。标记抗体24h时放射性脱落小于5%。荷瘤裸鼠注射99mTc-Rch24 F(ab’)23h后即可观察到肿瘤影像,5~24h均可获得清晰的肿瘤影像,标记抗体在体内呈肿瘤靶向性分布,12h时肿瘤的摄取和多数脏器T/NT比值均达到最高水平。[结论]99mTc-Rch24 F(ab’)2在体内靶向分布于结肠癌肿瘤组织,具有较高的T/NT比值并可在肿瘤局部滞留,注射99mTc-Rch24 F(ab’)25h后肿瘤成像满意。99mTc-Rch24 F(ab’)2在临床肿瘤的放射免疫分子显像诊断中具有良好的应用前景。; 孙立新赵泽国遇珑刘军韩璐璐杨治华孙力超冉宇靓; 关键词：放射免疫显像

结肠癌患者血清MCP-1含量的检测及其意义被引量：1: 2011年; 目的:研究结肠癌患者外周血中单核细胞趋化蛋白1(MCP-1)水平的变化,探讨其临床意义。方法:采用酶联免疫吸附法(ELISA)分别测定98例结肠癌患者(37例未发生肝转移\61例发生肝转移)和40例正常人(对照组)血清MCP-1的水平,并进行比较。结果:发生肝转移结肠癌患者血清MCP-1水平为(158.7±267.4)pg/ml,未发生肝转移结肠癌患者血清MCP-1水平为(78.3±116.1)pg/ml,正常对照组血清MCP-1水平为(57.1±48.8)pg/ml。临床相关性发现血清MCP-1水平与肝转移、临床分期相关。结论:MCP-1在结肠癌肝转移中起重要作用,监测血清MCP-1水平可反映结肠癌的进展程度,具有重要的临床价值。; 孙力超李树婷孙立新遇珑韩璐璐刘彤杨治华冉宇靓; 关键词：结肠癌单核细胞趋化因子-1

自身抗体与肿瘤被引量：4: 2007年; 肿瘤患者体内可以检测到针对肿瘤抗原的自身抗体，其产生是多种复杂机制共同作用的结果。其中，肿瘤自身抗原诱导机体产生肿瘤自身抗体是重要机制之一。目前研究发现肿瘤自身抗体与肿瘤的发生发展密切相关。肿瘤自身抗体检测有着重要的临床意义。; 孙力超冉宇靓; 关键词：自身抗体自身抗原

肝癌高转移细胞株的肿瘤干细胞生物学特性研究被引量：3: 2016年; 目的:建立高转移肝癌细胞株,研究其肿瘤干细胞生物学特征,为靶向人肝癌干细胞治疗提供有价值的细胞模型。方法:肝癌细胞系Bel7402接种裸鼠皮下,成瘤后,取小鼠肺部转移灶,通过机械分离法,获取肺部肝转移细胞,体外扩大培养后,再次接种裸鼠。如此反复接种裸鼠,获得稳定肺转移肝癌细胞株Bel7402-V13。采用无血清悬浮培养及PKH26染色确定Bel7402-V13中肿瘤干细胞的存在。流式细胞术分析亲本Bel7402和Bel7402-V13中肿瘤干细胞标志物ESA的表达情况,分选Bel7402和Bel7402-V13中ESA^+细胞并进行体外生物学特征研究及裸鼠致瘤实验。结果:建立高转移Bel7402-V13细胞株,Bel7402-V13细胞无血清悬浮培养7d后形成的细胞球体中存在单个PKH26阳性细胞。与Bel7402中ESA^+细胞相比,流式分析显示干细胞标志物ESA比例高转移Bel7402-V13显著提高5.67倍(17.6±0.4 vs 3.1±1.5)。Bel7402-V13中ESA^+细胞具有更强的自我更新能力[成球率:(94.8±7.5)%vs(52.3±6.9)%,P<0.01],侵袭能力提高1.51倍(397.7±79.4 vs 262.0±40.1,P<0.01),耐药能力也显著增强(IC_(50):0.286 vs 0.196,P<0.01),ESA^+细胞Bel7402-V13在裸鼠皮下接种2×10~2个细胞3月即可致瘤(3/6),而接种2×10~2个ESA^+细胞Bel7402细胞3月才能致瘤(1/6)。结论:获得高转移肝癌细胞株Bel7402-V13,伴随ESA^+细胞增加,其体内外功能显著增强,为肝癌干细胞的靶向治疗提供有价值的细胞模型。; 遇珑舒雄刘辉琦刘军孙力超杨治华冉宇靓; 关键词：人肝癌细胞肿瘤干细胞靶向治疗 ESA CD90

抗人肝癌血管内皮功能性单抗的筛选与鉴定被引量：2: 2011年; 目的：筛选、鉴定抗人肝癌血管内皮功能性单抗，为治疗肝癌提供靶向治疗剂，并为分离获得肝癌相关的分子靶标打下基础。方法：采用活细胞荧光、MTT细胞增殖实验、成管实验和动物体内治疗实验，筛选鉴定抑制肝癌内皮细胞的功能性单抗。结果：从能与肝癌内皮细胞膜反应的119株克隆中，筛选出16株单抗显著地抑制肝癌内皮增殖其抑制率达21％～46％，46株能显著抑制肝癌内皮细胞的成管，3株单抗1F9、1285和1811能显著抑制肝癌移植瘤的生长抑制率分别为50．8％、48．7％和47．0％。选择1株体内抑瘤效果最好的1811单抗，通过抗体抗原亲和层析法进行纯化，并对纯化的单抗的相关抗原蛋白进行免疫组织化学实验鉴定，结果显示1811抗原在肝癌血管组织较高的表达而在正常肝血管组织极少表达。蛋白质印迹法显示其抗原相对分子质量约46×10^3。结论：采用大容量功能性抗体库技术成功获得了多株具有抑制肝癌内皮恶性生物学行为的功能性单抗，体内外抑制肺癌的生长，具有成为肺癌靶向治疗剂的潜力。其中1株可能是一个靶向治疗肝癌的新靶位。; 孙力超朱小飞遇珑孙立新杨治华冉宇靓; 关键词：肝肿瘤内皮细胞抗体单克隆

HSP90α和HSP90β在肝癌中共同上调表达被引量：10: 2016年; [目的]探讨热休克蛋白90α(HSP90α)和HSP90β在肝癌中的表达及意义。[方法]采用免疫组化法检测103例肝癌组织和79例非肝癌相关组织(正常肝组织,肝炎,肝硬化)中HSP90α和HSP90β的表达,并分析其与肝癌临床病理特征的关系。[结果 ]肝癌组织中,HSP90α和HSP90β的阳性表达率分别为82.52%和85.44%,均显著高于非癌组织(P<0.05)。HSP90α高表达与肝癌分化程度相关(P<0.05),而与患者性别、病理类型、病理分期无关(P>0.05)。HSP90β高表达与肝癌分化程度和TNM分期相关(P<0.05),而与患者性别、病理类型无关(P>0.05)。Spearman相关性分析显示,HSP90α和HSP90β在肝癌组织中协同表达(r=0.535,P<0.001)。[结论 ]HSP90α和HSP90β在肝癌组织中共同表达上调,可能可作为肝癌潜在的诊断和治疗靶点。; 杨婧曹凯悦孙立新遇珑孙力超冉宇靓; 关键词：HSP90Α 肝癌

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孙力超

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