姚慧
- 作品数：8 被引量：11H指数：1
- 供职机构：中国农业大学生物学院农业生物技术国家重点实验室更多>>
- 发文基金：北京市自然科学基金国家自然科学基金教育部留学回国人员科研启动基金更多>>
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- 精子染色质在卵母细胞质中的主动去甲基
- 受精后小鼠卵子中父本基因组的主动去甲基化对于植入前的胚胎发育是非常重要的。然而植入前胚胎主动去甲基化的机制仍不甚明了,DNA 去甲基化酶是否确实存在于 MⅡ卵母细胞胞质中还是源自母本基因组也未有确切结论。
- 姚慧苟克勉高绍荣
- 关键词：免疫染色CPG
- 文献传递
- 端粒酶催化亚基基因在小鼠胚胎发育早期的转录活性
- 2005年
- 用RT-PCR引物分别扩增成年昆明(KM) 小鼠睾丸、脾脏、肾脏、肝脏和胸腺组织的总RNA发现,端粒酶催化亚基基因tert在这些组织中都有转录,目标产物正确组装到PMD 18-T载体后测序,结果与已知cDNA序列一致. PMSG/hCG超数排卵方法获得KM小鼠成熟卵母细胞和CZB溶液体外培养的胚胎(KM ♀×KM♂),用酸性Tyrode蒺s溶液消化透明带后,采用巢式RT-PCR,同时分析tert基因和持家基因hprt的转录发现,对于单个样品来说, 全部卵母细胞(15 h-post hCG,10/10) 都存在hprt转录本,其中,只有40%(4/10) 还同时存在tert转录本. 原核形成初期(20 h-post hCG,6/6) 和原核晚期(30 h post-hCG,8/8) 的受精卵,以及发育至2-C早期的胚胎(35 h-post hCG,7/7) 都不转录tert基因,只有hprtmRNA存在;2-C晚期(50 h-post hCG)时,两个基因同时转录(4/8)和一个基因单独转录(4/8)的胚胎各占50%;从4-C阶段(65 h-post hCG,4/4)开始,包括8-C阶段(75 h-post hCG,4/4),桑椹胚阶段(93 h-post hCG,4/4),直至囊胚阶段(118 h-post hCG,4/4),所有的胚胎都同时转录tert和hprt基因,而且转录水平明显升高. 以20枚胚胎量为模板进行RT-PCR发现,原核早期,原核晚期的胚胎中仍然没有tert基因转录,只有hprtmRNA,但是,在2-C早期胚胎中同时检测到了hprt和tert两种mRNA. ?
- 王宇姚慧安晓荣陈永福苟克勉
- 关键词：胚胎HPRT基因端粒酶
- 父本基因组在小鼠卵母细胞中的主动去甲基化研究
- 受精后小鼠卵子中父本基因组的主动去甲基化对于植入前的胚胎发育是非常重要的。然而植入前胚胎主动去甲基化的机制仍不甚明了，DNA去甲基化酶是否确实存在于MⅡ卵母细胞胞质中还是源自母本基因组也未有确切结论。
为判定M...
- 姚慧
- 关键词：免疫染色CPG胚胎发育卵母细胞
- 文献传递
- 利用ICSI技术生产转基因小鼠
- 在掌握小鼠ICSI技术的基础上,本文进行了ICSI技术生产转基因小鼠的研究。来自成年KM小鼠附睾尾的精子,使用未加抗冻剂的HEPES-CZB溶液,在液氮中冻融1次后,用于本实验。解冻精子与DNA混匀1 min后,精子头被...
- 李明严阿勇姚慧王宇安晓荣陈永福苟克勉
- 文献传递
- 小鼠ICSI及其转基因技术
- ＜正＞实验一:以Piezo操作系统为技术支撑,进行了ICSI（intracytoplasmic sperm injection）技术生产试管小鼠的尝试。来自成年昆明（KM）小鼠附睾尾的新鲜精了头,直接注射到B6D2F1小...
- 李明严阿勇安晓荣姚慧苟克勉
- 文献传递
- 利用卵胞浆精子注射(ICSI)技术生产转基因小鼠被引量：11
- 2006年
- 在掌握小鼠ICSI技术的基础上,进行了ICSI技术生产转基因小鼠的研究。来自成年KM小鼠附睾尾的精子,使用未加抗冻剂的HEPES-CZB溶液,在液氮中冻融1次后,用于本实验。解冻精子与DNA混匀1min后,精子头被显微注射到B6D2F1小鼠成熟卵母细胞质中。精子头与pEGFP-N1环状DNA共注射生产的ICSI受精卵,在CZB溶液中培养至囊胚期时,39.1%(9/23)的囊胚表达GFP基因。精子注射后6h,直接移植ICSI受精卵后,7只妊娠受体一共产仔30只,效率为23.8%(30/126)。Southernblot分析其中16只小鼠发现,3只(18.8%)转基因小鼠同时整合了GFP和Neomycin基因,它们全部来自精子和线性DNA混合的实验组(阳性效率为33.3%,3/9),相反,精子与环状质粒DNA共注射生产的7只ICSI后代中,没有检测到外源基因。转基因小鼠整合的外源基因能够传递给它们后代。结果说明,利用ICSI技术可以高效地生产转基因小鼠,宿主基因组可能更容易整合线性化的外源基因。
- 李明严阿勇姚慧安晓荣苟克勉
- 关键词：ICSI囊胚SOUTHERNBLOT
- 棉花脂肪酸脱氢酶-2(FAD2)转基因小鼠模型的建立及其基因表达的研究
- 脂肪酸脱氢酶-2(fatty acid desaturase-2,FAD2)是植物细胞内质网表面的一种去饱和酶,主要作用是将细胞质中的单不饱和脂肪酸的第12位碳碳单键脱氢成双键,生成含有2个双键的多态不饱和Ω- 6脂肪酸...
- 陈青王宇张馨姚慧李军生李红艳安晓荣苟克勉
- 文献传递
