王燕
- 作品数：29 被引量：74H指数：4
- 供职机构：遵义医学院珠海校区更多>>
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- 相关领域：医药卫生生物学文化科学农业科学更多>>
- 《遗传学实验》教学的改进和优化被引量：1
- 2014年
- 以往本院《遗传学实验》教学内容主要以验证性实验为主,学生对实验兴趣不高,动手能力、科研能力未得到充分的提高。通过调整和优化实验内容,增设开放式、设计性、综合性实验,并改进考核方式等,有效解决了实验教学存在的问题,提高了学生的科研能力、创新能力、综合素质,并进一步提高了实验教学质量,改善了实验教学效果。
- 刘星姬可平王燕张青峰
- 关键词：遗传学实验实验教学
- 长链非编码RNA与恶性肿瘤发生发展关系的研究进展被引量：11
- 2016年
- 人类基因组数目庞大,其形成的基因调控网络控制着组织、器官细胞的增殖、分化和凋亡。但是,整个基因组中仅约2%的基因是编码RNA,可以翻译成蛋白质,98%左右的基因为非编码RNA。之前人们普遍认为非编码RNA不能翻译有效的蛋白质产生相应的功能,被视为基因组中的"废物"。目前,大量研究表明非编码RNA并不是基因组序列中没用的产物,而是未知的"黑暗物质",已有大量的研究发现非编码RNA在多种生物过程中起着重要的作用,并且在一些重大疾病如肿瘤、心血管的发生发展中发挥着不可小觑的作用。本文就长链非编码RNA在恶性肿瘤的发生发展中的作用机制做一综述。
- 邓镇涛许朋王燕
- 关键词：长链非编码RNA恶性肿瘤肿瘤发生
- 琼脂糖电泳中核酸染料Goldview最佳使用方案的建立被引量：3
- 2012年
- 目的确定琼脂糖凝胶电泳中使用核酸染料Goldview的最佳浓度和方法,尽可能减少实验中Goldview用量,控制其对实验室环境的污染。方法配置含不同浓度Goldview的上样缓冲液,混合不同浓度DNA溶液的琼脂糖凝胶电泳,然后对比预染样品法、前染法及后染法的染色效果。结果实验结果显示上样缓冲液中含0.4%Goldview的预染样品法电泳检测核酸的效果最佳且能检测的核酸样品浓度在16.5ng或以上为最佳。结论核酸染料Goldview在核酸的琼脂糖凝胶电泳中使用的最佳方案为预染样品法,实验中推荐浓度达到普通实验要求,并且最易控制对周围环境的污染。
- 王燕彭莉萍罗镇明
- 关键词：琼脂糖凝胶电泳
- 改良消减杂交技术用以筛选差异表达非编码小RNA的应用初探被引量：1
- 2013年
- 旨在构建一种能快速、有效检测不同细胞中差异表达的非编码小RNA的方法。以乳腺癌细胞株MCF7和非癌乳腺上皮细胞HBL100为材料,用RNA分离试剂盒分离获得长度为18-100 nt的RNA片段,3'端添加poly(A)尾后利用smart技术进行反转录,在反转录体系中加入生物素标记的dATP,得到单链cDNA;结合生物素-磁珠分离技术将cDNA与待测RNA进行消减杂交并以U6为内参验证消减结果 ;最后利用巢式PCR扩增杂交产物,PCR产物插入T载体后,挑取阳性克隆进行测序。结果显示,总RNA按不同大小片段分离富集后通过聚丙烯酰胺凝胶电泳,于100 nt以下显示较亮条带;以U6为内参检测杂交效率,杂交后U6于33个循环时可见少量扩增条带;杂交产物经巢式PCR和电泳表明在100 nt范围内有明显条带,得到差异表达的非编码小RNA。经过改良的消减杂交方法可以快速、有效的检测不同标本中差异表达的非编码小RNA。
- 王燕彭莉萍陈锦珍刘星罗镇明周天会
- 关键词：消减杂交乳腺癌细胞
- 浅谈形成性评价指导下一堂完整的实验课
- 2016年
- 由于终结性评价不能很好地解决教与学的问题,美国教育家思想家斯克里文(Scriven,M)顺应时代需要,提出了形成性评价。经过教育界同行持续的摸索,极大地丰富了形成性评价。文章用形成性评价为主导,总结性评价为辅,用双评价体系,来探讨一堂完整的实验课。
- 邓镇涛张岩杨传辉王燕
- 关键词：实验教学
- 硕士研究生分子生物学实验技术教学改革初探被引量：2
- 2012年
- 为提高硕士研究生分子生物学实验技术的教学质量,在教学内容的选择、教学方法的改进、实验设施的分配与利用、考核体制的建立等方面进行改革,取得了较好效果,为研究生今后的科学研究和实际应用奠定基础。
- 邵敏王燕吕延成钟世军牛宪立
- 关键词：分子生物学实验教学教学改革硕士研究生
- 人蔗糖酶蛋白在大肠杆菌的诱导表达与纯化被引量：3
- 2015年
- 目的构建人蔗糖酶(h SUC)基因原核表达载体,诱导表达获得融合蛋白。方法采用反转录PCR法扩增得到h SUC基因片段,并将其克隆到表达载体p ET-28a(+)中,用异丙基硫代半乳糖苷(IPTG)诱导在大肠杆菌中表达,采用Ni柱亲和层析纯化重组蛋白,对表达蛋白进行SDS-PAGE和Western blot鉴定。结果克隆得到1482 bp目的基因,酶切和测序证实h SUC基因片段成功插入到p ET-28a(+)表达载体。表达的融合蛋白质相对分子质量(Mr)为61 240,Western blot结果显示融合蛋白可以与h SUC抗体特异性结合。结论成功在大肠杆菌中表达和纯化h SUC融合蛋白。
- 邵敏王新颖张青峰牛宪立王燕周鹤峰葛正龙
- 关键词：蔗糖酶Α-葡萄糖苷酶大肠杆菌蛋白纯化
- 人α防御素2真核表达载体的构建及表达
- 2014年
- 目的:构建人α防御素2(α-HNP2)真核表达载体pc DNA3.1/myc-His(+)/α-HNP2,并实现其在CHO细胞中的表达,初步鉴定表达蛋白的抑菌活性。方法:以PBMC细胞总RNA为模板,利用RT-PCR法,扩增得到α-HNP2基因,构建真核表达载体pc DNA3.1/myc-His(+)/α-HNP2,脂质体法转染CHO细胞,G418筛选稳定表达的阳性克隆。用RT-PCR和Western blot检测α-HNP2蛋白的表达,同时检测表达产物的抑菌活性。结果:经PCR、酶切和DNA测序分析表明重组载体构建成功,并在CHO细胞中表达融合蛋白,琼脂平板扩散实验结果表明融合蛋白在大肠杆菌平板上形成明显抑菌圈。结论:CHO细胞中表达有活性的融合蛋白α-HNP2,为进一步的实验研究奠定了基础。
- 邵敏余晓刘星葛正龙王燕周鹤峰
- 关键词：防御素CHO融合蛋白基因表达
- 猪笼草消化液中蛋白酶的活性初探被引量：4
- 2010年
- 为了进一步分析猪笼草瓶状体内消化液中蛋白质的性质,本研究在不同的温度和pH条件下测定消化液中蛋白酶的活性,并且比较了3种不同沉淀方法对消化液蛋白进行的浓缩,通过SDS-聚丙烯酰胺电泳对消化液蛋白作了初步分离。结果表明,猪笼草消化液中蛋白酶的最适酶活温度为50℃,且稳定性最高;当pH为5时,该蛋白酶活性出现峰值,采用氯仿-正丁醇法(5:1)沉淀浓缩猪笼草消化液蛋白样品效果最佳。聚丙烯酰胺电泳结果表明,消化液至少包括三种蛋白组分,分子量分别为24.3kD、35.1kD和61.4kD,且35.1kD条带具有抗胰蛋白酶消化活性。本研究为综合开发利用猪笼草野生资源提供理论依据。
- 唐历波姬可平王燕陈锦永
- 关键词：猪笼草蛋白酶活性
- hISO基因原核表达载体的构建及其在大肠杆菌中的表达及鉴定被引量：2
- 2016年
- 目的:构建原核表达载体pET-28a(+)-hISO,探讨其融合蛋白在大肠杆菌中的稳定表达情况,为后续实验研究奠定基础。方法:以Caco-2细胞的总RNA为模版,采用RT-PCR方法扩增出大小为1 770bp的人异麦芽糖酶(hISO)基因片段,将其插入到pET-28a(+)中,构建重组载体pET-28a(+)-hISO。经PCR、酶切及测序鉴定后,转化大肠杆菌BL21(DE3),IPTG诱导表达,亲和层析纯化重组蛋白,利用SDS-PAGE电泳、Western blotting对重组蛋白进行分析和鉴定。结果:经PCR、酶切及测序鉴定后,重组质粒pET-28a(+)-hISO构建正确,表达重组蛋白相对分子质量为68 860,将融合蛋白进行纯化,经40和60mmol·L-1咪唑缓冲液洗脱后能够得到浓度和纯度相对较高的蛋白。结论:成功地构建了hISO基因的原核表达载体,并在大肠杆菌中获得了融合蛋白表达。
- 邵敏王新颖刘星王燕周鹤峰葛正龙
- 关键词：原核表达Α-葡萄糖苷酶大肠杆菌
