唐历波
- 作品数：23 被引量：81H指数：5
- 供职机构：海南医学院更多>>
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- 相关领域：医药卫生生物学农业科学文化科学更多>>
- ITS2条形码序列对海南大戟科植物的鉴定被引量：5
- 2016年
- 目的利用DNA条形码技术评估ITS2序列对海南大戟科植物的鉴定能力。方法利用PCR测序法,对供试样本ITS2片段进行双向测序,所得序列经Codon Code Aligner拼接后,利用MEGA 6.0进行相关数据分析,构建邻接(NJ)树。利用TAXON DNA软件分析序列种内、种间变异并作barcoding gap分析。从ITS2数据库中获得供试样本的预测ITS2二级结构。结果大戟科供试样本ITS2序列中变异位点与信息位点分别占总序列长度的84%和69.67%。供试各种在构建的NJ树中均各自成束,表现出单系性;基于ITS2序列的种内最大变异距离值0.067 3;种间最小变异距离值0.119 1,各ITS2二级结构种内无明显差异;种间存在明显差异。结论所得ITS2条形码序列对海南大戟科植物鉴定能力强,可作为DNA条形码序列对海南大戟科植物进行快速鉴定。
- 李栎徐腊红唐历波
- 关键词：大戟科ITS2DNA条形码
- 含笑属RAPD反应条件优化及遗传多态性分析
- 2009年
- [目的]确立含笑属植物RAPD反应的最优条件,确定7种含笑属植物的亲缘关系。[方法]采用改进的CTAB法提取木兰科含笑属7种植物叶总DNA,进行RAPD分析,分别研究了模板DNA、引物、dNTP、Mg2+和TaqDNA聚合酶用量对RAPD反应的影响。[结果]RAPD最优反应体系为:反应体积20μl,内含125 ng模板DNA,0.3μmol/L引物,0.5 UTaq聚合酶,1.5 mmol/LMgCl2,0.1 mmol/L dNTP,2μl10×buffer。应用Nei距离法计算各种间的相似系数,采用UPGMA法进行聚类分析,7种含笑种可分为3大类。[结论]筛选的最佳RAPD反应条件可为含笑属植物的分类和遗传多样性分析提供理论依据。
- 唐历波周鹤峰陈东
- 关键词：含笑属RAPD聚类分析
- 夏侧金盏花Actin基因片段的克隆及表达分析被引量：1
- 2013年
- 目的:克隆夏侧金盏花中Actin基因片段并分析其组织部位表达,为以Actin基因为内参研究夏侧金盏花中其它基因的表达和调控奠定基础。方法:通过比较其它植物中Actin基因序列,设计夏侧金盏花Actin基因片段的PCR引物,扩增产物经克隆和测序,获得序列信息;根据获得的序列设计半定量RT-PCR引物,分析Actin基因在夏侧金盏花不同组织部位的表达。结果:克隆获得一长度为1 009bp的夏侧金盏花Actin基因片段,命名为AdACT,并在GenBank注册,登录号为JX436162;半定量PCR研究发现其在不同组织部位的表达无显著差异。结论:本研究初步表明其可作为研究夏侧金盏花基因表达的内参基因。
- 高新征刘嫱邬强唐历波李栎蔡望伟
- 关键词：ACTIN基因基因克隆基因表达
- pEGFP-C1-miR-335重组质粒的构建及其在乳腺癌细胞中的表达被引量：1
- 2009年
- 目的构建携带融合型microRNA(微小RNA)基因miR-335的荧光真核表达质粒pEGFP-C1-miR-335,并观察其在乳腺癌细胞MDA-MB-231中的表达。为研究小RNA基因表达调控机制建立实验基础。方法应用基因重组技术,从人类基因组DNA中扩增miR-335的前体序列,经PCR引物加入酶切位点,酶切后插入荧光真核表达载体pEGFP-C1,构建miR9真核表达载体pEGFP-C1-miR-335,然后进行酶切和测序鉴定重组质粒的正确性。应用脂质体介导的转染技术将该质粒导入MDA-MB-231细胞,24 h后观察荧光蛋白表达情况,用Northern blot方法检测miR-335表达。结果酶切和测序鉴定证实插入miR-335前体片段序列正确。细胞转染24 h后,荧光显微镜下观察到GFP表达,60%左右转染细胞发出荧光。Northern blot检测到miR-335表达。结论成功构建pEGFP-C1-miR-335荧光真核表达载体,并可在乳腺癌细胞中有效表达。
- 王燕唐历波张青峰
- 关键词：微小RNA乳腺癌细胞
- 细胞内DNA和RNA显色反应的改进被引量：2
- 2006年
- 利用经典的细胞生物学染色方法显示细胞内DNA与RNA,在实际教学过程中出现与理论上有较大的偏差,经对染色方法进行改进并进行了多次比较实验,获得了较为理想的结果,该实验结果将为医学细胞生物学实验课教学提供一个良好的方法。加深学生对细胞内DNA与RNA分布的理解。
- 唐历波张青峰姬可平王磊
- 关键词：DNARNA
- 猪笼草消化液中蛋白酶的活性初探被引量：4
- 2010年
- 为了进一步分析猪笼草瓶状体内消化液中蛋白质的性质,本研究在不同的温度和pH条件下测定消化液中蛋白酶的活性,并且比较了3种不同沉淀方法对消化液蛋白进行的浓缩,通过SDS-聚丙烯酰胺电泳对消化液蛋白作了初步分离。结果表明,猪笼草消化液中蛋白酶的最适酶活温度为50℃,且稳定性最高;当pH为5时,该蛋白酶活性出现峰值,采用氯仿-正丁醇法(5:1)沉淀浓缩猪笼草消化液蛋白样品效果最佳。聚丙烯酰胺电泳结果表明,消化液至少包括三种蛋白组分,分子量分别为24.3kD、35.1kD和61.4kD,且35.1kD条带具有抗胰蛋白酶消化活性。本研究为综合开发利用猪笼草野生资源提供理论依据。
- 唐历波姬可平王燕陈锦永
- 关键词：猪笼草蛋白酶活性
- 珠海三灶半岛野生药用植物资源初步调查被引量：3
- 2010年
- 通过对收集的标本进行整理、野外线路调查及药农访谈相结合等方法对三灶半岛野生药用植物进行初步调查,结果表明,三灶半岛野生药用植物资源中有被子植物77科227种、真菌4科6种、蕨类植物12科19种、裸子植物4科5种。并对该地区野生药用植物资源可持续利用进行了探讨。
- 唐历波吴薄译
- 关键词：野生药用植物资源调查
- 木麻黄属的DNA条形码鉴定研究被引量：2
- 2013年
- 为验证DNA条形码序列在物种鉴定方面及物种的系统发育方面的广适性,本研究以黎药植物木麻黄为研究对象,收集木麻黄及其近缘种和混伪品22份样本,采用4对引物(ITS,ITS2,trnH-psbA,rbcL)分别进行PCR扩增,产物进行双向测序。利用CodonCode Aligner软件进行序列的拼接,采用MEGA5.1进行数据的处理。结果表明,利用ITS/ITS2可以区分木麻黄与其近缘种以及混伪品,样品的psbA-trnH,rbcL和ITS/ITS2 4个序列中,ITS/ITS2序列具有明显的DNA gap。基于ITS/ITS2序列构建的NJ树结果表明,木麻黄属所有样品聚为一类,呈现明显的单系性,与其亲缘关系较近的是藤黄科。因此,ITS/ITS2序列可以准确鉴定黎药的基原植物。并能从分子水平揭示木麻黄的系统演化规律。
- 唐历波李栎秦明艳林维健欧武英
- 关键词：木麻黄ITSITS2物种鉴定系统发育
- 沉香随机扩增多态性DNA反应体系的建立被引量：2
- 2009年
- 目的对影响沉香随机扩增多态性DNA（RAPD）反应的各因素进行优化，建立适用于沉香RAPD的最佳反应体系。方法采用改良的CTAB法提取基因组DNA，变化单一因素的方法对模板DNA浓度、Taq酶用量、dNTPs、引物浓度、Mg^2＋浓度、退火温度对RAPD影响进行分析。结果建立了适合沉香RAPD分析的最佳反应体系：在20μl反应体系中，模板DNA用量20ng、Taq酶1．0U、dNTPs浓度为0．3～0．4mmol·L^-1、随机引物浓度为0．6μmol·L、Mg^2＋浓度1．5—2．0mmol·L^-1、PCR反应条件：94℃，10min；94℃，1min；36℃，1min；72℃，2min；45个循环，72℃，8min。结论该反应体系具有良好的稳定性和重复性。
- 邵敏周鹤峰唐历波刘银花李官成
- 关键词：RAPD基因组DNA
- 夏侧金盏花虾青素合成相关基因Adketo和Adkc的表达被引量：3
- 2012年
- 目的:研究夏侧金盏花中虾青素合成相关基因Adketo和Adkc在不同组织部位的表达,从而从基因表达角度探讨这两个基因与虾青素合成的关系。方法:根据GenBank上的Adketo和Adkc基因以及内参Adactin基因的序列设计荧光定量PCR引物,通过Real-time PCR分析Adketo和Adkc基因的组织部位表达情况。结果:Adketo和Adkc基因均只在花中大量表达(3%),其余组织内只能检测到少量或微量表达(10-5～10-3)。结论:虾青素主要在夏侧金盏花的花中合成具有正相关关系,为证明Adketo和Adkc是虾青素合成相关基因添加了又一证据。
- 高新征李栎邬强蔡群芳唐历波黎岳南蒋洁
- 关键词：虾青素基因表达
